【正文】 異嗜性抗原 指與種屬特異性無關(guān) ， 存在于人 、 動物 、 植物及微生物之間性質(zhì)相同的抗原 (交叉抗原 )。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 15 菌體抗原 又稱 O抗原 ，是革蘭氏陰性菌細胞壁抗原，其化學本質(zhì)為脂多糖的多糖側(cè)鏈。莢膜是細菌主要的表面抗原，成分為多糖或多肽。如 囊膜抗原 、 衣殼抗原 、 可溶性抗原 和 核蛋白抗原 。如口蹄疫病毒的衣殼蛋白 VP VP2 、 VP3 、 VP4 等屬此類抗原。 依據(jù)化學結(jié)構(gòu)和抗原性差異 ， Ig可分為 IgG、 IgM、 IgA、 IgE和 1gD五類 。 二 、 Ig的分子結(jié)構(gòu) IgG、 IgE、 血清型 IgA， IgD均是以單體分子形式存在 ， IgM是以五個單體分子構(gòu)成的五聚體 ， 分泌型IgA是以二個單體構(gòu)成的二聚體 。 輕鏈 又稱 L鏈 ， 兩條相同的輕鏈其羧基端 (C端 )靠二硫鍵分別與兩條重鏈連接 。 Ig每條重鏈有 四個 功能區(qū) ， 分別稱為 VH、 CHCH CH3； IgM和 IgE有五個功能區(qū) ， 即多了一個 CH4。 其中有兩個相同的片段 ， 可與抗原特異性結(jié)合 ， 稱為 抗原結(jié)合片段 （ Fab） ；另一個片段可形成蛋白結(jié)晶 ， 稱為 Fc片段 (Fc) 。 補體結(jié)合位點 位于 CH2上； Fc受體結(jié)合位點 在 CH3上 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 26 連接鏈 又稱 J 鏈 ， 在 Ig中 ， IgM是五聚體 ， 分泌型的 IgA是二聚體 ， 這些單體之間就是依靠 J 鏈 連接起來的 。 SC可防止 IgA在消化道內(nèi)為蛋白酶所降解 ， 從而使 IgA能發(fā)揮免疫作用 。 分類分型 Ig類的區(qū)分是依據(jù)其重鏈 C區(qū)的理化特性及抗原性 的差異 ， Ig可分為IgG、 IgM、 IgA、IgE和 IgD 5大類及其亞型 。 同種異型 指 Ig在 同一種動物不同個體之間呈現(xiàn)出的抗原性 。 獨特位 獨特型由 Ig可變區(qū)若干個抗原決定簇所組成 ， 它們被稱為 獨特位 。 產(chǎn)生與分布 IgG主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細胞產(chǎn)生 ， 主要在 血漿 中 （ 占 75％ 80％ ） ， 其余存在于組織液 和 淋巴液 中 。 產(chǎn)生與分布 IgM主要由脾臟和淋巴結(jié)中 B細胞產(chǎn)生 ， 只分布于 血液 中 ， 僅占血清 lg的 10％ 左右 。 單體存在于血清中 ， 稱為 血清型 IgA， 約占血清 Ig的 10％20％ ； 二聚體為分泌型 IgA。 在傳染病預(yù)防中 ， 經(jīng) 滴鼻 、 點眼 、 飲水及噴霧 途徑免疫 ， 均可產(chǎn)生分泌型 IgA而建立相應(yīng)的粘膜免疫力 。 IgE在抗寄生蟲 、 某些真菌感染方面也有重要作用 。 此外 IgD與免疫記憶與某些過敏反應(yīng)有關(guān) 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 35 2. 單克隆抗體 (McAb) 由一個 B細胞分化增殖的子代細胞 (漿細胞 )產(chǎn)生的 針對單一抗原決定簇的抗體 ， 稱為單克隆抗體 。 McAb優(yōu)點 與多克隆抗體比較 ， McAb具有無可比擬的優(yōu)越性 ， 具有 高特異性 、 高純度 、 均質(zhì)性好 、 親和力不變 、 重復性強 、 效價高 、 成本低 、并可大量生產(chǎn) 等優(yōu)點 。 (3) 飼養(yǎng)細胞的準備 常用 小鼠巨噬細胞或胸腺細胞 作為飼養(yǎng)細胞 。 靜置 90s， 逐漸加入 HAT培養(yǎng)基 ， 分于加有飼養(yǎng)細胞的 96孔培養(yǎng)板孔中 ， 置 5％ 10％ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 。 通過檢測篩選出抗體陽性孔 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 42 (8) 單克隆抗體的生產(chǎn) 獲得穩(wěn)定的雜交瘤細胞克隆后 ， 即可用于生產(chǎn)單克隆抗體 。 六 、 抗體的分類 1. 