色譜分析法概論(2)-免費閱讀
【正文】 Dm：組分在 流動相 中的擴散系數(shù)。ef )/( σtnR＝Hef =L/nef 76 小結(jié) ?塔板理論解釋了流出曲線的形狀 ?說明了組分的分配和分離過程 ?提出了評價柱效的指標 ?但某些假設(shè)與實際色譜過程不符 77 二、速率理論 ?塔板理論的不足： 組分在兩相中不可能真正達到分配平衡； 組分在色譜柱中的縱向擴散不能忽略 。 σ一定時， 峰高 h取決于 C0。 組分 A： k=1， N=8和 9時，柱出口處達到濃度最大點。 ?④縱向擴散可以忽略。 )1(ms0R VVKtt ??s0R KVVV ??48 第四節(jié) 色譜法基本理論 49 21RR21RR )(22/)(1212WWttWWttR????＝＝要使 R大，必須： ?tR大 ?k大 熱力學 W小 峰展寬小 動力學 50 ?色譜理論包括兩方面 : –熱力學理論 ：研究分配 (分離 )過程，塔板理論（ plate theory）。 42 43 空間排阻色譜法 ? 根據(jù)空間排阻（ steric exclusion）理論，孔內(nèi)外同等大小的溶質(zhì)分子處于擴散平衡狀態(tài)： ? 滲透系數(shù) ： Kp =?Xs?/?Xm? （ 0＜ Kp＜ 1 ） 由溶質(zhì)分子的線團尺寸和凝膠孔隙的大小所決定。 39 以硅膠為吸附劑：極性強的組分吸附力強 。 ?硅膠 表面硅醇基為吸附中心。 反相 液液分配 色譜：流動相的極性強于固定相的極性。R00Rtttttk ???26 （三） 色譜分離的前提 ? KA≠KB 或 kA≠kB 是色譜分離的前提。（摩爾數(shù)？） ? 又稱為質(zhì)量分配系數(shù)或分配比。 W=4σ 或 W=返回 21 ?總分離效能指標 ? 分離度 (resolution； R)：又稱分辨率。R39。 固定相顆粒間間隙、導管的容積、檢測器內(nèi)腔容積的總和。 正常色譜峰、拖尾峰和前延峰 14 ?對稱因子 fs ?(symmetry factor) ： ?衡量色譜峰的對稱性 ABAAWf hs2/)(2/???15 到 20頁 到 19頁 16 ? 保留時間 (retention time。 中國藥典二部 ， 700多 ， 純 度檢查 、 定性鑒別或含量測定 ， 一部 ， 600多鑒別或含量測定 。 6 第一節(jié) 色譜法的分類和發(fā)展 一、色譜法的分類 按流動相的分子聚集狀態(tài)分類 : GC、 LC、 SFC 等 按固定相的分子聚集狀態(tài)分類 : GSC、 GLC、 LSC、 LLC等 按操作形式分類 : 柱色譜法、平面色譜法、毛細管電泳法等 按色譜過程的分離機制分類 : 分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法、 空間排阻色譜法、毛細管電泳法等 7 毛細管電色譜法 （ CEC） 色譜法 GSC 液相色譜法 （ LC） 柱色譜法 平面色譜法 毛細管電泳法 （ CE） LLC LSC SEC IEC BPC 紙色譜法 薄層色譜法 （ TLC） LLC LLC LSC 氣相色譜法（ GC） 柱色譜法 GLC 超臨界流體色譜法 （ SFC） 8 二、色譜法的發(fā)展 （一）色譜法的歷史 （二）色譜法的現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢 1．新型固定相和檢測器的研制 2．色譜新方法的研究 3．色譜聯(lián)用技術(shù) 4．色譜專家系統(tǒng) 9 第二節(jié) 色譜過程和基本原理 一、色譜過程 實現(xiàn)色譜操作的基本條件是必須具備相對運動的兩相，固定相 (stationary phase)和流動相 (mobile phase)。tR)： 從進樣到某組分 在柱后出現(xiàn)濃度極大時的時間間隔。 18 ?定性參數(shù) 3 ? 調(diào)整保留體積 (adjusted retention volume。R1,21212VVttr ???相對保留值 (r) ：兩組分的調(diào)整保留值之比 注意： VR’是定值， tR’與 FC成反比 19 ?定量參數(shù) ? 峰高 (peak height； h)：組分在柱后出現(xiàn)濃度 極大時的檢測信號，即色譜峰頂至基線的 距離。是相鄰兩色 譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比。 分配系數(shù)與色譜分離 msmmk ?還與固定相和流動相的體積有關(guān)。 = t0(1+KA ) ARt
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