【正文】 析天平先精確稱其重量，取 50ml 發(fā)酵液 4000rpm離心 10min，將上清倒出至另一離心管中備用測其他參數(shù)，大概讀取菌體沉淀體積，得到離心體積百分比。 R C H C O O H + 2 H C H O R C H C O O + H +N H2 N ( C H 2 O H ) 2 (2)試劑配制 Ⅰ、 %甲基紅指示劑： g指示劑溶于 100 mL 60%乙醇中。 電子天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠 真空干燥箱 上海第三分析儀器廠 紫外可見分光光度計 上海第三分析儀器廠 真空泵 鞏義市英峪予華儀器廠 安捷倫液相色譜儀 美國 Agilent公司 臺式恒溫?fù)u床 江蘇太倉市實驗設(shè)備廠 電熱式壓力蒸汽消毒器 無錫第二醫(yī)療器械廠 超凈工作臺 蘇州空氣凈化設(shè)備廠 pH計 北京 Hanna公司 W501升降恒溫水浴鍋 上海申順生物科技有限公司 高壓液相 3 試驗方法 發(fā)酵培養(yǎng) 將茄子瓶斜面用 50 mL 無菌水洗下，以 %的接種量接入培養(yǎng)基 ， 其他控制條件參考過程中具體控制參數(shù)。 20xx年 5月，青島科海改造衣康酸生產(chǎn)線，以淀粉原料采用發(fā)酵工藝單效蒸發(fā)裝置生產(chǎn) 2萬噸葡萄糖酸鈉； 20xx年 10月，山東凱翔與山東省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計院合作采用發(fā)酵工藝和多效蒸發(fā)技術(shù)建成 3萬噸葡萄糖酸鈉生產(chǎn)線， 20xx年擴(kuò)至 5萬噸，蒸發(fā)技術(shù)已申請國家專利并獲授權(quán)，技術(shù)指標(biāo)和質(zhì)量指標(biāo)處于國內(nèi)領(lǐng)先水平； 20xx年濟(jì)南華明采用發(fā)酵法投產(chǎn) 2萬噸生產(chǎn)線； 20xx年開始西王集團(tuán)在賴氨酸生產(chǎn)線上改建 20萬噸葡萄糖酸鈉；20xx20xx年德州福洋、兗州百盛相繼投產(chǎn) 5萬噸葡萄糖酸鈉生產(chǎn)線 。在葡萄糖酸快速合成的過程中需要氧的供給。其中多相催化氧化法具有工藝過程簡單、反應(yīng)條件溫 和 (各種氣 液 固三相混合的反應(yīng)器在常壓均可采用 ，反應(yīng)溫度一般控制在 60 ℃以下 )反應(yīng)時間短、轉(zhuǎn)化率高、三廢少且易處理的特點 ，此法關(guān)鍵是催化劑的性能及循環(huán)使用的次數(shù)。向溶液中通入空氣，并不斷滴加一定濃度的 NaOH 溶液來維持一定的 pH值。流程繁瑣，成本較高。菌體與發(fā)酵液分離后，發(fā)酵液經(jīng)真空濃縮、結(jié)晶可得葡萄糖酸鈉晶體， 或經(jīng)噴霧干燥后制得葡萄糖酸鈉粉狀產(chǎn)品。 ⑷滅公害。 用作水質(zhì)穩(wěn)定劑 由于葡萄糖酸鈉具有優(yōu)異的緩蝕阻垢作用，所以被廣泛用于水質(zhì)穩(wěn)定劑，例如作為石油化工企業(yè)循環(huán)冷卻水系統(tǒng)，低壓鍋爐，內(nèi)燃機冷卻水系統(tǒng)等處理藥劑。 葡萄糖酸鈉作為緩凝劑 葡萄糖酸鈉能夠顯著延緩混凝土的起始的和終了的凝固時間。 通過加入葡萄糖酸鈉能夠獲得如下的效果： 增進(jìn)工作性 在水對水泥比（ W/C）不變的情況下，加入葡萄糖酸鈉能增進(jìn)工作性。通常在水泥中同時使用數(shù)種摻合劑，各種不同的摻合劑在一些應(yīng)用中能互相強化。因此葡萄糖酸 鈉作為水泥摻合劑在國外已大量應(yīng)用于重要的建筑工程，如中東的大量橋梁工程中。工業(yè)級的葡萄糖酸鈉是建筑工業(yè)上混凝土的塑化劑，食品級的葡萄糖酸可作為食品行業(yè) 的酸味劑。該產(chǎn)品熱穩(wěn)定性好 ， 無潮解性 ， 由于其優(yōu)良的螯合性能而被廣泛用于水質(zhì)處理、電鍍、金屬與非金屬的表面清洗及水泥生產(chǎn)等多種工業(yè)部門 ， 在化工、食品、醫(yī)藥、輕工等行業(yè)有著廣泛的用途 。