基因重組與基因工程-免費(fèi)閱讀
【正文】 DNA重組體的篩選與鑒定 ? 滅活法篩選重組體。 (鈍型末端 ) ? 粘性末端： sticky end 堿基序列被酶以錯(cuò)開(kāi)幾個(gè)核苷酸的形式切開(kāi)。 有一個(gè)限制性內(nèi)切酶切口。 已經(jīng)證實(shí) GnTⅤ 與轉(zhuǎn)移有關(guān)。 ? 來(lái)源于宿主的基因稱 轉(zhuǎn)導(dǎo)基因 。 細(xì)胞的轉(zhuǎn)化 整合 ? 整合： ? 噬菌體感染大腸桿菌的第一步 ? 噬菌體粘附于細(xì)胞壁上，將自身的 ? DNA注入菌體中。 此 ? DNA可與細(xì)菌染色體重組，成為細(xì)菌染色體的一部分。 轉(zhuǎn)位 ? 轉(zhuǎn)位 ：一個(gè)或一組基因從一處轉(zhuǎn)到基因組的另一個(gè)位置。 轉(zhuǎn)入 GnTⅤ 基因 肝癌細(xì)胞株 SMMC7721 觀察其遷移、侵襲、粘附等生物學(xué)行為 轉(zhuǎn)入反義 GnTⅤ 基因 轉(zhuǎn)移 ? 轉(zhuǎn)移 ? 基因克隆 分 切 接 轉(zhuǎn) 篩 載體和目的基因 ? 載體 ： vector 在宿主細(xì)胞內(nèi)可獨(dú)立復(fù)制的完整 DNA分子。 質(zhì)粒 ? pBR322：常用的質(zhì)粒 噬菌體載體 ? ? 噬菌體 、 M13 噬菌體 ? 易于感染大腸桿菌 ? ? 噬菌體 DNA比質(zhì)粒大，對(duì)限制性內(nèi)切酶有不止一個(gè)切口，需經(jīng)過(guò)改造。 限制性內(nèi)切酶的應(yīng)用 ? Alu I ….AGCT….. ….AG CT... 平端 …..TCGA….. ….TC GA...
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