【正文】 MTF steps ? 水樣取時必有 3個系列： =》 10， ， =》 1， ， =》 100， 10， 1ml 取樣愈少誤差愈大，愈不容易測到大腸桿菌。 ＊抗生素：磺胺藥劑：競爭性抑制 二甲氧基苯嘧啶：抑制酵素 抗生素使用種類及適用對象 種類 生產(chǎn)菌株 對象 penicillin Penicillium chrysogenum Penicillium notatum G(＋ ) streptomycin Streptomyces griseus G(＋ )、 G(－ ) chlortetracycline Streptomyces aureofaciens G(＋ )、 G(－ ) gentamicin Micromonospora purpurea G(＋ )、 G(－ )、mycoplasma Amphotericin Streptomyces nodosus yeast and mold nystatin Streptomyces noursei yeast and mold fungizone yeast and mold 水媒病害 (Waterborne Diseases) ? 細(xì)菌性 :細(xì)菌性的疾病是水媒病害中最常見的 , 造成生命及財產(chǎn)的損失也 最嚴(yán)重 ,如 : 病 原 體 名 稱 癥 狀 1. Salmonella typhosa 沙門氏菌 傷寒 2. Shigella dysentery 志賀氏菌 細(xì)菌性痢疾 3. Vibrio ma 霍亂弧菌 霍亂 癥狀：下痢 .嘔吐 .噁心 ,嚴(yán)重時電解質(zhì)流失 ,而昏迷死亡。 ?抑制蛋白質(zhì)的合成 ： 細(xì)菌合成蛋白質(zhì)的主要場所在核醣體，將抗生素作用 於核醣體，則會干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。 ?清潔劑： 利用降低表面張力之作用，將物體表面之菌體與污物一同除去，一般清潔劑由親水基及疏水基所組成，疏水基與細(xì)菌細(xì)胞膜結(jié)合，親水基與水結(jié)合。 5%的甲醛溶液 ?殺死細(xì)菌芽胞體。 ＊醇類殺菌能力隨分子量之增加而增強，但分子量大之 醇類水溶性較差，因此醇類中常使用乙醇當(dāng)消毒劑。 砷 606：治療梅毒－抗生素取代 ＊因除對病原菌有效外，對人體組織亦有毒性。 ＊一般實驗室使用目的： 萃?。赫鹌萍?xì)胞，以萃取細(xì)胞內(nèi)之物質(zhì)。 滲透壓 微生物對滲透壓有一定的承受範(fàn)圍，改變滲透壓使 細(xì)胞不能生長，甚至死亡。 紫外光： 136~400nm；有殺菌作用。 利用低溫使微生物之代謝與生長變慢， 此只能抑制微生物活性，不會完全死亡。 ?開放蒸氣 (steam)： 蒸汽溫度為攝氏 95~105度，因此滅菌的時間需 6~8小時才 能達(dá)到效果。 微生物生長的控制 類別 方法 物理方法 溫度 過濾 放射線 滲透壓 乾燥 超音波 化學(xué)方法 防腐劑及殺菌劑 重金屬 防腐劑 抗生素 溫度 ~高溫 ?乾熱殺菌法： 熱傳導(dǎo)方式：以空氣為介質(zhì) 作用原理：利用高溫使微生物體內(nèi)的水分蒸發(fā)及 蛋白質(zhì)因高溫產(chǎn)生氧化變性而達(dá)滅菌 作用。 ?殺菌 (bactericidal) ：殺菌劑 利用物理化學(xué)方法殺死微生物的作用。 經(jīng)幾代的培養(yǎng)之後，菌中之生長速率又會不同。單一細(xì)胞蛋白質(zhì)量＝細(xì)菌數(shù) 例： 今測得 E. coli 細(xì)胞之總氮量為 單一 E. coli之細(xì)胞蛋白質(zhì)量為 1ng 則有 247。 利用濁度計：菌數(shù)越多濁度越高，菌液透光率越低， 透光率與細(xì)菌數(shù)成反比。 g= t = t n (log Nlog N0) g:世代時間 t: 某一培養(yǎng)時間 n:經(jīng)過 n代繁殖 N:開始培養(yǎng)時之菌數(shù) N0:子代細(xì)胞總數(shù) N=N02n ? 2n=N/N0 ? log2n=log(N/N0) ? =logNlogN0 ? n=(logNlogN0)/=(logNlogN0) 微生物之生長測定 ?