植物組織培養(yǎng)第六章植物細胞培養(yǎng)(存儲版)
【正文】 體、不定芽等繁殖體 （ 4）液膠包埋系統(tǒng) 優(yōu)點： （ 1）使自然條件下不易結實或種子昂貴的材料能快速繁 殖和保存 （ 2）繁殖速度快，以一個體積為 12L的發(fā)酵罐計算，在二十幾天內可產生胡蘿卜體細胞胚 1000萬個 （ 3）固定雜種優(yōu)勢，可使 F1雜種優(yōu)勢多代利用，使優(yōu)良單株快繁成無性系而多代利用，保持雜種材料的遺傳穩(wěn)定性 優(yōu)點： （ 4）由于從任何材料都能得到胚狀體，為基因工程技術應用于生產提供橋梁 （ 5）在人工種子的制作中，加入各種營養(yǎng)成分或生長調節(jié)劑，調節(jié)植物生長，提高植物抗逆性 （ 6）常規(guī)種子繁殖每年消耗大量糧食供播種，人工種子在一定程度上可取代天然種子而節(jié)約糧食，同時人工種子體積小，貯運方便，而且可以像天然種子那 樣播種育苗。 人工種子萌發(fā)的幼苗中弱苗和畸形苗較多，其主要原因是人工種子的質量問題，包括體細胞胚的發(fā)育和完熟程度、遺傳 變異的影響等。但人工種子含水量大，常溫下易失水變干，因此人工種子的保存是目前研究的一個難題。 利用培養(yǎng)過程中染色體的自發(fā)加倍現象，也可使單倍體細胞加倍，獲得純合二倍體植株，在遺傳育種上有重要意義。 二、突變體選擇 （ 2）間接選擇法（負選法） 適用于目標表現型不具有選擇上的優(yōu)勢，即細胞未產生某種抗性物質，而是產生了一種代謝形式或表現形式的性狀。 （二）生產轉化 定義：利用生物系統(tǒng)通過水解、加氫、羥基化作用、氧化還原及脂化反應，將有機分子轉化為新的化合物的過程。加入 EDTA使鐵和其他金屬離子長期處于可利用狀態(tài)。當細胞受到這些化學藥物處理后，由于這些核苷酸類似物的存在阻止了 DNA的合成，細胞周期只能進行到 G1期，細胞都滯留在 G1期和 S期的邊界，當把這些抑制劑除去后，細胞就進入同步分裂。但實際所需的時間和接種量應視不同細胞系而定。 （ 3）適于大規(guī)模工業(yè)化生產。 （ 4）成批培養(yǎng)結束后，若要進行下一批培養(yǎng)，必須另外進行繼代培養(yǎng)，其方法是用注射器吸取一定量的含單細胞和小細胞團的懸浮培養(yǎng)物，并移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶里，繼續(xù)進行培養(yǎng)。 （ 3）接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng) 2周。 建立在愈傷組織的液體培養(yǎng)技術基礎上。 （二）微室培養(yǎng)法 人工制造一個小室（載玻片和蓋玻片），將單細胞培養(yǎng)在小室中的少量培養(yǎng)基上，使其分裂增殖成細胞團的方法。 不適用于所有植物 酶解法：利用果膠酶處理葉片，使細胞間的中膠層發(fā)生降解，分離出具有代謝活性的細胞。掌握植物細胞懸浮培養(yǎng)的意義和細胞株篩選方法，了解懸浮培養(yǎng)類型及方法，清楚細胞懸浮培養(yǎng)的應用。 （ 1）取處于活躍生長期約 1厘米大小愈傷組織塊。 （三）平板培養(yǎng)法 平板培養(yǎng)法是把單個細胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合，并平鋪一薄層在培養(yǎng)皿底上的培養(yǎng)方法。 愈傷組織誘導 材料自來水沖洗 —— 75%的乙醇擦洗 —— 將材料切成小塊（帶形成層） —— 接種到 MS+2,4D 2mg/L+CH 500mg/L+瓊脂 %,上 —— 得愈傷組織 —— 擴大繁殖。 一、培養(yǎng)類型和方法 （一）成批培養(yǎng) 指把細胞分數在一定容積的 培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，當培養(yǎng)物增殖到一定量時，轉接繼代，建立起單細胞培養(yǎng)物。 是利用特制的培養(yǎng)容器進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)的一種方式。 封閉型連續(xù)培養(yǎng)： 在培養(yǎng)過程中，排除的舊培養(yǎng)基由加入的新鮮培養(yǎng)基進
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