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分子生物學實驗流程及相關試劑、儀器概述-預覽頁

2025-01-17 15:14 上一頁面

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【正文】 ? 通過 5‘RACE和 3’RACE克隆已知部分序列的目標基因通過核酸雜交和免疫反應篩庫? 將培養(yǎng)于平板的噬菌斑通過印跡轉于尼龍膜,并于核酸交聯(lián)儀中固定。并通過電泳、凝膠成像系統(tǒng)檢測DNA、 RNA的提取、純化和分析? 包含有目標基因的質粒的獲得? 水稻基因組 DNA的提取、純化和分析? 水稻各器官 Total RNA的提取、純化和分析包含有目標基因的質粒的獲得? 對于通過篩庫技術獲得的目標基因? 通過噬菌體載體的自切割作用生成目標質粒? 對于通過 PCR技術獲得的目標基因? 通過回收純化后利用 T載體等克隆并轉化細菌? 鋪板培養(yǎng)后通過藍白斑,原位裂解雜交分離出含有目標質粒的單個菌落對于通過 PCR技術獲得的目標基因PCR或 RACE電泳凝膠成像系統(tǒng) 長波紫外觀察箱切膠膠回收試劑盒T載體、平末端載體轉化細菌并鋪板培養(yǎng)篩選目標菌落提取目標質粒對于通過 PCR技術獲得的目標基因PCR或 RACE瓊脂水平電泳凝膠成像系統(tǒng)、手提紫外燈 長波紫外觀察箱PCR回收試劑盒 膠回收試劑盒PCR儀電泳儀器恒溫水浴鍋、離心機Taq酶、薄壁管、礦物油瓊脂糖對于通過 PCR技術獲得的目標基因(續(xù))純化產物PCR產物測序 T載體、平末端載體連接細菌轉化、鋪板培養(yǎng)藍白斑篩選、菌落原位雜交質粒提取、酶切分析、測序測序儀 低溫冰箱雜交箱、恒溫搖床、低溫冰箱超凈工作臺、電轉化儀離心機、恒溫水浴鍋感受態(tài)細胞、培養(yǎng)基、抗生素Xgal、 IPTG、尼龍膜和探針限制性內切酶質粒提取、分析? 常規(guī)質粒提取方法:通過細菌的適當裂解釋放出質粒,利用酚和氯仿抽提掉蛋白,再利用無水乙醇沉淀質粒 DNA? 質粒提取試劑盒:裂解方法一致
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