【正文】 年 月 日 評閱人評審意見： 評閱人（簽字）： 年 月 日 注：答辯委員會(huì)意見除填寫簡要評語、給出成績外，還要提出是否授予學(xué)位的建議。編號（學(xué)號）： 166740019 畢 業(yè) 論 文 （ 2021 屆本科） 題 目： 銀杏果多糖抗氧化活性的初步研究 學(xué) 院： 生 物 學(xué) 院 專 業(yè)： 生 物 工 程 姓 名： 周 銘 銘 指導(dǎo)教師： 徐 艷 老 師 完成日期： 2021 年 6 月 15 日 畢業(yè)論文 (設(shè)計(jì) )任務(wù)書 論文 (設(shè)計(jì) ) 題目 銀杏果多糖抗氧化活性 的初步研究 下發(fā)任務(wù)日期 學(xué)生姓名 周銘銘 指導(dǎo)教師 徐艷 老師 一 . 論文（設(shè)計(jì)）主要內(nèi)容 以銀杏果為研究對象，從中分離提取銀杏果多糖，并通過 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 測定 多糖含量。 答辯委員會(huì)意見： 主任委員（簽字）： 年 月 日 成績： 目 錄 中文摘要 （ 關(guān)鍵詞 ） ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉ ┉┉┉ 1 英文摘要（ 關(guān)鍵詞 ） ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉ ┉┉┉2 前言 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉ ┉┉┉┉ 3 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉ ┉┉┉ 6 材料 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉ ┉┉┉ 6 ┉ ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉ ┉┉┉┉┉┉ ┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ 6 銀杏果多糖的提取 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉ ┉┉┉┉┉┉ ┉┉ 6 銀杏果多糖的含量測定 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉ ┉┉┉┉┉ ┉ 6 銀杏果多糖抗氧化活性的體外測定┉┉┉┉┉┉ ┉┉ ┉┉┉ ┉┉ ┉┉┉┉ ┉┉┉ 7 清除 DPPH 活性的測定┉┉┉ ┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉┉ ┉┉ 7 還原力的測定┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉ ┉┉┉┉ 7 抗卵黃脂質(zhì)過氧化活性的測定 ┉┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉┉ 7 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉ 8 清除 DPPH 活性的測定結(jié)果┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉ 9 抗卵黃脂質(zhì)過氧化活性的測定┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉┉┉┉ ┉┉┉ 11 還原力的測定結(jié)果 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ 11 4 結(jié)論與討論 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ 12 結(jié)論 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ 12 討論 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ 13 參考文獻(xiàn) ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ 14 致謝 ┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉┉ ┉ 16 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 1 摘 要 銀杏果多糖屬天然植物提取物，提取過程中環(huán)保無污染，具有無細(xì)胞毒性及其它副作用的優(yōu)點(diǎn)，因此對其進(jìn)行研究和將其開發(fā)成天然抗氧化劑或自由基清除劑對保障機(jī)體健康、預(yù)防疾病有重要意義。 