【正文】 M) HEpG2 上皮細(xì)胞 人 肝細(xì)胞癌 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA HEp2 上皮細(xì)胞 人 喉癌 MEM, 10% 胎牛血清。 2．合成培養(yǎng)基 人工設(shè)計(jì)、配制的培養(yǎng)基，如MEM、19DMEM、RPMI1640等 目錄? 細(xì)胞培養(yǎng)基的分類? 細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)用選擇 細(xì)胞培養(yǎng)基的分類編輯本段回目錄培養(yǎng)細(xì)胞的完全培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如MEM）和添加劑（如血清或無血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長因子）組成，培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn)，其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)最通用的培養(yǎng)基。F12中含有硫酸亞鐵，據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。這些基礎(chǔ)培養(yǎng)基的組成成分是建立在對不同細(xì)胞系生長的研究之上的，但通常在原代培養(yǎng)中使用也能有比較令人滿意的結(jié)果。Leiboviz`s L15培養(yǎng)基可用來在大氣環(huán)境中令神經(jīng)細(xì)胞生長，該培養(yǎng)基采用了與眾不同的BSS作基礎(chǔ)，它含有高濃度的氨基酸來提高緩沖能力，培養(yǎng)基中使用半乳糖作碳源，以阻止培養(yǎng)基中乳酸形成，少量溶解的CO2由丙酮酸代謝產(chǎn)生。 RT Dulbecco’s Modified Eagle Medium ① 0688100g 。 RT Dulbecco’s Modified Eagle Medium ② 05919100g ( for 1L) Nissui 不含L谷氨酸、碳酸氫鈉。 RT Eagle’s MEM ①021502729776221能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。 RT Eagle’s MEM ③ 05902100g ( for 1L) Nissui 不含卡那霉素、酚紅、L谷氨酸、碳酸氫鈉。能高壓滅菌（121℃，15分鐘）。該培養(yǎng)基比Eagle’s MEM多添加了7種氨基酸、丙酮酸鈉和維生素B12。 0681500g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。該培養(yǎng)基能克服一般RPMI 1640 培養(yǎng)基只能膜過濾除菌而難以除去諸如支原體的缺點(diǎn)，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠和人的白血病細(xì)胞、各種細(xì)胞系和KATOIII細(xì)胞株能顯著增強(qiáng)它們的活性。 RT UC Medium 202 05923103g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。特別適用于HeLa、L或其他細(xì)胞系的培養(yǎng)。SFM101是一種無血培養(yǎng)基，對細(xì)胞培養(yǎng)和幫助小鼠雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體作用顯著。 RT Earle’s Solution 05907100g ( for 1L) Nissui 不含碳酸氫鈉。 RT Dulbecco’s PBS Metal Salt Solution 0591410ml ( for 1L) Nissui RT Glutamine (、凍干的谷氨酰胺) Nissui 溶液用于高壓滅菌的無L谷氨酸培養(yǎng)基的補(bǔ)充物，如Eagle’s MEM。胎牛血清中富含有絲分裂因子，常選其作增殖細(xì)胞用的血清，也用于細(xì)胞系和原代培養(yǎng)。 血清的不同批號含有不同的成分，所以許多人發(fā)現(xiàn)，應(yīng)該在使用前對血清進(jìn)行測試。它的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、黃體酮、腐胺和硒。