20xx年醫(yī)學專題—神經細胞體外培養(yǎng)方法及應用-預覽頁
【正文】 ，用來培養(yǎng)大鼠CNS的成神經細胞瘤細胞。,N1的配方(p232。,神經體外培養(yǎng)(p233。 bāo)培養(yǎng)操作程序表,脊髓后根節(jié) 大腦皮質 孕18~20天大鼠胚胎(pēitāi) 新生1~3天大鼠 在CMFHanks液中取出組織除去腦膜 ? 與CMFHanks 液一起移至離心管 ? 舍棄CMFHanks液，再加入5ml 0.25%胰蛋白酶和5滴0.2%Dnase液 ?,第十五頁，共三十頁。 r236。 斷頭，取出大腦，分離腦 膜 ，夾取兩側大腦皮質(d224。 剪碎，0.51mm3,用DHank’s充分洗去殘血 加入510倍量0.25%胰蛋白酶，移入離心管中放到水370C浴箱中消化2025分鐘。 370C 5%CO2培養(yǎng)2天后換生長培養(yǎng)液,第十八頁，共三十頁。 3天后不到接種的一半，故研究某一生長因子前3天加藥最好,第十九頁，共三十頁。,體外分化(fēnhu224。,神經細胞的特殊染色鑒定(ji224。n)染色 NADPHd特異性神經組織化學法,第二十二頁，共三十頁。 2. 藥物(y224。)，如 中藥，腦活素，神經生長因子，成纖維細胞生長因子 （bFGF），神經營養(yǎng)因子 3. 細胞間相互作用：巨噬細胞，雪旺細胞等。n)方法,研究手段及測量指標 1. 形態(tài)學觀察： 光鏡，相差顯微鏡：細胞數(shù)目，形態(tài)，大體結構，突觸 電鏡：超微結構。,研究手段及測量(c232。 6. 顯微測量：胞體平均直徑和胞體橢圓率，突起長度及胞徑。 2. 特殊培養(yǎng)階段(jiēdu224。,第二十七頁，共三十頁。ng)變化 細胞表面受體，等等,第二十八頁，共三十頁。o),第二十九頁，共三十頁。由于該方法具有簡化細胞生化環(huán)境、明確生長條件、便于施加實驗因素及容易獲得活體直接觀測結果等優(yōu)點，因而已成為研究神經系統(tǒng)結構和功能的有效手段(shǒudu224。該實驗室共列出了三種神經元限定性培養(yǎng)添加物的配方，代號分別為N
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