12第六章-細(xì)胞培養(yǎng)-免費閱讀
【正文】 可用于大規(guī)模生產(chǎn)。將濾液進 行離心 ,除去細(xì)胞碎片 . ,用液體培養(yǎng)基洗滌 ,即可用于 培養(yǎng) . 二 .單細(xì)胞培養(yǎng) (一 ).單細(xì)胞培養(yǎng)方法 :是將制備好的單細(xì)胞 ,按照一定的細(xì) 胞密度 ,接種在約 1mm厚固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)的 方法 . 常用方法 : (1)將單細(xì)胞懸浮液進行細(xì)胞記數(shù)后 ,離心收集已知數(shù) 目的單細(xì)胞 。 胡蘿卜細(xì)胞 :生長素饑餓 DNA抑制劑 (5氨基尿嘧啶 ) 細(xì)胞 G1 同步分裂 (五 )細(xì)胞增殖的測定 懸浮液 已知重量的濕尼龍絲網(wǎng)上 去培養(yǎng) 基、真空抽水 稱重 按 1法 600C干燥 48h 稱重 (以每毫升培養(yǎng)物 或每 106細(xì)胞表示 ) (以每毫升培養(yǎng)液中細(xì)胞總體積的毫升數(shù)表示 ) 已知體積的均勻分散懸浮液 (10~20ml)? 刻度離心管 (10~50ml)? 2022~4000r/min 5min (1) (2)沉淀體積 :細(xì)胞自然沉淀 ,側(cè)定體積 懸浮細(xì)胞 :細(xì)胞計數(shù) 血球計數(shù)板 較大數(shù)量 :特別的計數(shù)盤 細(xì)胞團分散處理 :1份培養(yǎng)物 +2份 8%三氧化鉻溶液 血球計數(shù)板計數(shù) 冷卻 700C 2~15min (六 ).懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的植物再生 :由懸浮細(xì)胞直接形成體細(xì)胞胚 . :懸浮液細(xì)胞 ?半固體培養(yǎng)基 ?愈傷組織 ?再生植株 (七 ).影響細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的因素 (1)氮 硝酸鹽 還原酶吸收和傳遞系統(tǒng) 基因系統(tǒng)表達所需的基因誘導(dǎo) (2)磷濃
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