圓二色光譜在研究蛋白結(jié)構(gòu)中的應(yīng)用-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 金屬絡(luò)合物、聚合物化學(xué)等相關(guān)的科學(xué)研究。 關(guān)鍵詞：圓二色光譜；蛋白質(zhì)；構(gòu)象；由于光學(xué)活性分子對(duì)左、右圓偏振光的吸收不同, 使得左、右圓偏振光透過(guò)后變成橢圓偏振光, 這種現(xiàn)象就是圓二色性(circular Dichroism,簡(jiǎn)稱(chēng) CD)。本文綜述了圓二色產(chǎn)生原理及與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)關(guān)系并簡(jiǎn)單闡述了圓二色光譜在研究蛋白結(jié)構(gòu)中的應(yīng)用案例。圓二色光譜是一種差光譜, 是樣品在左右旋偏振光照射下的吸收光譜差值。目前，測(cè)定蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的方法還有X射線(xiàn)衍射，核磁共振技術(shù)及冷凍電子顯微技術(shù)[2]等。但是X射線(xiàn)衍射技術(shù)對(duì)于分析結(jié)構(gòu)復(fù)雜、柔性的生物大分子蛋白質(zhì)，適合的單晶培養(yǎng)限制了它的應(yīng)用。此外，圓二色對(duì)構(gòu)象變化敏感，它可靈敏地檢測(cè)一些反應(yīng)引起的構(gòu)象變化，特別適用于觀測(cè)蛋白質(zhì)的變性。蛋白質(zhì)一般有一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)、四級(jí)結(jié)構(gòu)幾個(gè)主要結(jié)構(gòu)層次, 有的還有結(jié)構(gòu)域或超二級(jí)結(jié)構(gòu)。根據(jù)電子躍遷能級(jí)能量的大小，蛋白質(zhì)的CD光譜分為三個(gè)波長(zhǎng)范圍[5] (1)250nm以下的遠(yuǎn)紫外光譜區(qū)，圓二色性主要由肽鍵的nπ*電子躍遷引起(酰胺鍵的吸收在190nm250nm)，這一波長(zhǎng)范圍的CD譜包含蛋白質(zhì)主鏈構(gòu)象的信息。遠(yuǎn)紫外區(qū)的圓二色光譜反映了蛋白質(zhì)或多肽的規(guī)則二級(jí)結(jié)構(gòu)中肽鍵排列的方向和能級(jí)躍遷情況, 通過(guò)對(duì)譜帶位置和吸收強(qiáng)弱的分析對(duì)比, 就能研究不同蛋白質(zhì)或多肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)。在蛋白質(zhì)或多肽的規(guī)則二級(jí)結(jié)構(gòu)中，肽鍵是高度有規(guī)律排列的，其排列的方向性決定了肽鍵能級(jí)躍遷的分裂情況。隨著光學(xué)技術(shù)發(fā)展及同步加速器輻射圓二色(SRCD)光譜技術(shù)的發(fā)展，遠(yuǎn)紫外測(cè)量光譜可以展寬到190nm以下的真空遠(yuǎn)紫外區(qū)。找出與實(shí)驗(yàn)曲線(xiàn)最接近的曲線(xiàn)計(jì)算出各構(gòu)象的含量。不同于溶液環(huán)境中的蛋白質(zhì)，膜蛋白鑲嵌于疏水的脂質(zhì)環(huán)境之中，因此，膜蛋白紫外CD光譜可能跟溶液狀態(tài)下的CD信號(hào)有所區(qū)別。近年來(lái)圓二色光譜因其操作簡(jiǎn)單，靈敏度高在研究低密度脂蛋白氧化方面引起科研工作者的廣泛關(guān)注。BSA溶液顯示出了BSA中225。（HRP）的熱伸展過(guò)程研究發(fā)現(xiàn)氰基取代后，酶中血紅素鐵的自旋狀態(tài)和配位狀態(tài)都與天然態(tài)完全不同，氰基取代水分子成為血紅素Fe(Ⅲ)的第六配體，這時(shí)血紅素周?chē)臍滏I也會(huì)遭受一定程度的破壞，從而使HRP的熱穩(wěn)定性急劇下降[16]。雖然紫外圓二色光譜預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)還存在著參考蛋白體系及計(jì)算算法有待進(jìn)一步完善之處，但隨著人們對(duì)蛋白質(zhì)CD理解的深入及CD光譜技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，其必將在蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域中發(fā)揮更加重要的作用。用一些事情，總會(huì)看清一些人。4. 歲月是無(wú)情的，假如你丟給它的是一片空白，它還給你的也是一片空白。學(xué)習(xí)參考
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