另外高溫時膠接油井是比較困難的，添加了葡 萄糖酸鈉后的混凝土在 170℃高溫下，在幾個小時內(nèi)可塑，因此也能圓滿解決上述問題?；炷林械膿胶蟿┠芴峁┮恍┯幸娴淖饔萌缂铀倌?，延緩凝固，使空氣成氣泡狀存在，減少用水量和增加 塑性等等。 葡萄糖酸鈉作為減水劑 通過加入減水劑，水對水泥比（ W/C）能夠減小。 一般情況下，下列兩方面對混凝土的性能說很為重要：收縮和產(chǎn)生熱量。（八十年代已在上海汽水廠，上海啤酒廠做大型試驗，有鑒定證明）這方面的應(yīng)用國內(nèi)尚未開發(fā)，若形成市場，潛力很大。 ⑶阻垢能力強：對鈣，鎂，鐵鹽具有很強的絡(luò)合能力，所以阻垢能力很強，特別對 Fe3+有極好的螯合作用，甚至在全 PH范圍內(nèi)部有作用。 整個發(fā)酵過程約需 20h，當(dāng)殘?zhí)墙抵?1g/L時可以認(rèn)為發(fā)酵結(jié)束。為此必須將氧化后的反應(yīng)液用酸酸化，使生成的葡萄糖酸鈉轉(zhuǎn)化為內(nèi)酷，蒸出水后再用有機溶劑萃取，使氯化鈉與內(nèi)醋分離，然后再用堿中和，使內(nèi)醋轉(zhuǎn)化為葡萄糖酸鈉。 多相催化氧化法 配制一定量的葡萄糖溶液加入于四口 燒瓶中， 稱取適量催化劑加入到此燒瓶中，恒溫。在工業(yè)化生產(chǎn)上 ， 生物發(fā)酵法和多相催化氧化法應(yīng)用較多。從化學(xué)反應(yīng)方程式來看在合成途徑中生成一分子 FADH2， FADH2在呼吸鏈中以氧為受體被氧化。進(jìn)入 21世紀(jì)初，產(chǎn)品應(yīng)用研究很活躍，應(yīng)用效果十分顯著。 7H KH2P04 、 (NH4)2HPO4為國產(chǎn)分析純。氨基酸與甲醛反應(yīng)生成二羥甲基氨基酸，這個反應(yīng)是中和法測定氨基酸和定量的依據(jù)，稱為甲醛滴定法 (formol titration)。 (3)測定方法 準(zhǔn)確吸取發(fā)酵離心上清液 1025 mL于 250 mL三角瓶中，加蒸餾水 50 mL，甲基紅指示劑 2滴，用 N鹽酸調(diào)至紅色，再用 0. 05 N氫氧化鈉調(diào)至橙黃色，加 18%中性甲醛 4 mL，搖勻放置 10 min，加酚酞指示劑 8滴，用 N氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色。由發(fā)酵綜合曲線可知，在22h時開始流加碳源，因此曲線上顯示 葡萄糖的含量有所上升，但又被短時間內(nèi)耗竭?；蛟S可以調(diào)整發(fā)酵條件來使后期的菌體生長放緩 菌體生長情況 在 0~32 h內(nèi)每隔 8 h取樣，對菌體進(jìn)行拍照，菌體生長情況如下圖所示，由圖可知，在 0~8 h內(nèi)在顯微鏡下無法觀察到菌體，在 16 h以后可以觀察到較明顯的菌絲。 5 展望 目前國內(nèi)發(fā) 酵法生產(chǎn)葡萄糖酸鈉的企業(yè)初糖濃度超過 30%，周期不足 30h，蒸汽單耗 2噸左右，電耗達(dá)到 450kwh以內(nèi)，發(fā)酵設(shè)備由初期的 50m3發(fā)展到400m3，供風(fēng)采用國外高壓離心式壓縮機；發(fā)酵攪拌采用半氣升式節(jié)能裝置，大大減少了發(fā)酵能耗；提取設(shè)備由原來單效蒸發(fā)、間歇降溫結(jié)晶，變?yōu)槎嘈нB續(xù)蒸發(fā)結(jié)晶工藝，使蒸發(fā)每噸水的蒸汽耗量降到 。因此，要使得生物發(fā)酵法生產(chǎn)葡糖酸使用更加廣泛，必須提高葡糖酸產(chǎn)量。葡萄糖酸鈉市場和應(yīng)用領(lǐng)域進(jìn)一步擴(kuò)大，原有企業(yè)將擴(kuò)大產(chǎn)能，并不斷有新企業(yè)上馬 葡萄糖酸 用途廣泛，在多個行業(yè)均有廣泛應(yīng)用前景，市場需求大。R和 CO2釋放速率 CER上升；④ RQ值在開始不斷下降，說明此時 O2 消耗速率 OUR的增大速率要大于和 C