The chicken egg yolk lipoprotein lipid peroxidation model reduction。 銀杏起源于中國，它集果用、葉用、樹用、防護(hù)、觀賞于一體，是我國特有的多用途樹種 [3]，我國銀杏大多分布在北緯 19176。根據(jù)研究目前已知銀杏的藥用成分有 170 余種，包括：黃酮類、萜內(nèi)酯類、有機(jī)酸類、氨基酸、糖類、醇類、微量元素及其他（維生素、葉綠素、生物堿類等） [6]，銀杏提取物的有效成分是開發(fā)利用該植物資源時(shí)考慮的核心問題。有研究人員用 HPLC法測定銀杏葉中氨基酸總量達(dá) ，其中所含的 8種人體必需氨基酸占氨基酸總量的 %[9]。銀杏葉色素主要有葉綠素、類胡蘿卜素、花青素和黃酮類物質(zhì)，在銀杏葉中類胡蘿卜素含量早期上升較快，于 6 月中旬達(dá)到全年最大值，此后含量下降，在 10 月中旬降解迅速，葉綠素中以葉綠素 a為主 [14]。上述銀杏多糖是從銀杏葉和銀杏外種皮中提取的 本文敘述的是 有關(guān)銀杏白果多糖 的研究 。多糖作為無毒副作用具有生物活性的大分子化合物，已成為成為食品科學(xué)、天然藥物、生物化學(xué)與生命科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn) [23,24]。結(jié)果表明銀杏白果多糖與銀杏葉多糖、銀杏外種皮多糖顯著不同 ,對其進(jìn)行深入的研究將為銀杏白果的藥理研究及其臨床應(yīng)用和開發(fā)提供重要的基礎(chǔ)資料。 銀杏果多糖的提取 銀杏果去核，過 40 目篩 80%乙醇回流浸提 ( 水浴溫度 60℃ )，過濾，濾渣風(fēng)干樣品稱重，水提取抽濾，粗多糖提取液濃縮至原體積的 1/4，醇析沉淀，冷凍干燥，多糖粗品。 抗卵黃脂質(zhì)過氧化活性的測定 采用依賴雞卵黃脂蛋白的脂質(zhì)過氧化模型，將新鮮卵黃用等體積的 采用提取物與穩(wěn)定自由基 DPPH 反應(yīng)的分析方法 ， 通過對 DPPH 自由基清除作用 ；對 雞卵黃脂蛋白的脂質(zhì)過氧化模型 的還原作用；以及對鐵離子的還原作用 ， 來 研究銀杏果多糖抗氧化活性 。 而通過圖 2顏色對比我們可以看出隨著銀杏果多糖濃度的升高，相應(yīng)的試管顏色越來越淺，這也可以表示為 銀杏果多糖對 DPPH自由基的清除效果與其質(zhì)量濃度緊密相關(guān)。 得到結(jié)論如下圖： 銀杏果多糖抗氧化活性的初步研究 10 圖 3銀杏果多糖 對卵黃脂質(zhì)過氧化抑制率 圖 4銀杏果多糖 對卵黃脂質(zhì)過氧化抑制率 通過圖 3銀杏果多糖對卵黃脂質(zhì)過氧化抑制率的曲線可以看出，銀杏果多糖對卵黃脂質(zhì)過氧化有抑制作用，而對卵黃脂質(zhì)過氧化的抑制作用可以反映銀杏果多糖的抗氧化性。 3. 3 還原力的測定結(jié)果 分別取 mL 不同濃度的樣品于試管中，依次加入 2. 5 mL0. 2 moL /L pH 6. 6 的磷酸鹽緩沖液和 2. 5 mL 1% K3［ Fe( CN) 6］于 50 ℃水浴保溫 20 min 后，快速冷卻，再加入 2. 5 mL 10% TCA， 以 4 000 r /min 離心 10min， 取上清液 2. 5 mL，依次加入 2. 5 mL 重蒸水， 0. 5mL 0. 1%FeCl3，充分混勻， 靜止 10 min，以蒸餾水為對照在 700 nm處測定吸光度值。而通過曲線可知，銀杏果多糖對 DPPH自由基的清除效果與其質(zhì)量濃度緊密相關(guān)。較濃的亞鐵離子鹽溶液呈現(xiàn)深綠色 ,稀溶液呈現(xiàn)淺綠色，而鐵離子呈現(xiàn)淺黃色，因此透過圖片我們可以明顯看出，銀杏果多糖表現(xiàn)出了很強(qiáng)的還原能力，并且隨著銀杏果多糖質(zhì)量密度的遞增，對鐵離子的還原程度也在逐步提升。銀杏果多糖表現(xiàn)出了很強(qiáng)的抗氧化能力，隨著銀杏果多糖質(zhì)量密度的遞增，對卵黃脂質(zhì)過氧化抑制率也在逐步提升。人們對銀杏多糖的研究主要集中在銀杏葉和銀杏外種皮上，對于銀杏果多糖的研究卻比較匱乏。在此向?qū)熜炱G致以我最誠摯的謝意！在我撰寫論文的過程中，徐艷老師傾注了大量的心血和汗水，無論是在論文的選題、構(gòu)思 和資料的收集方面，還是在論文的研究方法以及成文定稿方面，我都得到了老師悉心細(xì)致的教誨和無私的幫助，在此期間的收獲使我終生受益，在此表示真誠地感謝和深深的謝意！ 在論文的實(shí)驗(yàn)過程中，同組的同學(xué)給了我極大的幫助，并提出了很多寶貴的意見，在此向他們致以衷心的感謝！另外，在論文的完成過程中，我也得到了沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)生物工程課題組所有師兄師姐的幫助和指導(dǎo)；同寢同學(xué)王帥、董楠等也給予了我熱心的幫助。通過以上分析可以得到，銀杏果多糖有較強(qiáng)的供氫能力。通過以上分析可以得到，銀杏果多糖有對卵黃脂質(zhì)過