tlc基本原理(存儲版)
【正文】 分的類型，其極性的大致歸屬，從提取液或從色譜柱的流動相極性可知，另外某樣品里含多種化學成分先按極性不同大致分，然后細分，對于分離未知的化學物質，展開劑的選擇也是一個摸索的過程，不應該僅僅從展開劑考慮，多因素綜合衡量！溶劑：層析過 程中溶劑的選擇，對組分分離關系極大。如果極性增大過訣（梯度太大），就不能獲得滿意的分離。當然，中草藥成分的整體分子觀是重要的，例如極性基團的數(shù)目愈多，被吸附的住能就會更大些，在同系物中碳原子數(shù)目少些，被吸附也會強些?，F(xiàn)以實例說明吸附層析中吸附劑、洗脫劑與樣品極性之間的關系。 1．薄層層析的特點：薄層層析在應用與操作方面的特點與柱層析的比較。 薄層色譜小知識 怎樣提高點樣效率？ 點樣是造成 TLC 定量誤差的主要來源。流動相強度越大，溶質 Rf 值越大，但很可能降低分離能力；另外單一溶劑很難分離較復雜的混合物、根據(jù)相似相溶原理，要使用多元溶劑體系。經(jīng)典 TLC樣點原點一般為直徑 3mm點間距離12cm 底邊距離 。中草藥化學成分在脂溶性成分中，大致可按其極性不同而分為無極性、弱極性、中極性與強極性。一般將柱層析用的吸附劑撒布到平面如玻璃片上，形成一薄層進行層析 時一即稱薄層層析。采用的洗脫劑極性應由小到大按某一梯度遞增，或可應用薄層層析以判斷被分離物在某種溶劑系統(tǒng)中的分離情況。在指定的吸附劑與洗脫劑的條件下，各個成分的分離情況，直接與被分離物質的結構與性質有關。然后漸增大溶劑的極性。溶劑的含水量和雜質含量對分離效果都有明顯的影響。展開劑的選擇條件：①對的所需成分有良好的溶解性；②可使成分間分開；③待測組分的 Rf 在 ~，定量測定在 ～ ；④不與待測組分或吸附劑發(fā)生化學反應；⑤沸點適中，黏度較小；⑥展開后組分斑點圓且集中；⑦混合溶劑最好用新鮮配制。對于在硅膠中這種酸性物質上易分解的物質，在展開劑里往往加一點點三乙胺，氨水，吡啶等堿性物質來中和硅膠的酸性。過一定時間后，再取反應混合物樣液點樣、展開、顯色，如發(fā)現(xiàn)反應混合液樣中相應于原料斑點的位置處，無斑點或斑點變小，則說明反應已經(jīng)完成或接近完成，所以依此可跟蹤有機化學反應。 點樣前，可先用鉛筆在小板上距一端 5mm處輕輕劃一橫線，作為起始線，然后用毛細管吸取樣品在起始線上小心點樣，如需重復點樣，則應待前次點樣的溶劑揮發(fā)后方可重點。 操作要點和說明 薄層色譜法的整個過程包括以下步驟： 薄層板的制備 制薄層板的主要原料是吸附劑和粘結劑 吸附劑：最常用于 TLC 的吸附劑為硅膠 GF254； 硅膠 HF254。薄層的展開在密閉的容器中進行。展開劑的選擇條件： ① 對的所需成分有良好的溶解性； ② 可使成分間分開； ③ 待測組分的 Rf 在 ~ 之間，定量測定在 ～ 之間； ④ 不與待測組分或吸附劑發(fā)生化學反應； ⑤ 沸點適中，黏度較小；⑥ 展開后組分斑點圓且集中； ⑦ 混合溶劑最好用新鮮配制。溶劑的含水量和雜質含量對分離效果都有明顯的影響。我們在實驗中，為了實現(xiàn)一
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