基因重組-生物合成概念-免費(fèi)閱讀
【正文】 從這些陽性克隆體中分離出來的重組體質(zhì)粒DNA，經(jīng)過進(jìn)一步的分析，就能測(cè)出水稻葉綠體基因psbA的序列?！ ∮纱宋覀兊牡搅藘煞N功能互補(bǔ)的質(zhì)粒，這樣我們只要將他們雜交就可以得到一種接近全能的載體質(zhì)粒了，這就是pBR322 。當(dāng)我們把一個(gè)DNA片段插入到某一個(gè)標(biāo)記基因內(nèi)時(shí)，該基因就失去了相應(yīng)的功能。 pBR322質(zhì)?！ BR322質(zhì)粒DNA分子的長(zhǎng)度為4363bp，此載體中有兩個(gè)標(biāo)記基因，一個(gè)是氨芐青霉素抗性基因（Apr），另一個(gè)是四環(huán)素抗性基因（Tetr）。但是如果將DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切點(diǎn)，就會(huì)使抗四環(huán)素基因失活。一般分子量較大的質(zhì)粒屬嚴(yán)緊型。有些質(zhì)粒稱為附加體(episome)，這類質(zhì)粒能夠整合進(jìn)真菌的染色體，也能從整合位置上切離下來成為游離于染色體外的DNA分子。生物體內(nèi)的各種生物合成途徑互相間受到復(fù)雜的控制。生物合成具有如下幾種不同的生理意義。這種類型的重組也不需要RecA蛋白的參與。真核生物的非姊妹染色單體的交換、細(xì)菌以及某些低等真核生物的轉(zhuǎn)化、細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)接合、噬菌體的重組等都屬于這種類型?；蚬こ痰奶攸c(diǎn)是基因體外重組，即在離體條件下對(duì)DNA分子切割并將其與載體DNA分子連接，得到重組DNA。 原核生物的基因重組有轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合等方式。是生物遺傳變異的一種機(jī)制?！ ≈刚蜠NA在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間,甚至在不同物種之間進(jìn)行交換,并能在新的位置上復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯。受體細(xì)胞直接吸收來自供體細(xì)胞的DNA片段，并使它整合到自己的基因組中，從而獲得供體細(xì)胞部分遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為轉(zhuǎn)化。1977年美國科學(xué)家首次用重組的人長(zhǎng)激素釋放抑制因子基因生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素釋放抑制因子獲得成功。大腸桿菌的同源重組需要RecA蛋白,類似的蛋白質(zhì)也存在于其他細(xì)菌中。 [編輯本段]基因重組的類型 基因重組是指一個(gè)基因的DNA序列是由兩個(gè)或兩個(gè)以上的親本DNA組合起來的。（1）合成生長(zhǎng)增值所必需的物質(zhì)。質(zhì)?！ ? 質(zhì)粒(Plasmid) 質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，為環(huán)形閉合的雙股DNA,存在于細(xì)胞質(zhì)中，質(zhì)粒編碼非細(xì)菌生命所必須的某些生物學(xué)性狀，如性菌毛、細(xì)菌素、毒素和耐藥性等。質(zhì)粒在宿主細(xì)胞體內(nèi)外都可復(fù)制！ 目前，已發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的細(xì)菌有幾百種，已知的絕大多數(shù)的細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子(簡(jiǎn)稱cccDNA)。分子量較小的質(zhì)粒屬松弛型。這時(shí)，含有DNA插入片段的pBR322將使宿主細(xì)菌抗氨芐青霉素，但對(duì)四環(huán)素敏感。現(xiàn)在已知pBR322DNA分子共有24種核酸內(nèi)切限制酶的單一識(shí)別位點(diǎn)。當(dāng)把這種重組DNA分子轉(zhuǎn)到宿主細(xì)胞后，該基因原來賦予的表型也就消失了?！ BR322的應(yīng)用 了解了pBR322的結(jié)構(gòu)和它的構(gòu)建過
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