根據(jù)抗原的來源 異種抗體 由 異種抗原免疫 產(chǎn)生的抗體均稱為異種抗體 ， 如各種微生物抗體 、 對異種蛋白和細胞的抗體 ， 因此大多數(shù)抗體均屬于此類 。 免疫抗體 指自然感染 ， 人工免疫動物所產(chǎn)生的抗體 。 在免疫學發(fā)展的不同時期 ， 不同的學者們提出了不同的關(guān)于抗體產(chǎn)生的學說 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 47 二 、 克隆選擇學說對幾個問題的解釋 (一 )對抗體產(chǎn)生多樣性的解釋 動物出生以后 ，機體便已具有產(chǎn)生各種各樣抗體的免疫活性細胞 ，體內(nèi)有眾多細胞克隆可足夠抗原選擇 。 相應(yīng)的細胞克隆一旦被選出 ， 即使無抗原存在 ， 機體也能繼續(xù)產(chǎn)生抗體 。 在胚胎時期 ， 人為地引進異體抗原 ， 也能消除與該抗原相對應(yīng)的淋巴細胞克隆 ， 動物出生后 ， 對此種抗原即不產(chǎn)生免疫反應(yīng) ，形成人工免疫耐受 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 50 復習思考題 1． 什么是免疫學 ?免疫有哪些基本功能 ? 2． 抗原 、 抗原性的概念 ?完全抗原與半抗原的概念是什么 ? 3． 抗原物質(zhì)成為免疫原的條件有哪些 ? 4． 什么是抗原決定簇 ?如何理解單特異性決定簇與多特異性決定簇 ? 5． 怎樣使半抗原具有免疫原性 ? 6． 解釋抗原交叉性的合義 ? 7． 抗體與免疫球蛋白的概念是什么 ? 8． 圖解免疫球蛋白單體的分子結(jié)構(gòu) 。 細菌總論 共七章，介紹細菌的形態(tài)、構(gòu)造、生理，消毒與滅菌，細菌生態(tài)、致病機理、遺傳變異，細菌分類與命名等。 病毒 共十四章，介紹病毒的形態(tài)、構(gòu)造、繁殖、遺傳、培養(yǎng)，病毒的致病性。 由 免疫器官 、 免疫細胞 組成 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 59 1. 骨髓 (bone marrow) 是體內(nèi)重要的造血器官 。 一部分淋巴干細胞分化為 T細胞的前體細胞 ， 隨血流 進入胸腺 后 ， 分化為成熟的淋巴細胞稱為 胸腺依賴性淋巴細胞 ， 簡稱 T細胞 ， 參與 細胞免疫 。 青春期之后 ， 胸腺實質(zhì)萎縮 退化 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 62 胸腺的免疫功能： (1) T細胞成熟的場所 骨髓中的前 T細胞隨血流進入胸腺 ， 先后在皮質(zhì)和髓質(zhì) ， 分化增殖為成熟的具有不同功能的 T細胞亞群 。 性成熟前達到最大 ， 以后逐漸萎縮退化消失 。 胚胎后期或初孵出的雛禽切除腔上囊 ， 則體液免疫應(yīng)答受到抑制 ， 漿細胞減少或消失 ， 接受抗原刺激后不能產(chǎn)生抗體 ， 但切除腔上囊對細胞免疫則影響很小 ， 被切除的雛禽仍能排斥皮膚移植 。 這類器官富含捕捉和處理抗原的巨噬細胞 、 樹突狀細胞和朗罕細胞等 ， 能速捕獲處理和遞呈抗原給免疫活性細胞 。 接觸抗原刺激后 ， B細胞分裂增殖形成 生發(fā)中心 ， 內(nèi)含不同分化階段的 B細胞和漿細胞 。髓索中含有 B細胞 、漿細胞和巨噬細胞等。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 67 雞無淋巴結(jié) ，但淋巴組織廣泛分布于體內(nèi)，有的為彌散性；有的為淋巴集結(jié)，如盲腸扁桃體；有的呈小結(jié)狀等，它們在抗原刺激后都能形成生發(fā)中心。 2. 脾臟 實質(zhì)分為兩部分 ， 一部分貯存紅細胞 ， 捕獲抗原和生成紅細胞 ， 稱為 紅髓 ；另一部分發(fā)生免疫應(yīng)答 ， 稱為 白髓 。 脾臟的免疫功能： （ 1）血液濾過作用 脾臟中的巨噬細胞等可吞噬清除混入血液的細菌等異物和自身衰老傷殘的血細胞等廢物。 脾臟是體內(nèi)產(chǎn)生抗體的主要器官 。 如消化道 、 呼吸道和尿生殖道黏膜下層的淋巴組織 。 免疫活性細胞 在免疫細胞中 ， 接受抗原物質(zhì)刺激后能分化增殖 ， 產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的細胞 ， 稱為 免疫活性細胞 (ICC） ， 主要為 T細胞和 B細胞 。 如單核吞噬細胞和樹突狀細胞等 。 成熟的T細胞經(jīng)血流分布到外周免疫器官的胸腺依賴區(qū)定居和增殖 ， 并可經(jīng)血液 組織 淋巴 血液再循環(huán)巡游全身各處 。發(fā)揮體液免疫功能。 