分子生物學(xué)技術(shù)之dna重組技術(shù)-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 作 pBluescript KS（ +/）或 pBluescript SK（ +/）。因此，可用 Xgal顯色法實(shí)現(xiàn)對(duì)重組體轉(zhuǎn)化子的鑒定。具有兩種抗生素抗性基因以用作轉(zhuǎn)化子的選擇記號(hào)。是第一個(gè)真核基因克隆載體。 圖 51 幾種主要 DNA內(nèi)切酶所識(shí)別的序列及其酶切末端 。 第五章 分子生物學(xué)技術(shù)DNA重組技術(shù)及應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)的快速發(fā)展，得益于上個(gè)世紀(jì)中葉以來(lái)研究方法、特別是基因操作和基因工程技術(shù)的進(jìn)步。第一個(gè)核酸內(nèi)切酶 EcoRI是 Boyer實(shí)驗(yàn)室在1972年發(fā)現(xiàn)的，它能特異性識(shí)別 GAATTC序列，將雙鏈 DNA分子在這個(gè)位點(diǎn)切開(kāi)并產(chǎn)生具有粘性末端的小片段。大腸桿菌pSC101質(zhì)粒載體示意圖。不僅易于純化，而且即使攜帶上一段 68kb的外源 DNA片段，操作起來(lái)仍較為便利。 pUC8質(zhì)粒結(jié)構(gòu)中具有來(lái)自大腸桿菌 lac操縱子的 lacZ‘基因，所編碼的 α肽鏈可參與 α互補(bǔ)作用。由于這類(lèi)質(zhì)粒載體可以保證外源 DNA序列在不同物種的細(xì)胞之間得到擴(kuò)增，能在原核和真核細(xì)胞之間往返穿梭，具有廣泛的用途。病毒、噬菌體和質(zhì)粒等小分子量復(fù)制子都可以作為基因?qū)氲妮d體。(i)在多克隆位點(diǎn)區(qū)（ MCS）的兩側(cè)，存在一對(duì)T3和 T7噬菌體的啟動(dòng)子，用以定向指導(dǎo)插入在多克隆位點(diǎn)上的外源基因的轉(zhuǎn)錄活動(dòng)；(ii)具有單鏈?zhǔn)删w M13或 f1的復(fù)制起點(diǎn)和一個(gè)來(lái)自 ColE1質(zhì)粒的復(fù)制起點(diǎn)，保證 pBluescript噬菌粒載體在有或無(wú)輔助噬菌體共感染的不同情況下，按照不同的復(fù)制形式分別合成出單鏈或雙鏈 DNA；(iii）編碼有一個(gè)氨芐青霉素抗性基因，作為轉(zhuǎn)化子克隆的選擇標(biāo)記；(iv)含有一個(gè) lacZ基因，可以按照 X
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