惰性載體對瘤胃真菌產(chǎn)酶活性的影響畢業(yè)論文-預(yù)覽頁
【正文】 高速離心機(jī)離心30 min，取上清液于10 mL離心管中，置入4℃的冰箱中冷藏備用，測定其中的羧甲基纖維素酶（Carboxymethyl cellulose, CMC）、微晶纖維素酶（Microcrystalline cellulose, MCC）、β葡萄糖苷酶（βglucosidase, BGL）、濾紙酶（filter paper enzyme, FPA）活性。對照組發(fā)酵液上清液經(jīng)煮沸滅活后作對照。W酶解反應(yīng)產(chǎn)生得葡萄糖量，從葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得，單位：g；T反應(yīng)時(shí)間，30 min；N酶液得稀釋倍數(shù)；50M葡萄糖分子量， g/mol；m樣品干物質(zhì)質(zhì)量，g。 β葡萄糖苷酶(BGL)活性測定取1 mL水楊素溶液于10 mL離心管中， mL pH=，50℃水浴預(yù)熱5 min， mL稀釋10倍的發(fā)酵液上清，50℃水浴加熱30 min，然后加入3 mL DNS溶液，100℃沸水浴5 min后，置于冷水中流水冷卻，于紫外可見光光度計(jì)中550 nm波長處讀取吸光值，對照組以經(jīng)煮沸滅活的發(fā)酵液上清作對照，最后參考葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算所測上清液釋放的葡萄糖大致含量。1 mg）， mL酶液后，50℃水浴加熱30 min，再加入3 mL DNS溶液。2 試驗(yàn)結(jié)果由表3可知，載體類型及載體與添加量互作對纖維素酶活影響顯著（P），沸石和膨潤土添加組的酶活均顯著高于珍珠巖添加組（P）。圖2 CMC酶活變化圖 CMC cellulase activities at different time points據(jù)圖2可知，沸石、膨潤土添加組對CMC酶活均顯著高于珍珠巖添加組（P）。圖3 FPA酶活變化圖 FPA cellulase activities at different time points據(jù)圖3可知，發(fā)酵時(shí)間對FPA酶活具有顯著影響（P），在發(fā)酵第8天時(shí)，濾紙酶酶活達(dá)到最高峰。圖4 BGL酶活變化圖 BGL cellulase activities at different time points據(jù)圖4可知，發(fā)酵時(shí)間對BGL酶活有顯著影響（P）。在發(fā)酵第4天時(shí)，沸石添加組的BGL酶活與膨潤土添加組、珍珠巖添加組的酶活均差異顯著（P）。我們將外源纖維素酶添加到豬、禽等單胃動(dòng)物的飼料中，可以通過改善胃腸道內(nèi)微生物生態(tài)環(huán)境，提高胃腸道的消化能力，刺激腸粘膜釋放纖維素消化酶，不僅可以有效的解決飼料中粗纖維消化率低的問題，還可以改善動(dòng)物產(chǎn)品的品質(zhì)。通過本試驗(yàn)探索出一條提高纖維素酶活的新方法，這樣就可以將菌糠等農(nóng)業(yè)廢棄物變廢為寶，以其作為固態(tài)發(fā)酵的底物大量生產(chǎn)在動(dòng)物飼料上運(yùn)用廣泛的纖維素酶，提高飼料消化率，改善動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)。本試驗(yàn)創(chuàng)新處在于利用廣義上的生物膜技術(shù)為瘤胃真菌提供較大的附著表面積，有利于提高對不良環(huán)境的適應(yīng)能力，不僅可以使菌體在培養(yǎng)基中分布更廣泛，而且產(chǎn)纖維素酶活較高。參考文獻(xiàn)：[1] 張海生,張同亮,[J].四川紡織技術(shù),2003,（6）:35.[2] 張俊飚,[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版),2012,（5）:1321.[3] Paredes C, Medina E, Moral R, et of the Different Organic Matter Fractions of Spent Mushroom Substrate [J]. Communications in Soil Science and Plant Analysis, 2009,40（16）:150161.[4] 陳君琛,沈恒勝,[J].,22（11）:410412.[5] [D].江蘇南京衛(wèi)崗,南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.[6] 王建,賈斌,[J].糧食與飼料工業(yè),2006,9:4244.[7] [J].飼料博覽,2002,（2）:48.[8] Lowe S E, Theodorou M K, Trinci A P J. Cellulases and xylanase of an anaerobic rumen fungus grown on wheat straw, wheat straw holocellulose,cellulose,and xylan[J]. Applied and Environmental Microbiology, 1987, 53(6):12161223.[9] Hossam [J].,1985,(6):2428.[10] 趙玉萍,[J].,27(3):116118.[11] 趙珊,劉杰,[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)(科技版).2014,(1):3133.[12] 雷威,蘇建明,[J].,(3):1213.[13] 田偉軍,[J].環(huán)境保護(hù)(工程與技術(shù)版).2003,（8）:1921
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