3第3章免疫原和抗血清的制備多媒體-免費(fèi)閱讀
【正文】 2023年 2月 5日星期日 上午 5時(shí) 5分 1秒 05:05: ? 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升自我。 2023年 2月 5日星期日 5時(shí) 5分 1秒 05:05:015 February 2023 ? 1空山新雨后，天氣晚來秋。 , February 5, 2023 ? 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒有。 :05:0105:05Feb235Feb23 ? 1故人江海別，幾度隔山川。半抗原是指僅有抗原性而無免疫原性的物質(zhì)，與載體結(jié)合后可具有免疫原性。 ? 抗血清與粗抗原出現(xiàn)一條線，產(chǎn)生單價(jià)特異性抗體 雙向免疫擴(kuò)散對抗體特異性鑒定 雙向免疫擴(kuò)散法對抗體效價(jià)的鑒定 ? 測定抗體效價(jià)有兩種稀釋方法： ? 稀釋抗血清，倍比稀釋，分別與一個濃度的純抗原反應(yīng)。 一、佐劑的種類 ? 增強(qiáng)免疫原性 使弱免疫原性物質(zhì)變成持久或強(qiáng)的免疫原。 ? 將其分解成片段，如 Fab段、 Fc段和輕鏈等作為免疫原制備抗血清，能制得分辨能力更高的特異性抗體，制備方法如下： 免疫球蛋白片段的制備： 非共價(jià)鍵解離法－改變 pH 、利用強(qiáng)變性劑 共價(jià)鍵解離法－氧化法和還原法 溴化氰裂解法 酶解法－木瓜酶 、胃蛋白酶 酶裂解法 ? 酶對免疫球蛋白的水解有極好的專一性。 ? 凝膠合成的高度交聯(lián)樹脂 。 ? 抗原的濃縮：通過加入硫酸銨，將其沉淀下來，以利于進(jìn)一步純化。 ? 表面活性劑處理法：常用十二烷基硫酸鈉等表面活性劑處理。 ? 組織均漿液要離心沉淀，沉淀物組織和細(xì)胞碎片，上清液為提取可溶性抗原的材料。 ? 細(xì)胞抗原： （ 綿羊紅細(xì)胞 ）一般情況下經(jīng)生理鹽水洗凈，配制一定濃度的細(xì)胞懸液，即可應(yīng)用。 免疫原的制備 ? 細(xì)菌抗原多用液體或固體培養(yǎng)物，經(jīng)集菌后處理。 二、可溶性抗原的制備和純化 ? 組織細(xì)胞或培養(yǎng)細(xì)胞可溶性抗原的制備 ? 制備抗原的細(xì)胞包括正常的細(xì)胞、傳代細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞。 超速離心法： 差速離心法－低速和高速離心交替進(jìn)行 密度梯度離心法－區(qū)帶離心法 （二）可溶性抗原的純化 超速離心分離法 ? 常用于分離亞細(xì)胞成分及大分子蛋白。 離子交換層析法： 利用蛋白質(zhì)帶電荷不同進(jìn)行分離 離子交換劑： 離子交換纖維素、離子交換凝膠、離子交換樹脂 凝膠過濾法： 利用凝膠的分子篩作用，對分子量不同的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離 凝膠過濾 ? 分子篩層析，具有三維空間 多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。 親和層析 ? 是利用生物大分子的生物學(xué)特異性，即生物分子間具有的專一性親和力的層析技術(shù)。 ? 如木瓜蛋白酶可將 IgG裂解成一個 Fc和兩個Fab片段；胃蛋白酶可將水解成 F（ ab’）2和數(shù)個小片段；胰蛋白酶將 IgG切成不規(guī)則肽鏈。 ? 增加抗體的滴度 提高機(jī)體初次和再次免疫應(yīng)答的抗體滴度。 ? 同時(shí)稀釋抗原和抗血清，即將抗原作倍比稀釋或按濃度稀釋，分別與不同濃度抗血清進(jìn)行雙擴(kuò)散試驗(yàn)。 免疫佐劑是先于抗原或與抗原一起注入機(jī)體，可增強(qiáng)機(jī)體對該抗原的特異性免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)。 05:05:0105:05:0105:05Sunday, February 5, 2023 ? 1乍見翻疑夢，相悲各問年。 05:05:0105:05:0105:052/5/2023 5:05:01 AM ? 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 上午 5時(shí) 5分 1秒 上午 5時(shí) 5分 05:05: ? 楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 2023年 2月 上午 5時(shí) 5分 :05February 5, 2023 ? 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 :05:0105:05:01February 5, 2023 ? 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 2023年 2月 上午 5時(shí) 5分 :05February 5, 2023 ? 1少年十五二十時(shí)，步行奪得胡馬騎。 上午 5時(shí) 5分 1秒 上午 5時(shí) 5分 05:05: ? 沒有失敗，只有暫時(shí)停止成功！。 05:05:0105:05:0105:052/5/2023 5:05:01 AM ? 1以我獨(dú)沈久，愧君相見頻。 親和層析法： 雜抗原交聯(lián) Sep
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