在某些培養(yǎng)方案中，細(xì)胞直接進(jìn)入無血清培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基可以消除來自血清的不均一性。當(dāng)缺乏這些成分時，如神經(jīng)元在無血清培養(yǎng)基中生長時，特別容易為過氧化物及自由基傷害，這已被許多研究者注意到了。例如，維生素E和丙酮酸，可作為過氧化物清除劑使用。解決這一問題有兩條思路，一是讓培養(yǎng)細(xì)胞提供自己的營養(yǎng)因子，二是在培養(yǎng)基中加入純的生長因子。另外，這種方法只能進(jìn)行相當(dāng)高密度的細(xì)胞培養(yǎng)。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長因子NGF。有證據(jù)表明NGF是活體中交感神經(jīng)元存活的生理調(diào)節(jié)因子。因此，NGF的重要性在于其合適的濃度。有許多其他的PNS培養(yǎng)系統(tǒng)只需單一營養(yǎng)因子就可使有實(shí)用價值的細(xì)胞保持在一定比例，廣為人知的有雛雞睫狀自主神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元和大鼠背根神經(jīng)節(jié)感覺神經(jīng)元。因此，在大多條件下培養(yǎng)物的生長并不能忠實(shí)反映親代群體的所有特性，這一問題在CNS的細(xì)胞培養(yǎng)中特別突出，因?yàn)橐延械慕?jīng)驗(yàn)表明，沒有一種培養(yǎng)基能適合于所有類型及亞類的神經(jīng)細(xì)胞的生長。而且，已觀察到運(yùn)動神經(jīng)元與視網(wǎng)膜對任何單獨(dú)的營養(yǎng)因子的存活反應(yīng)，與PNS中所觀察到的典型反應(yīng)相比，都要小得多。現(xiàn)已知少突膠質(zhì)細(xì)胞的長期存活也需要眾多營養(yǎng)因子的相互作用。慶大霉素（10~100μg/ml）通常有廣譜抗菌效應(yīng)，并具有溶液穩(wěn)定性，故也被一些實(shí)驗(yàn)室使用，特別是當(dāng)有低水平的污染存在時更是這樣。最重要的是要意識到培養(yǎng)中主要污染物的類型，它們通常暗示了問題的來源。若要?dú)⑺浪械姆巧窠?jīng)元細(xì)胞，可以先加入血清或生長因子來保證有高比例的非神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行DNA合成，此時再加入抗有絲分裂劑。原代培養(yǎng)中用這種方法阻止成纖維細(xì)胞的過度增殖是十分必要的。使用任何一種抗有絲分裂劑，都必須考慮它的神經(jīng)原毒性，應(yīng)該確定最低效應(yīng)的使用濃度。孵箱可以自動將O2與CO2混合很快達(dá)到培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)要求，空氣中的氧濃度比血液和腦脊液中要高得多。若孵箱曾被霉菌孢子嚴(yán)重污染過，那么要想完全去除污染則會非常困難。 維持培養(yǎng)物的最佳方案常常改變。另一方面，象海馬神經(jīng)原那樣的細(xì)胞，倚賴于條件培養(yǎng)基，若換液太頻繁細(xì)胞就會衰退，此時，可采用1/3或1/2換液的方式。 (3) 根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來選擇培養(yǎng)基?；騌PMI1640, 10% 胎牛血清 HT1080 上皮細(xì)胞 人 纖維肉瘤 MEM, 10% HI 胎牛血清 和 NEAA HT29 上皮細(xì)胞 人 結(jié)腸腺癌 McCoy’5A, 10% 胎牛血清 JEG2 上皮細(xì)胞 人 絨毛膜癌 MEM, 10% 胎牛血清 MCF7 上皮細(xì)胞 人 乳腺癌 MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰島素 KB 上皮細(xì)胞 人 口腔癌 MEM, 10% 胎牛血清和NEAA Saos2 上皮細(xì)胞 人 骨肉瘤 McCoy’5A, 15% 胎牛血清 WI38 上皮細(xì)胞 人 胚胎肺 BME, 10% 胎牛血清 WISH 上皮細(xì)胞 人 羊膜 BME, 10% 胎牛血清 WS1 人 胚胎皮膚 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA HUVEC 內(nèi)皮細(xì)胞 人 臍帶 F12K, 10% 胎牛血清 和 肝素鹽 100 ug/ml EB3 淋巴樣 人 Burkitt淋巴瘤 RPMI1640, 10% 胎牛血清 Raji 淋巴樣 人 Burkitt淋巴瘤 RPMI1640, 10% 胎牛血清 IM9 成淋巴細(xì)胞 