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第二章-原料的預(yù)處理-預(yù)覽頁

2025-08-29 15:32 上一頁面

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【正文】 越大,離心沉降速度越大。 缺點(diǎn): 差速離心的分辨率不高,沉淀系數(shù)在同一個(gè)數(shù)量級(jí)內(nèi)的各種粒子不容易分開,常用于其他分離手段之前的粗制品提取。 這種方法是根據(jù)分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)分成一系列區(qū)帶,達(dá)到彼此分離的目的。如果離心時(shí)間過長(zhǎng),所有的樣品可全部到達(dá)離心管底部;離心時(shí)間不足,樣品還沒有分離。當(dāng)管底介質(zhì)的密度大于粒子的密度,即 ρL> ρs時(shí)粒子上?。辉趶濏斕?ρs> ρL時(shí),則粒子沉降,最后粒子進(jìn)入到一個(gè)它本身的密度位置即 ρs= ρL,此時(shí)粒子不再移動(dòng),粒子形成純組分的區(qū)帶,區(qū)帶與樣品粒子的密度有關(guān),而與粒子的大小和其他參數(shù)無關(guān),因此只要轉(zhuǎn)速、溫度不變,則延長(zhǎng)離心時(shí)間也不能改變這些粒子的成帶位置。 生化用離心機(jī)一般為冷卻式,可在低溫下操作,稱為冷凍離心機(jī)。 B、低固體含量的懸浮液 (1%) 碟式離心機(jī): 化學(xué)、制藥和生化工業(yè)應(yīng)用最廣泛 特點(diǎn): A、 10100個(gè)錐頂角為 60100176。 C、活塞排渣式。由于可壓縮濾餅的比阻隨壓力差提高而增大,因此,過濾操作中,壓力差是重要的操作參數(shù),對(duì)可壓縮濾餅,一定要緩慢增大操作壓力。 深層過濾: 過濾過程中顆粒的運(yùn)動(dòng): ① 遷移行為:顆粒運(yùn)動(dòng)到過濾介質(zhì)內(nèi)部孔隙表面的行為,其作用力 有:擴(kuò)散作用力,重力,慣性力。固相成分、液相離子組成和 離子濃度、 pH值等會(huì)影響顆粒與介質(zhì)表面的電性和荷電 量,進(jìn)而影響附著效果。 :反映其對(duì)流體流過時(shí)的阻力,滲透率越大, 阻力系數(shù)越小。 :耐腐蝕性??捎糜谶^濾制藥工程中的發(fā)酵液,能除去藥物中的熱源物質(zhì)。耐高溫、高壓,且過濾精度高、壽命長(zhǎng)。屬表面過濾,可用流體逆洗再生。因此大顆粒被外部截留,小顆粒被內(nèi)部截留。 措施:采用預(yù)處理(加熱、加入添加物)及多種分離技術(shù)的組 合工藝(先粗濾再精濾)。 方法:采用多次復(fù)濾,過濾介質(zhì)采用纖維黏結(jié)過濾管或微孔 膜濾芯。其發(fā)展主要集中在以下幾方面: 1. 大處理量的高效分離設(shè)備的研發(fā)。 5. 對(duì)高要求產(chǎn)業(yè)的集成工藝的研發(fā)。 4. 對(duì)預(yù)處理技術(shù)了解和應(yīng)用不夠。但某些情況下,感興趣的產(chǎn)品不在發(fā)酵液內(nèi),而在細(xì)胞內(nèi)部,因此對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的提取,必須先把細(xì)胞破碎,使胞內(nèi)物質(zhì)釋放出來,然后再提取產(chǎn)品。動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁,易于破碎。 破碎細(xì)胞的目的就是使細(xì)胞壁和細(xì)胞膜受到不同程度的破壞(增大通透性)或破碎,釋放其中的目標(biāo)產(chǎn)物。 細(xì)胞的機(jī)械破碎主要有高壓勻漿、珠磨、撞擊破碎和超聲波破碎等方法。 細(xì)胞破碎法 破碎方法 機(jī)械方法 非機(jī)械方法 固體剪切力 流體剪切力 干燥處理 溶胞處理 球磨法 壓榨法 高壓勻漿 超聲法 酶溶法 化學(xué)法 物理法 1. 壓力破碎法: 利用壓力釋放時(shí)的固液剪切進(jìn)行破碎。 影響因素:壓力、循環(huán)操作次數(shù) 和溫度。 珠磨法操作的有效能利用率僅為 1%左右,破碎過程產(chǎn)生大量的熱能。 3. 撞擊破碎 原理:細(xì)胞是彈性體,比一般剛性固體粒子難于破碎。 特點(diǎn):① 細(xì)胞破碎僅發(fā)生在與撞擊板撞擊的一瞬間,細(xì)胞破 碎均勻,可避免反復(fù)受力發(fā)生過度破碎的現(xiàn)象; ② 細(xì)胞破碎程度可通過無級(jí)調(diào)節(jié)載氣壓力(流速)控 制,避免細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的破壞,適用于細(xì)胞器(如 線粒體、葉綠體等)的回收。 影響因素 :聲強(qiáng)、聲頻、溫度、時(shí)間、離子強(qiáng)度、 pH、 細(xì)胞類型。 該法操作 簡(jiǎn)單、 溫和,選擇性強(qiáng),酶 能快速地破壞細(xì)胞壁,而不影響細(xì)胞內(nèi)含物的質(zhì) 量,但缺點(diǎn)是酶的費(fèi)用高, 可規(guī)?;a(chǎn),但適 用面窄。 8. 凍結(jié) 融化法 : 機(jī)理:一是在冷凍過程中會(huì)使細(xì)胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)破裂, 從而增加細(xì)胞的親水性;二是冷凍時(shí)胞內(nèi)水結(jié)晶形 成冰晶粒,引起細(xì)胞膨脹而破裂。 目標(biāo)產(chǎn)物的選擇性釋放 原則: ( 1)當(dāng)目標(biāo)產(chǎn)物在細(xì)胞膜附近時(shí),采用較溫和的 方法(酶溶等)。 細(xì)胞壁的強(qiáng)度和結(jié)構(gòu):酵母和真菌,含有纖維素和幾丁質(zhì), 比細(xì)菌的胞壁強(qiáng)度大,應(yīng)選擇高壓勻
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