酵母rna的提取及組份鑒定與核酸的定量測(cè)定(存儲(chǔ)版)
【正文】 值； ? L──比色杯的厚度， 1cm； N為稀釋倍數(shù)； ? ──每毫升溶液內(nèi)含 1μgRNA的 A值； ? ──每毫升溶液內(nèi)含 1μgDNA鈉鹽的 A值。從甲、乙兩管中分別吸取 ，用蒸餾水定容至 50mL。放沸水浴中 10min。加畢，靜置，待 RNA沉淀完全后， 3000r/min離心 3min。 ? 定磷試劑： ? （ 1） 17％硫酸：將 17mL濃硫酸（比重 1084）緩緩傾入 83mL水中； ? （ 2） ％鉬酸銨： 100mL水中； ? （ 3） 10％抗壞血酸溶液： 10g抗壞血酸溶于 100mL 水，棕色并保存溶液； ? 臨用時(shí)將三種溶液和水按下列比例混合： ? 17％硫酸： ％鉬酸銨： 10％抗壞血酸：水＝ 1： 1： 1： 2（ V/V）。測(cè)得未知濃度核酸溶液的 A260nm值，即可以計(jì)算出其中 RNA或 DNA的含量。濃鹽法使用 10%左右氯化鈉溶液， 90℃ 提取 34h，迅速冷卻，提取液經(jīng)離心后 , 上清液用乙醇沉淀 RNA。 ?（３）學(xué)習(xí)紫外線（ UV）吸收法測(cè)定核酸濃度的原理。其中苯酚法又是實(shí)驗(yàn)是最常用的。 ? RNA含有核糖、嘌呤堿、嘧啶堿和磷酸各組分。通常蛋白質(zhì)的吸收高
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