【正文】 ， 又容易再生出原來的對映體 。 經(jīng)過沉淀過程 ，這時析出的非對映體晶體比使用單一拆分劑大得多 ，甚至其中的一部分拆分劑可采用消旋化合物 。 過大的衍生試劑可能會縮小樣品理化性質(zhì)的差異 ， 造成分離困難 。 CA必須能提供有效的基團(tuán)和位置以便與溶質(zhì)對映體形成非對映的配合物 ， 也必須具有合適的結(jié)構(gòu)以改善分離性能和提高其立體選擇性 。 高效液相色譜 手性固定相分類： ● 選擇基鍵合相 （ Pirkle手性固定相 ） ● 纖維素和多糖衍生物 ● 環(huán)糊精 ● 蛋白質(zhì)鍵合相 ● 合成聚合物與分子烙印手性固定相 拆分機理 ：氫鍵 、 ππ鍵 、 偶極 偶極 、 包合絡(luò)合物 、配位交換 、 疏水和極性相互作用的偶合 。 但天然的纖維素手性拆分能力不高 ， 色譜性能也不好 ， 難于直接由于對映體拆分 。 毛細(xì)管電泳分離對映體的優(yōu)點： ★ 高分離效率有利于難分離對映體拆分 ★ 手性選擇劑的消耗量小 ， 運行成本低 分離過程中的最優(yōu)化策略 ——毛細(xì)管電泳分離對映體（例） 在分離科學(xué)中，最優(yōu)化指的是在最短的時間內(nèi)，用最低的消耗獲得最佳的分離效果。 所以 pH值越小 ，異丙腎上腺素與 βCD的遷移速度差越大 ， 越有利于對映體的分離 。 %100]S[]R[ ]S[]R[)R.( ??? %10 0]S[]R[ ]R[]S[)S.( ???或 測定對映異構(gòu)體純度的其他方法 ● 核磁共振法 手性衍生劑 （ CDA） 手性鑭系位移試劑 （ CLSA） 手性溶劑 （ SA） ● 同位素稀釋法：同時測比旋光度和同位素含量 ● 量熱法：采用微分掃描量熱法 ● 酶分析：利用酶的立體選擇性分析 ☆ 傳感器 （ 人工舌頭 ， 熒光 ， 電分析 ） Enantioselective analysis。 使用毛細(xì)管GC， 在 D型青霉素胺中僅有 % 的 L型就可被檢測出來 ， 解決了 D型青霉素胺的分析問題 。 這樣一來 ， 會產(chǎn)生錯誤的毒性 、 分布 、 降解和其他數(shù)據(jù) 。 在許多研究和應(yīng)用領(lǐng)域 ， 迫切需要快速準(zhǔn)確測定對映體純度方法 。 此外還有多糖 ，手性表面活性劑 ， 旋光金屬配合物等也用作手性選擇劑 。 已報道分離氨基酸 、 醇 、 酮及各種手性藥物的 80~85%是使用 OD、 OJ和 AD柱 . 高效液相色譜拆分外消旋 1苯基乙醇類化合物 三苯甲酸酯纖維素手性色譜柱（ CHIRACEL OB ， . 250mm）拆分 1苯基乙醇、 1苯基丙醇、 2氯 1苯基乙醇和 2溴 1苯基乙醇外消旋化合物，可用于監(jiān)測不對稱催化氫化反應(yīng)過程和測定產(chǎn)物對映體過剩值。 其不足是被分離的溶質(zhì)大部分需衍生以引入芳基等手性識別所需基團(tuán)；多使用非極性溶劑作流動相 ， 溶解度可能限制對某些溶質(zhì)的應(yīng)用 。 將這類固定相與某些色譜固定液 （ 如鯊魚烷 ） 混合 ， 涂到毛細(xì)管柱上分離烯烴 、 環(huán)酮 、 醇 、 胺 、 環(huán)氧化合物 、氨基醇 、 氨基酸 、 羥基酸和鹵代酸等化合物的對映體 ● 手性聚硅氧烷固定相及交聯(lián)手性固定相 ：以聚硅氧烷為基質(zhì) ， 鍵合一定濃度的手性固定相的新型色譜固定相 。 手性色譜的另一個特點是將 Pirkle型手性固定相的手性變成相反構(gòu)型 ， 可使對映體洗脫順序顛倒過來 。 其優(yōu)點是可將手性消除和檢測衍生反應(yīng)結(jié)合起來 。 ? 醇類化合物 可以用異腈酸酯轉(zhuǎn)變?yōu)榉菍τ钞悩?gòu)的氨基甲酸酯 ， 也可以用手性酰氯 （ 或酸酐 ） 轉(zhuǎn)變成酯拆分 。 ()堿 (+)酸 D,L氯霉素的母體氨基醇的結(jié)晶拆分示意圖 D,L氨基醇水溶液 D氨基醇， 80℃ 冷至 20℃ D氨基醇晶體 母液 80℃ 濃縮 冷至 20℃ L氨基醇晶體 母液 生物拆分法 生物酶 、 微生物 、 細(xì)菌等生物源具有非常專一的反應(yīng)特性 。 現(xiàn)在，對農(nóng)用化學(xué)品以及排放的手性污染物也引起人們的高度重視。 