計數(shù)測定： ?帄盤測定： 在培養(yǎng)基中培養(yǎng)之後，測定樣品中的活菌數(shù)。 配方 Lactose broth BGLB broth EMB agar 蛋白腖 (Peptone) 乳糖 (Lactose) 牛肉抽出物 (Beef extract) 蛋白腖 乳糖 膽粉 (Oxgall powder) 煌綠 (Brilliant green) 蛋白腖 乳糖 伊紅 (Eosin Y) 甲烯藍(lán) (Methylene blue) 磷酸氫二鉀 (K2HPO4) 洋菜 微生物的培養(yǎng)法 ?液態(tài)培養(yǎng) ：將菌株接種在液體培養(yǎng)基中。 ? 固體培養(yǎng)基： 培養(yǎng)基中 添加 ~2%洋菜 ，當(dāng)培養(yǎng)基冷凝後會變成 固體狀態(tài)，以利於微生物的純化、計數(shù)及保存。 ? 灰份 含量較多者 Na, K, Ca, Mg, P, S, Cl, Fe，在細(xì)胞中以有機或無機態(tài)存在 影響微生物生長的因子 ?外在因子 (環(huán)境因子 ) 氣體 溫度 pH Aw或滲透壓 微生物間的相互作用 ?內(nèi)在因子 (營養(yǎng)要求 ) 能源 碳源 氮源 無機鹽類 維生素 影響微生物生長的因子 外在因子 (環(huán)境因子 )~~溫度 種類 生長溫度 (最適溫度 ) 實例 嗜低溫菌 0~20℃ (15℃ ) 冷藏食品腐敗菌 嗜中溫菌 20~40℃ (37℃ ) 人體和動植物病原菌、 腐敗菌 嗜高溫菌 40~100℃ 或以上 (55℃ ) 溫泉及堆肥 影響微生物生長的因子 外在因子 (環(huán)境因子 )~~pH 種類 生長範(fàn)圍 實例 嗜酸性 ~ 醋酸菌、乳酸菌、酵母菌、黴菌(pH4~6) 嗜中性 ~ 一般細(xì)菌 (~) 腐敗菌 (~) ；病原菌(pH6~8) 嗜鹼性 ~ 霍亂弧菌 (~) 、硝化菌、根瘤菌、尿素分解菌、放線菌 細(xì)胞代謝養(yǎng)料會產(chǎn)生酸或鹼 ， 造成 pH的變化 。 染色目的： 鑑別不同菌體的型態(tài)、結(jié)構(gòu)，及提高放大效果 並作為分類之依據(jù) 染劑的種類 ~依帶電荷分 種類 組成 染劑 例子 鹼性 染劑 帶顏色之陽離子 與不帶顏色之陰離子組成 甲烯藍(lán) 細(xì)胞核及細(xì)胞粒等酸性部位染色 酸性 染劑 由無色之陽離子與 帶顏色之陰離子 組成 伊紅或剛果紅的鈉鹽 細(xì)胞質(zhì) 等鹼性物質(zhì)之染色 中性 染劑 由 酸性與鹼性染劑形成的複合鹽類 ，所以不含可解離的基團。 ＊布朗運動： 為粒子與周圍流體的分子產(chǎn)生不帄衡的碰撞而做 不停的攪動。 暗視野顯微鏡 觀察 活菌體 在活的狀態(tài)懸浮液中 特殊形態(tài) 之觀察。 微生物 分類 學(xué) 依微生物的特性分門別類研究的科學(xué) 微生物 遺傳 學(xué) 研究微生物體 遺傳 、 變異 的科學(xué) 微生物 演化 論 研究微生物在地球上 之發(fā)生 及 演變 之科學(xué) 微生物 生態(tài) 學(xué) 研究微生物在環(huán)境中 生活史 及其 所扮演 之 角色 應(yīng)用 微生物學(xué) 研究微生物 在不同領(lǐng)域 之 應(yīng)用 科學(xué) 微生物與生活 名稱 弊 利 細(xì)菌 污染食物、引發(fā)疾病 (沙門氏菌、金黃色葡萄球菌 ) 食品工業(yè) (醋酸菌 醋；黃麴菌 醬油 ) 污染物生物處理法 — 低成本、高效率、無二次公害 自然界物質(zhì)循環(huán) 病毒 致病 (日本腦炎、皰疹病毒 ) 基因轉(zhuǎn)殖及遺傳工程 干擾素製作 真菌 生化武器 、 致病、食物腐敗 (毒菇、麵包上的黑黴菌 ) 食用菌、製造抗生素；食品釀造 (青黴菌 青黴素；酵母菌 釀酒 ) 藻類 污染環(huán)境 (甲藻 紅潮，污染水質(zhì) ) 供養(yǎng)分及氧氣供其他生物使用 (綠藻、昆布之食用 顯微鏡的種類 放大原理 使用特性 光學(xué) 顯微鏡 明視野 顯微鏡 暗視野 顯微鏡 紫外光 顯微鏡 螢光 顯微鏡 位相差 顯微鏡 電子 顯微鏡 穿透式 顯微鏡 (TEM) 掃描式 顯微鏡 (SEM) 掃描穿