二 、 K細胞和 NK細胞 NK細胞和 K細胞具有非特異性殺傷功能 ， 這些細胞直接來源于骨髓 。 K細胞殺傷的靶細胞包括 病毒感染細胞、腫瘤細胞、 移植物中的 異體細胞 及 較大的病原體 (如寄生蟲 )等，故 K細胞在抗腫瘤免疫和移植物排斥反應(yīng)、清除自身的衰老細胞等方面有一定意義。而導致靶細胞溶解，即 NK細胞也具有 ADCC作用。 NK細胞對腫瘤細胞的殺傷作用是廣譜的 ， 因有 免疫監(jiān)視 作用 。 1. 單核吞噬細胞 (Mф) 單核吞噬細胞包括血液中的單核細胞和組織中的巨噬細胞 。 巨噬細胞可在抗體存在下發(fā)揮 ADCC作用 。 細胞有MHCⅡ 類分子 、 FC受體和 C3b受體 ， 可通過結(jié)合抗原 — 抗體復合物將抗原遞呈給淋巴細胞 。只有遺傳性完全相同的動物可以互相移植不引起排斥反應(yīng)。 組織相容性復合體（ MHC）有三類重要位點：第 Ⅰ 類位點（ MHCⅠ 類）編碼移植反應(yīng)抗原分子；第 Ⅱ 類位點（ MHCⅡ 類）編碼包括調(diào)節(jié)淋巴細胞增生和相互作用及免疫強度的基因（包括免疫調(diào)節(jié)基因）；第 III類位點（ MHCIII類） 編碼控制某些補體成分和補體受體產(chǎn)生的基因。 粒細胞由于有分葉狀的細胞核 ， 又稱多形核白細胞 。 嗜酸性粒細胞 含有多種酶 ， 尤其富含過氧化物酶 。 肥大細胞 存在于周圍淋巴組織 、 皮膚的結(jié)締組織 ， 特別是在小血管周圍 、 脂肪組織和小腸黏膜下組織等中 。 在免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)中有多種生物學活性作用 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 84 一、種類與命名 細胞因子的種類繁多，具體包括干擾素 (IFNα、 β、 γ)、 白細胞介素 (IL 114)、 腫瘤壞死因子 (TNFα、 β)、 集落刺激因子 (CSF)等四大系列十幾種。 4． 激素樣活性作用 即細胞因子的產(chǎn)量非常微小 ，卻具有極高的生物學活性 。 除參與機體的多種免疫反應(yīng)外 ， 有些細胞因子還參與炎癥 、 發(fā)熱等 ， 甚至影響某些生理活動 。 表現(xiàn)形式 免疫應(yīng)答的表現(xiàn)形式為 體液免疫和細胞免疫 ， 分別由 B、 T細胞介導 。 1. 致敏階段 又稱 感應(yīng)階段 ， 是抗原物質(zhì)進入體內(nèi) ，抗原遞呈細胞 對其 識別 、 捕獲 、 加工處理和遞呈 ，以及抗原特異性 淋巴細胞 (T、 B細胞 )對抗原的識別階段 。 這個階段有多種細胞間的協(xié)作和多種細胞因子的參加 。 CTL溶解靶細胞主要由其釋放的兩種物質(zhì)參與 ， 一是穿孔素 ， 這是導致靶細胞溶解的重要介質(zhì)；二是 淋巴毒素 (LT、 TNFβ)， 它可與靶細胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合 ，誘導靶細胞自殺 。 一、抗體產(chǎn)生的動力學 動物機體初次和再次接觸抗原后，引起體內(nèi)抗體產(chǎn)生的種類，抗體的水平等都有差異。 初次應(yīng)答產(chǎn)生的抗體總量較低，維持時間也較短。 B. 總量高 維持長 可產(chǎn)生高水平的抗體 ， 可比初次應(yīng)答多幾倍到幾十倍 ， 而且維持很長時間 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 96 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 97 二 、 抗體的免疫學功能 抗體在體內(nèi)可發(fā)揮多種免疫功能 。 4. 局部黏膜免疫作用 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 98 5. 抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用 (ADCC) 一些淋巴細胞 (如 K細胞 )， 其表面 IgG)的 Fc受體 ， 當抗體與相應(yīng)的靶細胞 (如腫瘤細胞 )結(jié)合后 ， 效應(yīng)細胞發(fā)揮其細胞毒作用 ， 將靶細胞殺傷 。 課件 002 獸醫(yī)微生物學教學課件 99 三 、 影響抗體產(chǎn)生的因素 1. 抗原方面 A. 抗原的性質(zhì) B. 抗原的物理狀態(tài) C. 抗原用量 、 接種次數(shù)與時間間隔 D. 接種途徑 2. 機體方面 A. 遺傳因素 幼齡 、 青壯年 、 老齡動