專題八第一講基因工程和細胞工程-wenkub
2023-03-24 00:13:58 本頁面
【正文】 D ． a m pR ( 3 ) 過程 ① 可采用的操作方法是 _ _ _ _ _ _ _ _ ( 填字母代號 ) 。圖中t etR表示四環(huán)素抗性基因， a m pR表示氨芐青霉素抗性基因， B am H Ⅰ 、 H i n d Ⅲ 、 S ma Ⅰ 直線所示為三種限制酶的酶切位點。培養(yǎng)重組 C H O 細胞時，為了提供適宜的培養(yǎng)條件，需要不斷更換培養(yǎng)液，以防止有害代謝產(chǎn)物的積累對細胞自身造成的危害。 解析 基因工程中獲得大量目的基因的技術為 P C R技術。 (2) 圖中②所指的物質是 ，③所指的物質是 。 轉錄檢測：分子雜交技術， DNA和 mRNA之間，看 是否出現(xiàn)雜交帶 翻譯檢測：抗原 — 抗體雜交，看是否出現(xiàn)雜交帶 ②表達檢測 2 ． 基因工程的應用 ( 1 ) 植物基因工程??????? 抗蟲轉基因植物 —— 減輕農(nóng)藥對環(huán)境 的污染抗病轉基因植物抗逆轉基因植物改良植物品質 ( 2 ) 動物基因工程??????? 提高動物生長速度改善畜產(chǎn)品的品質用轉基因動物生產(chǎn)藥物用轉基因動物作器官移植的供體基因工程藥品的生產(chǎn) ( 3 ) 基因治療??????? 把正常基因導入病人體內，使該基因表達產(chǎn) 物發(fā)揮作用方法??? 體外基因治療體內基因治療 訓練 1 ( 2023 ②導入過程 生物 種類 植物細胞 動物細胞 微生物細胞 常用 方法 農(nóng)桿菌轉化法 ( 主要 ) 、基因槍法和花粉管通道法 顯微注射技術 Ca2 ＋處理法 受體 細胞 體細胞 受精卵 原核細胞 轉 化 過 程 將目的基因插入 Ti質粒的 T － DNA 上→ 農(nóng)桿菌 → 導入植物細胞 → 整合到受體細胞的 DNA →表達 將含有目的基因的表達載體提純 → 取卵( 受精卵 ) → 顯微注射 → 受精卵發(fā)育 → 獲得具有新性狀的動物 Ca2 ＋處理細胞 → 感受態(tài)細胞 → 重組表達載體與感受態(tài)細胞混合 → 感受態(tài)細胞吸收DNA 分子 ( 4) 目的基因的檢測與鑒定 ① 導入檢測： DNA 分子雜交技術 ( 即使用放射性同位素或熒光分子標記的 DNA 作探針進行檢測 ) 。常用的方法有反轉錄法和化學合成法。專題八 現(xiàn)代生物科技專題 第一講 基因工程和細胞工程 高頻考點整合 考點一 基因工程的操作步驟和應用 1 ． 基因工程的操作步驟 ( 1) 目的基因的獲取 ① 目的基因：編碼蛋白質的結構基因。 c ．利用 P CR 技術擴增目的基因 通過 P CR 技術可對已獲取的目的基因進行擴增，以獲取大量的目的基因。 DNA和 DNA 之間，看是否出現(xiàn)雜交帶。 福建卷， 32 ) 紅 細胞生成素 ( E P O ) 是體內促 進紅細胞生成的一種糖蛋白， 可用于治療腎衰性貧血等疾 病。 (3) 培養(yǎng)重組 CHO 細胞時，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細胞產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害，應定期更換 。 c D N A 是以 m R N A 為模板通過反轉錄獲得的。單克隆抗體是通過培養(yǎng)雜交瘤細胞獲得的。 據(jù)圖回答： ( 1 ) 圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。 A ．農(nóng)桿菌轉化 B ．大腸桿菌轉化 C ．顯微注射 D ．細胞整合 ( 4 ) 過程 ② 采用的生物技術是 _ _ _ _ _ _ _ _ 。 A ．核酸分子雜交 B ．基因序列分析 C ．抗原－抗體雜交 D ． PC R 解析 (1) 基因表達載體的構建過程中，將目的基因導入受體細胞之前，要用同一種限制酶切割目的基因和載體。 (4) 過程 ② 是將早期胚胎移入受體母牛體內，用到的技術是胚胎移植技術。剪碎后分成兩組，一組置于 20 ℃ 、另一組置于－ 20 ℃ 條件下保存 24 h 。 第三步：取 6 支試管，分別加入等量的 2 m ol /L N a Cl溶液溶解上述絮狀物。 ① 結論 1 ：與 20 ℃ 相比，相同實驗材料在－ 20 ℃ 條件下保存， DNA 的提取量較多。為了進一步提高粗提取時 DNA 的純度，在第三步的基礎上繼續(xù)操作的步驟是： _ _ _ _ _ _ _ _ ，然后用體積分數(shù)為95% 的冷酒精溶液使 DNA 析出。 ( 3) 全能性表現(xiàn)與細胞種類有關：離體的植物體細胞的全能性在一定條件下可充分體現(xiàn)。 2 ． 植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較 項目 植物體細胞雜交 動物細胞融合 細胞融合原理 細胞膜的流動性 細胞膜的流動性 細胞融合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后，誘導原生質體融合 用胰蛋白酶使細胞分散后，誘導細胞融合 誘導 手段 離心、電刺激、振動、顯微操作、聚乙二醇等誘導 與植物體細胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導 用途 克服遠緣雜交不親和的障礙，擴展雜交親本范圍，培育新品種 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 3. 動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較 項目 植物組織培養(yǎng) 動物細胞培養(yǎng) 培養(yǎng)基的 物理性質 固體 液體 培養(yǎng)基 的成分 水、礦質元素、維生素、蔗糖、氨基酸、激素、瓊脂等 葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等 結果 新的植株或組織 新的細胞系或細胞株 目的 ① 植株快速繁殖 ② 脫毒植株的培 ③ 人工種子 ③ 生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等 ⑤ 轉基因植物的培育 ① 蛋白質生物制品的生產(chǎn) ② 皮膚移植材料的培育 ③ 檢測有毒物質 ④ 生理、病理、藥理學研究 取材 植物幼嫩的部位或花藥等 動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織 其他條件 均為無菌操作，需要適宜的溫度、 pH 等條件 訓練 4 (2023 (2) 把試管苗轉接到新的培養(yǎng)基上時，需要在超凈工作臺上進行，其原因是避免 ________ 的污染。 據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度 的增加，光合作用強度的變化趨勢 是 ，單株鮮重的變化趨勢是 。離體的葉肉細胞在適宜條件下發(fā)育為完整植株體現(xiàn)了植物細胞的全能性，植物細胞具有全能性的原因是細
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