【正文】 通過(guò)測(cè)定化石中的 D和 L氨基酸的比例可以確定它的地質(zhì)年代 。 在環(huán)境科學(xué)中的應(yīng)用 釋放到環(huán)境中的大量有機(jī)化學(xué)品是外消旋化合物 。除了手性原料和產(chǎn)品分析外，人們對(duì)手性化合物在化學(xué)過(guò)程、生物過(guò)程、環(huán)境過(guò)程的變化更感興趣。 如在不對(duì)稱(chēng)合成中 ， 一個(gè)最基本的問(wèn)題是如何獲得高對(duì)映體純的手性物質(zhì) （ 手性輔助基 、 手性配體 、 手性催化劑 ） 。 （ 王洪等 ， 色譜 ， 1998， 16（ 1） ： 22） Fig. 16 The influence of acetonitrile on the separation of enantiomers 3 mm ODS, 50 mm . capillary, packed, 52cms total length, Electrolyte: Acetonitrile/Phosphate buffer pH=, Ratio a) 15:85, b) 20:80, c) 25:75, with 10mM HP b CD ( 1mM Na2 HPO4 , adjusted to pH= with concentrated H3PO4 ), Applied Voltage 15kV, Detection at 220nm. 區(qū)帶電泳 Chlorthalidone 氯噻酮 is a drug exhibiting diuretic and hypertensive activity, but since it is neutral, its enantiomers cannot be separated by CZE using a neutral chiral selector. HPLC : Cyclobond I 2022 RSP column , CH3CN70mM triethylamine (5:95 v/v) adjusted to pH with acetic acid. Fig. Separations at different acetonitrile concentrations 5 mm HP b CD bonded silica particles, 50 mm . capillary, 27cms packed, 58 cms total length, Applied Voltage 15kV, Detection at 220nm. 電色譜分離 Electrolyte: Acetonitrile/ Phosphate buffer pH=, Ratio a) 15:85, b) 20:80, c) 25:75, d) 30:70 ( 5mM Na2HPO4 adjusted to pH= with concentrated H3PO4 ） 其他高效手性分離技術(shù) ● 手性超臨界色譜 （ SFC） ： 和 HPLC相比 ， 超臨界色譜可獲得較高的分離度和較高的檢測(cè)靈敏度；和 GC相比 ， 它不僅可分離分子量更大的組分 ， 而且可在較低的溫度下分離 ， 從而有更好的對(duì)映體選擇性 。 最近他們發(fā)現(xiàn)糖肽類(lèi)的抗生素 ristocetinA ,teicoplanin ,vanycin等具有非常廣泛的對(duì)映體分離選擇性 ,可對(duì)上百種對(duì)映體進(jìn)行成功的分離 。 對(duì)于一種分離方法，提高分離度的有效措施是 ： ? 盡可能增大外加場(chǎng)； ? 盡可能減少分離過(guò)程中欲分離物質(zhì)熵的增大； ? 盡可能加大難分離物質(zhì)對(duì)之間的差異； ? 對(duì)上面三點(diǎn)所產(chǎn)生的協(xié)同作用的優(yōu)化。 這類(lèi) CSP具有 應(yīng)用范圍廣 ， 樣品容量高 的優(yōu)點(diǎn) 。 三種形式： 凝膠顆粒；鍵合固定相和硅膠涂漬 。 Pirkle型 CSP的優(yōu)點(diǎn)是柱效和柱容量高 ， 不僅用于對(duì)映體分析 ， 也可用于對(duì)映體制備分離 。 在手性液相色譜領(lǐng)域 ， Pirkle型CSP是目前使用量大 、 適用面廣 、 對(duì)手性識(shí)別機(jī)理揭示較深刻的一類(lèi)重要 CSP。 （ 為什么 ？ ） ? 需要標(biāo)準(zhǔn)旋光值 （ 手冊(cè) 、 文獻(xiàn) ？ ） ? 旋光測(cè)定的誤差 （ 多大 ？ ） 氣相色譜手性固定相主要分為： ● 氫鍵型手性固定相 ：如某些氨基酸衍生物固定相 ，主要用于分離氨基酸 、 羧酸 、 醇 、 胺 、 內(nèi)酯 、 內(nèi)酰胺等對(duì)映體化合物 ， 氫鍵作用是對(duì)映體分離的主要作用力 ● 形成包合物的手性固定相 ：環(huán)糊精衍生物手性固定相用于分離稠環(huán)烷烴 、 沒(méi)有取代的烯烴 、 鹵代烴 、醇 、 醛 、 酮 、 胺 、 氰類(lèi) 、 環(huán)氧化合物 、 羧酸 、 鹵代酸 、 羥基酸 、 內(nèi)酯和氨基酸等化合物的對(duì)映體 。 TLC分離芳香醇胺對(duì)映體 用 D10樟腦磺酸銨作為手性離子對(duì)試劑 添加到流動(dòng)相中 ， 在普通的 GF254薄層硅膠板 ( 10cm) 2~4℃ 展開(kāi) ， 拆分拉貝樂(lè)爾(Labarol)和倍他樂(lè)克 (Batarock)兩種芳香醇胺藥物對(duì)映體 。 核心是分子手性識(shí)別作用 ， 即對(duì)映體與固定相 （ 或添加劑 ）間的相互作用涉及到分子立體選擇性 。 例如將氰醇衍生成 Mosher酯后 ， 可用 GC或 HPLC進(jìn)行分離測(cè)定 。 這些策略也是其他分析技術(shù)如波譜法研究手性識(shí)別的思路 。 色譜法不僅是對(duì)映體分析和純度測(cè)定的有力工具 ， 而且液相色譜拆分法還是制備和純化的重要手段 。 ()B堿 (+)A酸 （ 2） 所形成的非對(duì)映異構(gòu)體溶解度有較大的差別 ， 其中之一容易結(jié)晶 。 拆分過(guò)程一般包括如下三個(gè)步驟： (+)酸()酸 + ()堿 (+)酸 目前， 酶法拆分已從水溶液向有機(jī)介質(zhì)發(fā)展 。 在沒(méi)有純對(duì)映體晶種的情況下 ， 有時(shí)用結(jié)構(gòu)相似的其它手性化合物 （ 有時(shí)甚至非手性化合物 ） 作晶種 ， 也能獲得成功 。 將外消旋體分為對(duì)映體的過(guò)程 ， 叫做 對(duì)映體拆分 （ resolution） 。對(duì)已上市的消旋體藥物，要 重新評(píng)價(jià) 其光學(xué)異構(gòu)體的性質(zhì)。15 手性分離技術(shù) chiral separation ● 為什么不能把外消旋混合物視為單一的純化合物 ？ ● 為什么手性藥物可能會(huì)有不同藥理作用 ？ ● 手性分離的基本策略是什么 ？ ● 三點(diǎn)作用模型原理的基本點(diǎn)是什么？ COOH COOH H H OH OH CH 3 CH 3 HO HO COOH H CH 3 H HOOC H 3 C + o , mp C o 右旋乳酸 d或 (+) , , l或 () 左旋乳酸 o , mp C o 圖 1 乳酸分子的鏡像關(guān)系 手性分子、手性化合物 對(duì)映異構(gòu)體 1 手性問(wèn)題的重要性 手性問(wèn)題涉及到生命的起源以及各種動(dòng)植物的生存和演化 。對(duì)新申報(bào)的藥品， 一開(kāi)始 就要合成其光學(xué)異構(gòu)體。 廣義地講 ，對(duì)不等量對(duì)映體混合物進(jìn)行分離 ， 也屬于對(duì)映體拆分的范疇 。 （ 為什么 ？ ） 晶體形成時(shí)的有規(guī)律的定向排列，可能自然形成一手性環(huán)境。 C H 3H O HHH2NN H 2D, L苯基甘氨酸 (PG) (CH 3 C) 2 O O D, L乙酰 PG L氨肽酶 LPG D乙酰 PG 水解 / H + DPG D, LPG H2SO4 / 加熱 (外消旋化 ) 用微生物酶拆分外消旋體 ， 比化學(xué)拆分法具有明顯的優(yōu)越性： （ 1） 酶催化反應(yīng)通常具有高度立體專(zhuān)一性； （ 2） 副反應(yīng)少 ， 產(chǎn)率高 ， 產(chǎn)品分離提純簡(jiǎn)單； （ 3） 反應(yīng)條件較溫和 ， 如 0 ~ 50℃ ， pH接近中性； （ 4） 酶無(wú)毒 ， 易降解 ， 不會(huì)造成環(huán)境污染 ， 適于規(guī)模生產(chǎn) 。 ()堿 ()酸 （ 3） 拆分劑應(yīng)達(dá)到旋光純 。 (+)B堿 和 10 % 新對(duì)映體 （ 4） 拆分劑應(yīng)廉價(jià)易得 ， 或可方便回收 一些常見(jiàn)的手性拆分劑： ? 堿性拆分劑 ： （ ）