第十三章酶類藥物-免費(fèi)閱讀
【正文】 （三） tPA的生產(chǎn) 可利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)人黑色素瘤細(xì)胞株，產(chǎn)生大量的 tPA，其培養(yǎng)液中 tPA濃度可達(dá)到 1 ml/mL。 o Cu與催化活性有關(guān)，透析除去 Cu則酶活性全部喪失，一旦重新加入 Cu，酶活性又可以恢復(fù)。 o SOD屬于重金屬酶，廣泛存在于動(dòng)植物、微生物細(xì)胞中。 （二）生產(chǎn)工藝 工藝流程 工藝過(guò)程及控制要點(diǎn) （三）活性測(cè)定方法 ① 測(cè)定原理：門冬氨酸酶催化天冬酰胺水解，釋放游離氨。反應(yīng)體系應(yīng)在 3045s凝結(jié)，凝塊內(nèi)有小氣泡生成。 ③ 尿激酶是絲氨酸蛋白酶，絲氨酸和組氨酸是其活性中心的必須氨基酸。 （二）生產(chǎn)工藝 工藝流程 工藝過(guò)程及控制要點(diǎn) ① 酸解，過(guò)濾 ② 脫脂，去雜質(zhì) ③ 濃縮，干燥 胃膜素和胃蛋白酶聯(lián)產(chǎn)工藝 ① 胃膜素也是從豬胃粘膜中提取的一種黏蛋白。 ③ （ 5）添加誘導(dǎo)劑和抑制劑 第二節(jié) 重要酶類藥物的性質(zhì)及生產(chǎn)方法 一、胃蛋白酶 （一）組成與性質(zhì) ① 淡黃色粉末，具有肉類特殊的氣味及微酸味； ② 吸濕性強(qiáng)、易溶于水，水溶液呈酸性。 純化過(guò)程中的技術(shù)難點(diǎn)： （ 1）雜質(zhì)的除去 ① 調(diào) pH和加熱沉淀法 ② 蛋白質(zhì)表面變性法 ③ 選擇性變性法 ④ 降解或沉淀核苷酸法 ⑤ 利用結(jié)合底物保護(hù)法除去雜蛋白 （ 2）脫鹽 ① 透析 ② 凝膠過(guò)濾 （ 3）濃縮 ① 冷凍干燥法 ② 離子交換法 ③ 超濾法 ④ 凝膠吸水法 （ 4）酶的結(jié)晶 ① 酶的結(jié)晶方法 鹽析法、有機(jī)溶劑法、復(fù)合結(jié)晶法、透析平衡法、等電點(diǎn)法 ② 結(jié)晶條件的選擇 ? 酶液的純度 ? 酶的濃度 ? 溫度、時(shí)間、 pH、晶種、結(jié)晶器皿處理 （ 5）酶分離和純化中應(yīng)注意的問(wèn)題 ① 防止酶蛋白變性 ② 防止輔助因子流失 ③ 防止酶被蛋白水解酶降解 （三）微生物發(fā)酵法 高產(chǎn)菌株的選育 獲取優(yōu)良菌株有三種途徑： ? 從自然界分離篩選 ? 用物理或化學(xué)方法處理、誘變 ? 用基因重組與細(xì)胞融合技術(shù)，構(gòu)建性能優(yōu)良的工程菌。 （ 4）考慮生化制備的綜合成本。 ? 目前對(duì)藥用酶的研究熱點(diǎn)是，在維持活性狀態(tài)下的酶蛋白能否被吸收，如何將少藥用酶的抗原性問(wèn)題及新型藥用酶的研究等。 （二）生化制備法 生化制備法的主要生產(chǎn)過(guò)程為：
物理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1