人 骨髓瘤病人骨髓 RPMI1640, 10% 胎牛血清 Daudi 成淋巴細(xì)胞 人 淋巴瘤病人血液 RPMI1640, 10% 胎牛血清 H9 成淋巴細(xì)胞 人 T細(xì)胞淋巴瘤 RPMI1640, 20% 胎牛血清 HL60 成淋巴細(xì)胞 人 早幼粒細(xì)胞白血病 RPMI1640, 20% 胎牛血清 Jurkat 成淋巴細(xì)胞 人 T細(xì)胞白血病 RPMI1640, 10% 胎牛血清 K562 成淋巴細(xì)胞 人 骨髓性的白血病 RPMI1640, 10% 胎牛血清 U937 淋巴樣 人 組織細(xì)胞淋巴瘤 RPMI1640, 10% 胎牛血清 KG1 骨髓白細(xì)胞 人 紅白血病病人骨髓 IMDM, 20% 胎牛血清 McCoy 成纖維細(xì)胞 小鼠 未知 MEM, 10% 胎牛血清 BALB/3T3 成纖維細(xì)胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 3T6 成纖維細(xì)胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 A9 成纖維細(xì)胞 小鼠 結(jié)締組織 DMEM+10% 胎牛血清+6硫鳥嘌呤（30μg/ml）+2,6二氨基嘌呤（30μg/ml） AtT20 上皮細(xì)胞 小鼠 垂體腫瘤 F10, 15% % 胎牛血清 Clone M3 上皮細(xì)胞 小鼠 黑素瘤 F10, 15% % 胎牛血清 I10 上皮細(xì)胞 小鼠 睪丸癌 F10, 15% % 胎牛血清 Y1 上皮細(xì)胞 小鼠 腎上腺瘤 F10, 15% % 胎牛血清 WEHI3b 類巨噬細(xì)胞 小鼠 骨髓單核細(xì)胞白血病 DMEM, 10% 胎牛血清 ESD3 胚胎型 小鼠 多能胚胎干細(xì)胞 DMEM+ 15% 胎牛血清+100μmol/L 2巰基丙醇 F9 胚胎型至內(nèi)胚層 小鼠 睪丸畸胎癌 DMEM, 15% 胎牛血清 BHK21 成纖維細(xì)胞 倉鼠 腎 GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA HaK 上皮細(xì)胞 倉鼠 腎 BME, 10% 小牛血清 CHOK1 上皮細(xì)胞 倉鼠 卵巢 F12, 10%胎牛血清 AR42J . 大鼠 胰腺腫瘤 Ham’sF12K, 20%胎牛血清 BRL3A . 大鼠 肝 Coon’sF12K, 5%胎牛血清 Clone 9 上皮細(xì)胞 大鼠 肝臟 F12K, 10%胎牛血清 H4ⅡEC3 上皮樣 大鼠 肝癌 F12K, 10%胎牛血清` GH1 上皮細(xì)胞 大鼠 垂體腫瘤 F10, 15% % 胎牛血清 GH3 上皮細(xì)胞 大鼠 垂體腫瘤 F10, 15% % 胎牛血清 IEC6 上皮樣 大鼠 正常小腸 DMEM, 5% 胎牛血清,L2 上皮細(xì)胞 大鼠 肺 F12K, 10%胎牛血清 XC 上皮細(xì)胞 大鼠 肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA LLCWRC 256 上皮細(xì)胞 大鼠 癌 199培養(yǎng)基, 5% 馬血清 Jensen 成纖維細(xì)胞 大鼠 肉瘤 McCoy’s 5A, 5% 胎牛血清 Rat2(TK) 成纖維細(xì)胞樣 大鼠 Rat2(TK)克隆衍生 DMEM, 5% 胎牛血清,30μg/ml BrdU PC12 NGF誘導(dǎo)的神經(jīng)表型細(xì)胞 大鼠 腎上腺嗜鉻細(xì)胞 RPMI1640, 10% 胎牛血清 L6 大鼠 大鼠 骨骼肌成肌細(xì)胞 DMEM, 10% 胎牛血清 D17 上皮細(xì)胞 狗 骨肉瘤 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA BT 成纖維細(xì)胞 牛 鼻甲骨細(xì)胞 MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA MARC145 猴 猴腎 MEM或DMEM, 10%小牛血清 CV1 成纖維細(xì)胞 猴 非洲綠猴腎 MEM, 10% 胎牛血清 COS1 成纖維細(xì)胞 猴 腎 MEM, 10% 胎牛血清 COS3 成纖維細(xì)胞 猴 腎 MEM, 10% 胎牛血清 COS7 成纖維細(xì)胞 猴 非洲綠猴腎 MEM, 10% 胎牛血清 Vero 成纖維細(xì)胞 猴 非洲綠猴腎 199培養(yǎng)基，5% 胎牛血清 B958 成淋樣 絨猴 EB病毒感染的白血病細(xì)胞 RPMI1640, 10% 胎牛血清 CRFK 上皮細(xì)胞 貓 腎 MEM, 10% 胎牛血清 和 NE