【正文】 蟲密度和松墨天牛的體重和頭寬指標(biāo)來確定三者之間的相互影響。 （ 3）昆蟲 松墨天牛在恒定條件下培養(yǎng)（ 25℃， 16h 光照、 8h 黑暗），讓其繁殖 10 代，第七代到第十代成蟲用來在赤松小苗上產(chǎn)卵，收集天牛所產(chǎn)的卵并將其放置在濕紙巾上， 在一天之內(nèi)孵化的幼蟲用于實(shí)驗(yàn)。第二組枝條接種松材線蟲、松墨天牛和 PDA，第三組枝條接種松材線蟲和小喙長(zhǎng)霉，第四組枝條接種松材線蟲和 PDA。 結(jié)果 和結(jié)論 實(shí)驗(yàn)一 在 接種 18 天后，解剖松樹枝條，在樹皮下發(fā)現(xiàn) 20 只活的天牛幼蟲和 4 只死的天牛幼蟲，活天牛幼蟲包括 1 個(gè)一齡幼蟲、 2 個(gè)二齡幼蟲和 17 個(gè)三齡幼蟲，平均體重 ，平均頭殼寬 ，在幼蟲腸道內(nèi)發(fā)現(xiàn)糞便。天牛糞便的麥角固醇含量最大，其次為韌皮部和木質(zhì)部，方差分析顯示三 者之間存在極顯著差異。雙因素方差分析表明，線蟲密度受接種位置影響，但不受松樹枝條影響，松材線蟲密度最大為天牛糞便、其次為韌皮部和木質(zhì)部。沒有松墨天牛出現(xiàn)的松枝在接種 153164d 后分離，稱量幼蟲的鮮重和記錄頭寬、顏色、腸內(nèi)排泄物的有無以及幼蟲所在的位置。 松材線蟲懸濁液包括成蟲和幼蟲，懸濁液濃度為 50000 條 /mL。他們被垂直放置使線蟲遠(yuǎn)離容器底部。 解剖實(shí)驗(yàn)表明在單獨(dú)接種松材線蟲的 11 個(gè)松樹枝條中有 6 個(gè)松樹枝條可觀察到小喙長(zhǎng)霉菌，在 接種松材線蟲和人松墨天牛的 12 個(gè)松樹枝條中有 9 個(gè)松樹枝條可觀察到小灰長(zhǎng)霉菌，在單獨(dú)接種小灰長(zhǎng)霉菌的所有松樹枝條上的木質(zhì)部和韌皮部均有真菌分布。 創(chuàng)新性 指導(dǎo)意義 實(shí)驗(yàn)過程控制單因素變量 ，實(shí)驗(yàn)測(cè)定的指標(biāo)多樣，可以從不同角度反映實(shí)驗(yàn)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)分析多樣化，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)多次篩選，層層分析，增加數(shù)據(jù)可靠性。 韌皮 部、木質(zhì)部和糞便線蟲密度為 、 和 。 每天觀察松枝，記錄松墨天牛羽化情況，分性別記錄成蟲數(shù)量，體重和鞘翅長(zhǎng)分別精確到 和 。 （ 2）線蟲 強(qiáng)毒蟲株松材線蟲 T4 在 25℃條件下在灰葡萄孢上培養(yǎng)，使用前在 5℃條件下保存。 25℃ ， 16h 光照、 8h 黑暗， 相對(duì)濕度 100%條件下常溫培養(yǎng)，用純凈水保持濕度。在未接種松墨天牛幼蟲的松樹枝條，木質(zhì)部和韌皮部的 分別分離到線蟲量為 和 ，在接種松墨天牛幼蟲的松樹枝條上，木質(zhì)部、韌皮部和糞便中分別分離到 、 和 松材線蟲。 不足之處 實(shí)驗(yàn)中只考慮線蟲取食小喙長(zhǎng)霉菌，沒有考慮線蟲取食松樹枝條活細(xì)胞的 實(shí)驗(yàn)四研究松墨天牛對(duì)小喙長(zhǎng)霉菌影響，實(shí)驗(yàn)中在 6 個(gè)赤松枝條上均接種松墨天牛幼蟲和小喙長(zhǎng)霉菌，但 未在赤松枝條上 單獨(dú) 接種小喙長(zhǎng)霉菌作為對(duì)照。 實(shí)驗(yàn)二 在接種剛孵化的松墨天牛幼蟲的赤松枝條中存在天牛糞便，解剖發(fā)現(xiàn) 9 個(gè)活的天牛和 1 個(gè)死亡的天牛幼蟲，活天牛幼蟲平均體重為，頭殼寬 ，表明活天牛為三齡幼蟲，死亡天牛頭殼寬為 ，說明此為二齡幼蟲，解剖實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在 10 個(gè)松樹枝條的韌皮部存和 5 個(gè)松樹枝條的部分木質(zhì)部存在真菌。方法和實(shí)驗(yàn)一方法相同，培養(yǎng)條件 相同。 灰葡萄孢在 10 mL 的大麥籽粒上培養(yǎng) 。 接種 18 天后，從松枝上剝離樹皮，從枝條上取幼蟲和幼蟲糞便，記錄韌皮部和木質(zhì)部上藍(lán)變面積確定小喙長(zhǎng)霉的繁殖情況， 從縱向韌皮部上剝離四份之一到二分之一的樹皮，將樹皮外層剝離， 收集里面樹皮以獲得韌皮部樣品，再將里層樹皮的韌皮部剪切為 12mm 大小的樹皮塊，使用一把 15mm 寬的刀片，從接種松墨天牛幼苗和松材線蟲的地方包括髓取木質(zhì)部樣品，記錄木質(zhì)部樣品真菌繁殖情況，糞便、韌皮部和木質(zhì)部分別在 25℃下使用貝爾曼漏斗法分離 4872h，計(jì)算分離線蟲濃度，材料在 60℃下烘 512d，稱重， 線蟲密度表示每克材料干重中松材線蟲的數(shù)量。平均線蟲密度隨接種位置、松墨天牛幼蟲及真菌的有無而不同 ，在未接種真菌 的松樹枝條木質(zhì)部的松材線蟲密度小于其他接種位置的松材線蟲密度，小于接種真菌的松樹枝條。 References Akbulut S, Linit MJ (1999) Flight performance of Monochamus carolinensis (Coleoptera: Cerambycidae) with respect to nematode phoresis and beetle characteristics. Environ Entomol 28:1014–1020. Arakawa Y, Togashi K (2022) Newly discovered transmission pathway of Bursaphelenchus xylophilus from males of the beetle Monochamus alternatus to Pinus densiflora trees via oviposition w