分子生物學技術之dna重組技術-免費閱讀
【正文】 重組 DNA操作過程示意圖圖 52 DNA連接酶能把不同的 DNA片段連接成一個整體 僅僅能在體外利用限制性核酸內切酶和 DNA連接酶進行 DNA的切割和重組，還不能滿足基因工程的要求，只有將它們連接到具備自主復制能力的 DNA分子上，才能在寄主細胞中進行繁殖。加入 T7或 SP6 RNA聚合酶，所克隆的外源基因便會轉錄出相應的 mRNA。由于缺失 rop基因， pUC質粒不經氯霉素擴增時，平均每個細胞即可達 500~700個拷貝 。 pBR322質粒載體由三個不同來源的部分組成的：第一部分來源于 pSF2124質粒易位子 Tn3的氨芐青霉素抗性基因（ AmpR）；第二部分來源于 pSC101質粒的四環(huán)素抗性基因（ tetr）；第三部分則來源于 ColE1的派生質粒 pMB1的DNA復制起點（ ori）。? 長 ，帶有四環(huán)素抗性基因（ tetr）及EcoRI、 HindIII、 BamHI、 SalI、 XhoI、PvuII以及 SmaI等 7種限制性核酸內切酶的單酶切位點，在 HindIII、 BamHI和 SalI等 3個位點插入外源基因，會導致 tetr失活。重組 DNA技術發(fā)展史上的重大事件三大成就：一、在 20世紀 40年代確定了遺傳信息的攜帶者、即基因的分子載體是 DNA而不是蛋白質，解決了遺傳的物質基礎問題；二、 50年代提出了 DNA分子的雙螺旋結構模型和半保留復制機制 ,解決了基因的自我復制和世代交替問題；三、 50年代末至 60年代，相繼提出了 “ 中心法則 ” 和操縱子學說 ,成功地破譯了遺傳密碼，闡明了遺傳信息的流動與表達機制。基因工程是指在體外將核酸分子插入病毒、質?；蚱渌d體分子，構成遺傳物質的新
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