第六章沉淀反應(yīng)-免費(fèi)閱讀
【正文】 ，敏感度高，結(jié)果易于分析，常用于 M蛋白的鑒定與分型。 技術(shù)要點(diǎn)：制備瓊脂板 打孔，加樣于孔內(nèi)，電泳 2～ 3mA/cm ， ～ 1h后，槽內(nèi)加入相應(yīng)抗血清作雙向擴(kuò)散。 ? 沉淀線位于抗原抗體孔中間，說(shuō)明兩者比例較適合。 技術(shù)要點(diǎn)：將抗體混入 %瓊 脂糖內(nèi)（ 50℃ ），未凝固前傾 注成平板，凝固后打孔（直徑 3～ 5mm ），孔中加入抗原溶 液和不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，置濕 盒內(nèi) 37℃,24 ～ 48h 觀察孔周 圍是否出現(xiàn)沉淀環(huán)。 ?方法受抗原抗體比例的影響非常明顯 ?應(yīng)用于測(cè)定抗原抗體反應(yīng)的最適比例 (三種類型 ) 一、 絮狀沉淀試驗(yàn) 抗原稀釋法：抗原最適比例 抗體稀釋法：抗體最適比例 方陣滴定法：抗原抗體最適比例 絮狀沉淀試驗(yàn) 表 61 最適比方陣測(cè)定法 抗體 稀釋度 抗原稀釋度 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 對(duì)照 1/5 + + + + + + + + + + + + 177。沉淀線或沉淀環(huán)的觀察以及免疫比濁法中的終點(diǎn)法就是測(cè)定此階段形成的復(fù)合物 第一階段 第二階段 沉淀反應(yīng)分兩個(gè)階段 抗原抗體特異性結(jié)合，快速但不可見。 常用的凝膠有瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝膠。 。 。 ：穩(wěn)定性好，敏感度高，精確度高，簡(jiǎn)便快速，易于自動(dòng)化，無(wú)放射性核素污染，適合大批量標(biāo)本檢測(cè)。 小 結(jié) 。 應(yīng)用 最常用于 M蛋白的鑒定與分型，也用于尿中本周氏蛋白質(zhì)的檢測(cè)與 κ 、 λ 分型，腦脊液中寡克隆蛋白的檢測(cè)與分型。 原理 單向免疫擴(kuò)散＋電泳 ,定量檢測(cè)技術(shù) 二、火箭免疫電泳 %巴比妥瓊脂糖約 55℃ ，加入適量抗血清，混勻后制板，打孔，孔內(nèi)加待測(cè)樣品，樣品孔放負(fù)極側(cè)， 6h后觀察瓊脂板上沉淀峰，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出待測(cè)樣品濃度。 鑒定抗原抗體的最基本、最常見的方法之一 二、雙向擴(kuò)散試驗(yàn) （平板法） 應(yīng)用 否以及相對(duì)含量的估計(jì) 量的估計(jì)
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