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第六章沉淀反應(yīng)(專業(yè)版)

2025-12-24 14:04上一頁面

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【正文】 優(yōu)點 免疫固定電泳 、體液中蛋白質(zhì)的測定。 。 形成肉眼可見的大的免疫復(fù)合物。 定量試驗 一、單向擴散試驗 (平板法) 傾注平板 打孔 加樣 放置 37℃ 24~ 48h觀察沉淀環(huán) 單向擴散試驗(平板法) 沉淀環(huán)的直徑與待測標(biāo)本含量兩種計算方法 Mancini曲線: 大分子抗原( IgM) 時間擴散> 48h, 常數(shù) K= C∕d 2 普通坐標(biāo)紙曲線 Fahey曲線: 小分子抗原( IgG,IgA) 擴散時間 24h 常數(shù) K= logC∕d 半對數(shù)坐標(biāo)紙曲線 C為抗原濃度, d為沉淀環(huán)直徑 單向擴散試驗 (平板法) T1為 16~ 24h; T2為 24~ 48h; T3為 48h以上 ,可見 T3為直線 , T1為反拋物線 t1為 16~ 24h; t2為 24~ 48h; t3為 48h以上 ,可見 t1為直線 , t3為反拋物線 Mancini曲線 Fahey曲線 影響因素: ? 抗體質(zhì)量 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線 ,質(zhì)控血清 ? 結(jié)果與真實含量不符 單克隆抗體;多克隆抗體;可出現(xiàn)假性降低與增高 ? 雙環(huán)現(xiàn)象 不同擴散率抗原性相同的兩個組分 單向擴散試驗 上排為 5個不同濃度的參考品; 下排為患者血清 , 下排右 2為異常病理血清 單向擴散試驗 (平板法) 原理:將抗原抗體分別加在瓊脂糖不同的對應(yīng)孔中,兩者在凝膠中自由擴散,在比例合適處形成白色沉淀線。 三、免疫電泳 純化抗原和抗體成分的分析及正常和 異常免疫球蛋白的識別與鑒定 影響因素 抗原抗體比例不當(dāng) ,需測抗原抗體最適比 抗血清的的抗體譜 ,混合抗血清的使用 電泳條件直接影響分辨率 應(yīng) 用 免疫電泳 + 免疫電泳示意圖 免疫電泳原理,不同之處是將抗血清直接加于電泳后的蛋白質(zhì)區(qū)帶表面,抗原
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