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外文翻譯--運用實時pcr技術(shù)監(jiān)測生物浸出黃銅礦中的嗜熱微生物的數(shù)量(存儲版)

2025-07-01 05:48上一頁面

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【正文】 Cr2O7)。定期分析樣品中銅,總?cè)芙忤F,亞鐵, pH值,以及菌落結(jié)構(gòu)。 生物浸出試驗,用 500毫升搖瓶含 200培養(yǎng)基在 45 176。 7H2O, 。 KH2 PO4, 3。 9K培養(yǎng)基(克 /升): (NH4)2SO4, 3。 2020年),和 Sulfobacillus藻。這種方法代表在分析浸礦微生物數(shù)量方面的一種重要進(jìn)步,但它是耗費時間和人力。 限制性片段長度多態(tài)性,單鏈構(gòu)象多樣,變性梯度凝膠電泳被用來揭示浸出環(huán)境菌落 的結(jié)構(gòu)(微生物 2 群落巴塔利亞,布呂內(nèi)等人。上述結(jié)果表明,這些簡單的社區(qū)可以很容易地構(gòu)建。 C和微生物群落分析,表現(xiàn)出越來越大的興趣(Okibe et 。 2020年)曾建議,端螺旋菌屬, caldus, Sufobacillus菌。 2020 年)。黃銅礦溶解度可以通過測量可溶性銅,三價鐵, 和 pH變化值。 caldus)和 chemomixotrophic( Sulfobacillus 和 F.)的效果是最好的。近年來,一些研究(戈貝爾和 Stackebrandt 1994。一個數(shù)據(jù)研究還表明,在高溫條件下,溶銅從礦石中溶解更有效(露等人。 ( 2020 年)分析了三地的菌群在攪拌缸中攪拌,多金屬氧化集中在 45 176。) 和一個古菌( Ferroplasma MT17)的研究(沖部和約翰遜 2020年)。 2020年,迪亞比等人。 這項工作的目標(biāo)是,從各種混合中度嗜熱嗜酸文化和監(jiān)測黃銅礦生物浸出過程中的種群動態(tài)采用實時定量 PCR技術(shù)來比較黃銅礦溶解效率。微生物是生長在適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)基介質(zhì)中45 176。 MgSO4CaCl2 FeSO4礦石濃度為 2%( w/v)。 caldus S2的湖嗜鐵鉤端螺旋菌 YSK和 11。培養(yǎng)瓶中細(xì)胞的密度的測定用 1細(xì)胞計數(shù)儀。 設(shè)計特異性 PCR引物 在這項研究中使用的引物列于表 1 。 PCR擴(kuò)增 在 95℃下 5分鐘,其次是35個循環(huán)的 95℃下 15秒, 55℃下 30s, 72℃下 30秒,最后一循環(huán)為 72℃下 7分鐘。實時 PCR法師組合(東洋紡有限公司有限公司,大阪,日本),其中包含 Taq DNA聚合酶, dNTP濃度,氯化鎂,和 SYBR Green I的染料, 2 ul反義引物, 5微升模板 DNA,和添加 H2O定容到微升。全部都是一式三份進(jìn)行測試。 1b中的 pH值的生物浸出系統(tǒng)先上升后下降。 在浸礦系統(tǒng) 5,初始細(xì)胞密度分別為約 4 107細(xì)胞毫升 1,然后中間階段總的細(xì)胞密度原核生物細(xì)胞為 108 ml 1的。 實時 PCR檢測驗證 所有的標(biāo)準(zhǔn)曲線具有很高的相關(guān)系數(shù),類似的擴(kuò)增效率,以及類似的斜率(見表 2)。滲濾液樣品撤回后 15日和第 28天。 L. ferriphilum YSK 5 的 16S rRNA基因拷貝總數(shù)在的從中期階段的 20%的中下降至尾期約 2%。 16S rRNA基因的變異每一株副本應(yīng)大致代表的人口動力。據(jù)說在 At. caldus s2的可能貢獻(xiàn),間接地通過產(chǎn)生酸性硫化物礦物氧化,并經(jīng)刪除元素硫,否則可能損害溶解過程形成鈍化 層(多普森與林斯特龍, 1999年)。 生物淋濾的硫化物有兩種基本的機(jī)制。在我們的實驗中,溶解黃銅礦也經(jīng)歷了類似的變化。 ferriphilum具有較高的比生長速率和亞鐵嗜熱氧化速度比樓,這在導(dǎo)致浸出效率更 高。然而,作為 一個強(qiáng)制自養(yǎng)生物, YSK對有機(jī)材料敏感。 References [1]BattagliaBru F, Clarens M, d’Hugues P, Godon JJ, Foucher S,Morin D (2020) Monitoring of a pyriteoxidising bacterial population using DNA singlestrand conformation polymorphism and microscopic techniques. Appl Microbiol Biotechnol 60:206–211 [2]Demergasso CS, Galleguillos PA, Escudero LV, Zepeda VJ, Castillo D, Casamayor EO (2020) Molecular characterization of microbial populations in a lowgrade copper ore bioleaching test 80:241–253 [3]Dew DW, Van Buuren C, McEwan K, Bowker C (2020) Bioleachingof base metal sulphide concentrates: a parison of high and low temperature bioleaching. J S Afr I Min Metall 100:409–413 [4]Diaby N, Dold B, Pfeifer HR, Holliger C, Johnson DB, Hallberg KB(2020) Microbial munities in a porphyry copper tailings impoundment and their impact on the geochemical dynamics of the mine waste. Environ Microbiol 9:298–307 [5]Dopson M, Lindstr246。一些鐵和 sulfuroxidizingmixotrophs是利用有機(jī)可化合物,并可能加速氧化礦物(或至少更有效地)(約 翰遜 1998。其中包括硫元素和許多 polythionates中間體容易補(bǔ)氧化硫細(xì)菌氧化同,如 At. caldus。 群落 2沒有群落 3有效。然后,這些化合物是生物氧化為鐵( III)離子和硫酸。 Golyshina等人。他們也往往選擇建造 39。因此,被允許作為標(biāo)準(zhǔn)曲線使用。 分析結(jié)果表明,群落 4的群落結(jié)構(gòu)在生物浸 出急劇變化過程(圖 3)。結(jié)果表明,該方法可用于檢測和 量化提取樣本含有混合菌種目標(biāo) DNA。 驗證 PCR產(chǎn)物的特異性 常規(guī) PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物質(zhì)量用 %( w/v)的瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙錠染色進(jìn)行檢查。浸出液中三價鐵濃度在群落 1, 3, 4和 5從開始增加到第 5天, 10至 15天后,三價鐵的濃度下降。該黃銅礦的銅萃取群落 2( %無添加酵母)中提 取大大提高。在完成每次運行,融化的擴(kuò)增曲線通過提高測量的溫度從 55 176。由于片段所有 16S rRNA基因長度分別為眾所周知,數(shù)字 DNA進(jìn)行直接計算出的濃度 PCR
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