【正文】
( 參考 B. L ew i n : 《 G E N E S 》 Ⅵ , 1 9 9 7 , Fi g 3 1 . 1 6 ) RNA編輯的方式 ? ( 1)單堿基突變 ? ( 2) U的缺失和添加 編輯的可能機(jī)制 ? 1990年 指導(dǎo) RNA( guide gRNA)。 5′端有一保守序列可以和 U1 snRNA的5′端的保守順序互補 內(nèi)含子剪接位點 及保守序列 (二)參與剪接的加工因子 ? 剪接體 : 由 snRNA和蛋白質(zhì)因子組成 ? 核小分子 RNA( snRNA)至少有 : ? U1 : 5/剪切點結(jié)合 ? U2 : ? U4 /U5 : ? U6: ? 蛋白質(zhì)因子:有 20余種 ? ? (三 )剪接機(jī)制 剪接因子 snRNPs U1,U2,U5和 U4/U6。 Ⅱ 型內(nèi)含子的剪接 (一 )結(jié)構(gòu)特點 (1) 邊界序列為5′↓GUGCG……YnAG↓ ; (2) 有 6個莖環(huán)結(jié)構(gòu); 有分支點順序。 U A G U C 339。 這就意味著 35S RNA在 GTP的作用下可以自我剪接 。C ? C 端部分出現(xiàn)不穩(wěn)定的 rU由于催化了 NTP的水解, ρ因子能促使新生的 RNA鏈從三元轉(zhuǎn)錄復(fù)合物中解離出來,從而終止轉(zhuǎn)錄。 模板 DNA上都有終止轉(zhuǎn)錄的特殊信號 終止子 ,每個基因或操縱子都有一個啟動子,一個終止子。 帽子的類型 ( 4)加帽生化過程 Ⅰ 剪切前加帽 如呼腸病毒, 牛豆病毒 Ⅱ 剪切后加帽 如皰疹病毒和口炎病毒 G N1 N2 N3 G N1 N2 N3 磷酸水解酶 P P P P P P P … P P P P P P … + P i G N1 N2 N3 G m R NA 鳥苷脫酰轉(zhuǎn)移酶 P P P P P P … + P P P OH 加帽酶 G G N1 N2 N3 S A M OH P P P P P P P … + P P i ( S 腺苷基甲硫氨酸 ) 7mG m G m N1 N2 N3 OH P P P P P P P … 圖 1 3 真核生物剪切前加帽的生化反應(yīng)過程 G N1 N2 N3 N1 N2 N3P P P P … P P P P … P P P P … G N1 N2 N3 G N1 N2 N3 + + P iP P P OH P P P P … P P P P P P P …G N1 N2 N3 S A M 7 m G N1 N2 N3 P P P P P P P … P P P P P P P … 圖 1 3 真核生物剪切后加帽的生化反應(yīng)過程加尾 ( 1)加尾作用和時間 ?多聚 A是 m RNA由細(xì)胞核進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)所必需的形式。 原核與真核生物 mRNA特征比較 原核生物 mRNA特征 半衰期短; 許多 mRNA以 多順反子 的形式存在; 多順反子 指一條 mRNA可以編碼多條蛋白質(zhì)肽鏈。 ?多聚 A是轉(zhuǎn)錄后加上去的。 在新生 RNA中出現(xiàn) 發(fā)卡式結(jié)構(gòu) 會導(dǎo)致 RNA聚合酶的暫停,破壞 RNADNA雜合鏈 539。 作用: ρ因子即附著在新生的 RNA鏈上,靠ATP水解產(chǎn)生的能量,沿著 5‘→ 3’方向朝 RNA聚合酶移動,到達(dá) RNA的 3‘OH端后取代了暫停在終止位點上的 RNA聚合酶,并從模板和酶上釋放RNA,完成轉(zhuǎn)錄過程。dA區(qū)域。U ? … NNNNC 外顯子 1 內(nèi)含子 外顯子 2 轉(zhuǎn)錄 剪接 + 凝膠電泳 凝膠電泳 凝膠電泳 3 5 SRN A 環(huán)狀內(nèi)含子 線型內(nèi)含子圖 1 3 2 2 四膜蟲 3 5 S RN A 保溫前后的電泳結(jié)果 ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 , Fi g 3 1 . 1 ) 內(nèi)含子插入 β 半乳糖苷酶基因的第 10 個密碼子中 轉(zhuǎn)錄 剪接 翻譯 β 半乳糖苷酶 β 半乳糖苷酶 使菌落呈藍(lán)色 圖 1 3 2 7 內(nèi)含子活性的檢測 ( 仿 B. L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ , 1 9 9 7 , Fi g 3 1 . 5 ) (一) I型內(nèi)含子的結(jié)構(gòu)特點 1. 其邊界序列為 5′UG 3′; 2. 具有中部核心結(jié)構(gòu) ( Central core strucature) ( internal guide seguence IGS) 外顯子 1 G O H 5 C U C U C U A 339。 3 39。 d 3d 2 d4 d1 d5 d6 A G O H 活性中心 外顯子 1 外顯子 2 圖 1 3 2 9 Ⅱ 類內(nèi)含子的二級結(jié)構(gòu)( 仿 B . L ew i n : 《 G E N E S 》Ⅵ