OCH 2 CHCH 2 NHCH * OH CH 3 CH 3 Propranolol S異構(gòu)體 為治療心臟病藥物心得安 R異構(gòu)體為避孕藥 N N H O O O O * * R(+)苧烯 L()苧烯 * ~ 桔子味 ~ 檸檬味 O OH H O H 2 N NH 2 S天冬酰胺 ~ 甜的 ~ 苦的 R天冬酰胺 NH 2 H 2 N O H O HO Thalidomide R異構(gòu)體為鎮(zhèn)靜藥 （反應(yīng)停） S異構(gòu)體 有致畸胎作用 圖2對映體的不同生理活性 沙利度胺（ Thalidomide） 天使還是魔鬼？ 俗名“ 反應(yīng)停 ”，早期作為懷孕婦女的止嘔藥使用 R(+)沙利度胺為鎮(zhèn)靜止嘔藥 S()沙利度胺有致畸作用 50年代末，在歐洲出現(xiàn)數(shù)千例短肢畸胎新生兒，一度震驚全世界 20世紀(jì) 90年代后，許多 國家規(guī)定 ，凡結(jié)構(gòu)中具有不對稱因素的藥物，即“手性藥物”， 必須拆分 其相應(yīng)的立體異構(gòu)體，并 分別研究 其藥理、毒理和藥物代謝性質(zhì)。 這樣交替進(jìn)行 ， 可方便地獲得大量純對映體結(jié)晶 。 換句話說 ， 化學(xué)拆分的原理是將具有相同性質(zhì)的對映體轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂胁煌再|(zhì)的非對映體來進(jìn)行分離 。 (+)B堿 ()A酸 ● 構(gòu)建手性分離環(huán)境 將手性分離介質(zhì)引入分離器中構(gòu)建手性分離環(huán)境 ，使得原本沒有分離性質(zhì)差異的對映體產(chǎn)生分離差異 。 手性色譜可以通過兩種方式進(jìn)行： ? 手性固定相法 ? 手性添加劑法 手性拆分原理包括主 客體作用 、 絡(luò)合作用 、配體交換 、 相分離 、 離子交換等 。 對于那些對映體純度 95%的產(chǎn)物 ， 一般要用 GC或 HPLC代替旋光測定 。 它也用于反相體系分離強極性溶質(zhì) 。 流動相影響對映體分離的選擇性 ， 非極性溶劑通常比甲醇 /水混合液顯示出更高的分離選擇性 。 3） 抗生素 Armstrong 等將大環(huán)抗生素利福霉素 B用于毛細(xì)管電泳手性添加劑 ,對 18種氨基酸類手性藥物的對映體進(jìn)行分離 。 （ 龍遠(yuǎn)德 ， 黃天寶 ， 高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報 ， 1999， 20： 884886） 5 手性化合物的分離分析應(yīng)用 ? 手性化合物的光學(xué)純度測定 ? 在實際樣品中對映異構(gòu)體的含量分析 手性化合物的光學(xué)純度測定 在不對稱合成 、 外消旋體拆分和手性藥物質(zhì)量控制中 ， 需要測定對映異構(gòu)體的純度 。分析牛奶或奶制品中的 L乳酸的光學(xué)純度可以判斷其存放期或是否變質(zhì) ， 因為 L乳酸的外消旋化隨時間 、 pH、 狀態(tài) （ 液體或固體 L乳酸的 ） 等因素變化 。 如異亮氨酸的消旋速度較慢 ， 可測定地質(zhì)年齡長達(dá)幾百萬年的地質(zhì)樣品；天冬氨酸的消旋化速度比異亮氨酸快十倍 ， 可測定地質(zhì)年齡小于40萬年的地質(zhì)樣品 。手性分析技術(shù)的發(fā)展，可能會對原有的一些錯誤的毒性、分布、降解和其他數(shù)據(jù)進(jìn)行修正，甚至?xí)σ恍┓ㄒ?guī)進(jìn)行修正。 手性超臨界色譜還可用于對映體的制備分離 。 以毛細(xì)管電泳分離對映體為例說明如何提高物質(zhì)的分離度，分離方法的優(yōu)化途徑。 在目前在手性液相色譜中，纖維素及其衍生物大多涂漬在硅膠上使用。 它們具有確定化學(xué)結(jié)構(gòu) ， 其共同結(jié)構(gòu)特征是在手性中心附近至少含有下列基團(tuán)之一： （ 1） π酸或 π堿芳基 ， 具有給體 受體相互作用能力 （ 電子轉(zhuǎn)移絡(luò)合 ） 。 (a) Labarol CH2Cl2CH3OH (67:33)，含 D樟腦磺酸銨 mmol / L (b) (b) Batarock CH2Cl2CH3OH (60:40) ， 含 D 樟 腦 磺