蛋白組學(xué)翻譯后修飾(存儲版)
【正文】 N端 fMet或 Met的切除：原核生物的肽鏈，其 N端不保留 fMet，大約半數(shù)蛋白由脫甲酰酶（ deformylase）除去甲?；?，留下 Met作為第一個氨基酸；在原核及真核細胞中 fMet或者 Met一般都要被除去 ? 二硫鍵的形成 ? 化學(xué)修飾 ? 剪切：很多的前體蛋白要經(jīng)過剪切后方可成為成熟的蛋白 ，如胰島素 蛋白質(zhì)的翻譯后化學(xué)修飾 ? 蛋白質(zhì)翻譯后修飾在生命體中具有十分重要的作用，它使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更為復(fù)雜 , 功能更為完善，調(diào)節(jié)更為精細 , 作用更為專一。 磷酸化蛋白質(zhì)的檢測 ? 32P放射性同位素法 ? 抗體免疫印跡法 32P放射性同位素法 autoradiography ? ?32PATP滲入培養(yǎng) ? 蛋白樣品的制備 ? 雙向電泳 ? 檢測 ? 考染或者銀染 ? 放射自顯影 ? 差異點分析 ? 檢測 放射性同位素法 ? 優(yōu)點 ? 靈敏 ? 直觀 ? 局限 ? 同位素污染，操作不方便 ? 若磷酸化轉(zhuǎn)換速率低，則難以檢測 ? 不能區(qū)分不同殘基的磷酸化 抗體免疫印跡法 ? 蛋白樣品的制備 ? 雙向電泳 ? 檢測 ? 考染或者銀染 ? 免疫印跡（磷酸化特異抗體） ? 差異點分析 ? 檢測 抗體免疫印跡法 ? 優(yōu)點 ? 靈敏 ? 直觀 ? 克服同位素法的局限 ? 無同位素污染，操作相對方便 ? 可檢測無磷酸化轉(zhuǎn)換的蛋白 ? 能區(qū)分不同殘基的磷酸化 磷酸化肽段的分離和富集 ? 使用磷酸化蛋白的抗體 ? IMAC法 ? 磷酸基團親和取代 磷酸化蛋白的抗體 ? 目前已經(jīng)開
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