專(zhuān)題八第一講基因工程和細(xì)胞工程-wenkub
2023-03-24 00:13:58 本頁(yè)面
【正文】 D ． a m pR ( 3 ) 過(guò)程 ① 可采用的操作方法是 _ _ _ _ _ _ _ _ ( 填字母代號(hào) ) 。圖中t etR表示四環(huán)素抗性基因， a m pR表示氨芐青霉素抗性基因， B am H Ⅰ 、 H i n d Ⅲ 、 S ma Ⅰ 直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。培養(yǎng)重組 C H O 細(xì)胞時(shí)，為了提供適宜的培養(yǎng)條件，需要不斷更換培養(yǎng)液，以防止有害代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞自身造成的危害。 解析 基因工程中獲得大量目的基因的技術(shù)為 P C R技術(shù)。 (2) 圖中②所指的物質(zhì)是 ，③所指的物質(zhì)是 。 轉(zhuǎn)錄檢測(cè)：分子雜交技術(shù)， DNA和 mRNA之間，看 是否出現(xiàn)雜交帶 翻譯檢測(cè)：抗原 — 抗體雜交，看是否出現(xiàn)雜交帶 ②表達(dá)檢測(cè) 2 ． 基因工程的應(yīng)用 ( 1 ) 植物基因工程??????? 抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物 —— 減輕農(nóng)藥對(duì)環(huán)境 的污染抗病轉(zhuǎn)基因植物抗逆轉(zhuǎn)基因植物改良植物品質(zhì) ( 2 ) 動(dòng)物基因工程??????? 提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體基因工程藥品的生產(chǎn) ( 3 ) 基因治療??????? 把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn) 物發(fā)揮作用方法??? 體外基因治療體內(nèi)基因治療 訓(xùn)練 1 ( 2023 ②導(dǎo)入過(guò)程 生物 種類(lèi) 植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞 微生物細(xì)胞 常用 方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ( 主要 ) 、基因槍法和花粉管通道法 顯微注射技術(shù) Ca2 ＋處理法 受體 細(xì)胞 體細(xì)胞 受精卵 原核細(xì)胞 轉(zhuǎn) 化 過(guò) 程 將目的基因插入 Ti質(zhì)粒的 T － DNA 上→ 農(nóng)桿菌 → 導(dǎo)入植物細(xì)胞 → 整合到受體細(xì)胞的 DNA →表達(dá) 將含有目的基因的表達(dá)載體提純 → 取卵( 受精卵 ) → 顯微注射 → 受精卵發(fā)育 → 獲得具有新性狀的動(dòng)物 Ca2 ＋處理細(xì)胞 → 感受態(tài)細(xì)胞 → 重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 → 感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA 分子 ( 4) 目的基因的檢測(cè)與鑒定 ① 導(dǎo)入檢測(cè)： DNA 分子雜交技術(shù) ( 即使用放射性同位素或熒光分子標(biāo)記的 DNA 作探針進(jìn)行檢測(cè) ) 。常用的方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。專(zhuān)題八 現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題 第一講 基因工程和細(xì)胞工程 高頻考點(diǎn)整合 考點(diǎn)一 基因工程的操作步驟和應(yīng)用 1 ． 基因工程的操作步驟 ( 1) 目的基因的獲取 ① 目的基因：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。 c ．利用 P CR 技術(shù)擴(kuò)增目的基因 通過(guò) P CR 技術(shù)可對(duì)已獲取的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，以獲取大量的目的基因。 DNA和 DNA 之間，看是否出現(xiàn)雜交帶。 福建卷， 32 ) 紅 細(xì)胞生成素 ( E P O ) 是體內(nèi)促 進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白， 可用于治療腎衰性貧血等疾 病。 (3) 培養(yǎng)重組 CHO 細(xì)胞時(shí)，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換 。 c D N A 是以 m R N A 為模板通過(guò)反轉(zhuǎn)錄獲得的。單克隆抗體是通過(guò)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞獲得的。 據(jù)圖回答： ( 1 ) 圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。 A ．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B ．大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C ．顯微注射 D ．細(xì)胞整合 ( 4 ) 過(guò)程 ② 采用的生物技術(shù)是 _ _ _ _ _ _ _ _ 。 A ．核酸分子雜交 B ．基因序列分析 C ．抗原－抗體雜交 D ． PC R 解析 (1) 基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程中，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前，要用同一種限制酶切割目的基因和載體。 (4) 過(guò)程 ② 是將早期胚胎移入受體母牛體內(nèi)，用到的技術(shù)是胚胎移植技術(shù)。剪碎后分成兩組，一組置于 20 ℃ 、另一組置于－ 20 ℃ 條件下保存 24 h 。 第三步：取 6 支試管，分別加入等量的 2 m ol /L N a Cl溶液溶解上述絮狀物。 ① 結(jié)論 1 ：與 20 ℃ 相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在－ 20 ℃ 條件下保存， DNA 的提取量較多。為了進(jìn)一步提高粗提取時(shí) DNA 的純度，在第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是： _ _ _ _ _ _ _ _ ，然后用體積分?jǐn)?shù)為95% 的冷酒精溶液使 DNA 析出。 ( 3) 全能性表現(xiàn)與細(xì)胞種類(lèi)有關(guān)：離體的植物體細(xì)胞的全能性在一定條件下可充分體現(xiàn)。 2 ． 植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 項(xiàng)目 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合原理 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 細(xì)胞融合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合 誘導(dǎo) 手段 離心、電刺激、振動(dòng)、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo) 與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo) 用途 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)展雜交親本范圍，培育新品種 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 3. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較 項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 培養(yǎng)基的 物理性質(zhì) 固體 液體 培養(yǎng)基 的成分 水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、激素、瓊脂等 葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等 結(jié)果 新的植株或組織 新的細(xì)胞系或細(xì)胞株 目的 ① 植株快速繁殖 ② 脫毒植株的培 ③ 人工種子 ③ 生產(chǎn)藥物、殺蟲(chóng)劑等 ⑤ 轉(zhuǎn)基因植物的培育 ① 蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn) ② 皮膚移植材料的培育 ③ 檢測(cè)有毒物質(zhì) ④ 生理、病理、藥理學(xué)研究 取材 植物幼嫩的部位或花藥等 動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織 其他條件 均為無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、 pH 等條件 訓(xùn)練 4 (2023 (2) 把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時(shí)，需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，其原因是避免 ________ 的污染。 據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度 的增加，光合作用強(qiáng)度的變化趨勢(shì) 是 ，單株鮮重的變化趨勢(shì)是 。離體的葉肉細(xì)胞在適宜條件下發(fā)育為完整植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，植物細(xì)胞具有全能性的原因是細(xì)
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