【正文】 (3) 生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)漿細胞，因為漿細胞是高度分化的細胞，不能無限增殖。下圖表示形成鼠 — 人嵌合抗體的過程。 (3) 將上述外植體置于一個含有某種抗生素的合適培養(yǎng)基中進行篩選，發(fā)生轉(zhuǎn)化的外植體開始增殖，形成愈傷組織，其特點是 ，通過產(chǎn)生不定芽和體細胞胚再長出整個植物。將等量漿細胞與骨髓瘤細胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細胞有同 種細胞的融合細胞和雜交瘤細胞。鑒定時要用二苯胺 。 B a m H Ⅰ E c o R Ⅰ Hi n d Ⅲ B gl Ⅱ ↓ ↓ ↓ ↓ GG A T CC G AA T T C AA GCT T AG A T CT CC T AGG CTT AA G T T CG AA T CT AG A ↑ ↑ ↑ ↑ 其中哪兩種限制酶切割出來的 DNA 片段末端可以互補結(jié)合，其末端互補序列是 ( ) A ． Ba m H Ⅰ 和 Ec o R Ⅰ ；末端互補序列：－ A A TT － B ． Ba m H Ⅰ 和 Hi nd Ⅱ ；末端互補序列：－ G A TC － C ． Ba m H Ⅰ 和 Bgl Ⅱ ；末端互補序列：－ G A T C － D ． Ec o R Ⅰ 和 Hin d Ⅲ ；末端互補序列：－ A A TT － 解析 Ba m H Ⅰ 和 Bg lⅡ 切出的黏性末端堿基能互補配對，互補序列都含有－ GATC －。本題中提示該 RN A 病毒表面的 A 蛋白為主要的抗原，故而可選用通過基因工程生產(chǎn)的 A 蛋白制備疫苗；確診時為判斷該病毒是否為題目中的 R NA 病毒，可以進行核酸序列的比對，也可以利用單克隆抗體具備特異性，通過能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有 A 蛋白的存在，進一步進行檢測是否為目的 R NA 病毒。 ( 2 ) 過程 ② 構(gòu)建 A 基因表達載體時，必須使用 _ _ _ _ _ _和 _ _ _ _ _ __ 兩種工具酶。 答案 ( 1) 胰蛋白 ( 2) 核移植、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植 細胞核 ( 3) 使犢牛的性狀主要由供體細胞核決定 ( 4) ①生物的性狀受細胞核和細胞質(zhì)共同控制；②生物的性狀還受環(huán)境因素的影響 應(yīng)考高分突破 選擇題搶分技巧 —— 找準選項 例 1 ( 2023轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動物的 具有全能性。 (2) 植物組織培養(yǎng)過程中，為了避免微生物的污染，必須進行嚴格的無菌操作。 (3) 微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨使用可誘導(dǎo)試管苗 ________ ，而與 ________ 配比適宜時可促進芽的增殖。離體的動物體細胞，全能性受到限制，但其細 胞核仍具有全能性，需要借助卵細胞的細胞質(zhì)才能體現(xiàn)出來。 結(jié)論 2 ： _ _ _ _ _ _ _ _ 。 DNA 粗提取： 第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入 15 m L 研磨液，充分研磨。從圖中可以看出，在目的基因和載體中都有 Hin d Ⅲ 和 B a m H Ⅰ 限制酶的切割位點，因此要用 Hin d Ⅲ 和 B a m H Ⅰ 限制酶同時切割載體和人乳鐵蛋白基因；載體切割后四環(huán)素抗性基因被破壞，因此篩選時要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進行。本基因工程目的基因的表達產(chǎn)物為紅細胞生成素，即 E P O 。由于天然 E P O 來源極 為有限，目前臨床上使用的 紅細胞生成素主要來自于基 因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅 細胞生成素 ( r h E P O ) ，其簡要 生產(chǎn)流程如 右 圖。 ( 2) 基因表達載體的構(gòu)建 ( 基因工程的核心 ) ① 目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可遺傳給下一代，并能夠表達和發(fā)揮作用。 b ．人工合成目的基因：根據(jù)已知的核苷酸序列，利用原料以化學(xué)方法合成。例如：抗蟲或抗病的接種實驗，以確定是否有抗性以及抗性程度；對基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較，以確定功能是否相同。分泌該單克隆抗體的 細胞，可由r h E P O 免疫過的小鼠 B 淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成。天津卷， 7 Ⅰ ) Ⅰ .下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。這利用了細胞的 _ _ _ _ _ _ _ _ 性。 (6) 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，需要用相應(yīng)的抗體進行抗原－抗體雜交，其他三項技術(shù)檢測的對象都是核酸。 ( 2 ) 第二步中 “ 緩緩地 ” 攪拌，這是為減少 _ _ _ _ _ __ 。 答案 ( 1) 探究不同材料和不同保存溫度對 DNA 提取量的影響 ( 2) DN A 斷裂 ( 3) ① 等質(zhì)量的不同實驗材料 ，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的 DNA量最多 ② 低溫抑制了相關(guān)酶的活性， DNA 降解速度慢 ( 4) 將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液 考 點 三 細胞工程的原理和應(yīng)用 1 ． 動、植物細胞全能性 ( 1) 原因：生物體的每個細胞都含有發(fā)育成完整個體所必需的全部基因。該技術(shù)可以保持品種的 ________ ，繁殖種苗的速度 ________ 。 ( 5 ) 據(jù)圖推測，若要在誘導(dǎo)試管苗生根的過程中提高其光合作用能力，應(yīng) ( 降低，增加 ) 培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。 答案 (1)遺傳特性 快 遺傳信息 (2)微生物 (3)生根 細胞分裂素 2,4D (4)逐漸下降 先 增加后下降 不能 (5)降低 訓(xùn)練 5 科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁殖速度，可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進行克隆 ( 如下圖所示 ) 。證明了動物細胞的細胞核具有全能性。 簡答題保分對策 —— 抓住要點 例 2 ( 2023 (2) 基因工程的步驟是：目的基因的提取 → 構(gòu)建基因表達載體 → 導(dǎo)入受體細胞 → 目的基因的檢測和表達，其中構(gòu)建基因表達載體中需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過 D N A 連接酶連接目的基因和載體。選項中 A 項屬于細胞工程， C 項屬于人工誘變， D 項屬于基因重組，只有 B 項符合基因工程的概念，其中人的干擾素基因是目的基因，質(zhì)粒是載體，大腸桿菌是受體細胞，人們需要的生物產(chǎn)品是人干擾素。轉(zhuǎn)基因牛的細胞中都含有人白蛋白基因，人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白，是因為人白蛋白基因只在轉(zhuǎn)基因牛的乳腺細胞中表達。惡性細胞系的細胞具有不死性，可以進行傳代培養(yǎng)。 答案 AD 三、非選擇題 9 ．土壤農(nóng)桿菌是一種能引