《氨基酸紙層析》ppt課件-預(yù)覽頁
【正文】 層析分離技術(shù)在 20世紀(jì)初就已得到應(yīng)用： ? 1903年用于植物色素的分離 ,各種色素以不同的速率流動后形成不同的色帶而被分開 ， 由此得名為 “ 色譜法 ” ? 1931年用氧化鋁柱分離了胡蘿卜素的兩種同分異構(gòu)體； ? 1944年出現(xiàn)了以濾紙作為支持物的紙層析； ? 20世紀(jì)六十年代末出現(xiàn)了高效液相色譜 (HPLC)。 ? 流動相 ：在層析過程中，推動固定相上待分離的物質(zhì)移動的液體、氣體等，都稱為流動相。 濾紙纖維上羥基具有親水性，因此吸附水作為 固定相 ，通常把有機(jī)溶劑作為 流動相 。 溶質(zhì)在 固定相 的濃度 (Cs) 分配系數(shù) α= 溶質(zhì)在 流動相 的濃度（ Cl) 2022/5/29 9 溶劑系統(tǒng)： 正丁醇：甲酸：水 =15： 3： 2 固定相 ： 水和濾紙纖維素有較強(qiáng)的親和力 ，因而其擴(kuò)散作用降低形成 固定相 。由于在同一實驗條件下，兩相體 積比是一常數(shù)，所以主要決定于分配系數(shù)。 其次 ， 溶劑系統(tǒng)選擇應(yīng)考慮被分離的物質(zhì)在溶劑系統(tǒng)中的Rf在 ～ 。 層 析必須在恒溫條件下進(jìn)行。 試劑： (1)氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：亮氨酸 、 脯氨酸 、 谷氨酸 、 組氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 。 四、實驗步驟： 2022/5/29 18 2022/5/29 19 點樣： 用毛細(xì)管點樣 ， 中間點混合氨基酸 ， 兩側(cè)點四種標(biāo)準(zhǔn)氨基酸；每個 ， 每點一次用晾干后再點下次 ， 點樣點的直徑應(yīng)控制在 2mm左點樣點重復(fù)點 5次 右 ， 點樣完畢用大頭針將濾紙做成 筒形 ， 點樣面向外 。 分析混合樣品中未知氨基酸的組分 。被分離物質(zhì)在兩相中都能溶解，但分配比率不同，展層時就會形成以不同速度向前移動的區(qū)帶。
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1