【正文】 A．單倍體育種技術(shù) B．誘變育種技術(shù) C．雜交育種技術(shù) D．細(xì)胞工程技術(shù) 34 、 動(dòng) 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 的 理 論 基 礎(chǔ) 是 （ A ） A．細(xì)胞分裂 B．細(xì)胞分化 C．細(xì)胞全能性 D．細(xì)胞癌變 35 、 單 克 隆 抗 體 的 制 備 過 程 中 引 入 骨 髓 瘤 細(xì) 胞 的 目 的 是 （ A ） A．能使雜交細(xì)胞大量增殖 B．產(chǎn)生特異性強(qiáng)的個(gè)體 C．是細(xì)胞融合容易進(jìn)行 D．是產(chǎn)生的抗體純度更高 36 、 下 列 關(guān) 于 動(dòng) 物 細(xì) 胞 培 養(yǎng) 的 敘 述 中 ， 不 正 確 的 是 （ C ） A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開來 B．通常將動(dòng)物組織細(xì)胞消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng) C．細(xì)胞的癌變通常發(fā)生在原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中 D．傳代培養(yǎng)的細(xì)胞在傳至 10~50 代左右時(shí)，部分細(xì)胞的核型可能發(fā)生變化 3 在下 列自然現(xiàn)象或科學(xué)研究成果中，能為“動(dòng)物細(xì)胞具有全能性”觀點(diǎn)提供直接證據(jù)的是 （ B ） A．壁虎斷尾后重新長(zhǎng)出尾部 B．蜜蜂的未受精卵細(xì)胞發(fā)育成雄蜂 C．用體外培養(yǎng)的皮膚治療燒傷病人 D．小鼠腺細(xì)胞的自我復(fù)制 3細(xì)胞株的特點(diǎn)是 （ C ） A．遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無(wú)限傳代 B．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無(wú)限傳代 C．遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無(wú)限傳代 D．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，有癌變特點(diǎn)，可以無(wú)限傳代 3 生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。（） 如果需要得到真核生物基因的完整序列，必須用基因組文庫(kù)方能達(dá)到。（ √ ） Northern 雜交是 DNARNA 之間的雜交。（ ） 1轉(zhuǎn)基因食品目前存在的最大問題是我們無(wú)法檢測(cè)某種食品到底是不是轉(zhuǎn)基因食品。（ ） 1 cDNA 是以 DNA 為起始材料，經(jīng)過復(fù)制得到的互補(bǔ) DNA。（ ） 2 生物技術(shù)是由多學(xué)科綜合而成的一門新學(xué)科。（ √ ） 2本世紀(jì)初，遺傳學(xué)的建立及其應(yīng)用，產(chǎn)生了遺傳育種學(xué)，并于 60 年代取得了輝煌的成就，被譽(yù)為“第一次綠色革命”。（ ） 3原核生物細(xì)胞是最理想的受體細(xì)胞。 （ ╳ ） 3酶的分類與命名的基礎(chǔ)是酶的專一性。 （ ╳ ） 4膜分離過程中，膜的作用是選 擇性地讓小于其孔徑的物質(zhì)顆粒成分或分子通過，而把大于其孔徑的顆粒截留。 （ ╳ ） 4酶法產(chǎn)生飴糖使用 α －淀粉酶和葡萄糖異構(gòu)酶協(xié)同作用。 （ √ ） 5固定化原生質(zhì)體由于細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)完整，可以保持細(xì)胞原有的生命活動(dòng)能力。 3. 基因工程的實(shí)施包括四個(gè)必要條件： 工具酶 、 基因 、 載體 和 受體細(xì)胞 。 8. 細(xì)胞工程包括 植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù) 、 細(xì)胞融合技術(shù) 、 細(xì)胞器移植技術(shù) 、克隆技術(shù) 、 干細(xì)胞技術(shù) 。 12. 重組 DNA 導(dǎo)入植物細(xì)胞常采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的 Ti 質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化法 、 電穿孔法 、微彈轟擊法 、 花粉管通道法 。 15. 根據(jù)分子中起催化作用的主要組分的不同，酶可以分為 蛋白酶 和 核酶 兩大類。 19. 酶工程包括 酶的固定化技術(shù) 、 細(xì)胞的固定化技術(shù) 、 酶的修飾改造技術(shù) 、 酶反應(yīng)器的設(shè)計(jì) 等技術(shù)。 23. 植物組織培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)素對(duì)細(xì)胞分裂素的比值（ 低 ）高 /低有利于促進(jìn)胚芽及胚根的誘導(dǎo)分化。 27. 溫度對(duì)發(fā)酵過程的影響主要體現(xiàn)在（ 影響酶促反應(yīng)速率 ） 、（ 改變菌體代謝物的合成方向 ）、（ 影響代謝調(diào)控機(jī)制 ）、（ 影響發(fā)酵液理化性質(zhì) ）等 4 個(gè)方面。 31. 植物細(xì)胞融合技術(shù)的主要過程主要包括（ 制備原生質(zhì)體 ）、（ 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 ）、（ 篩 選雜合細(xì)胞 ）三個(gè)步驟。 35. 植物組織培養(yǎng)主要包括預(yù)備階段、 (誘導(dǎo)去分化 )、（ 繼代增殖 ）、（ 生根發(fā)芽 ）、（ 移栽成活 ）等環(huán)節(jié)。 39. 微生物產(chǎn)酶過程中，提高酶產(chǎn)量可以通過（ 添加誘導(dǎo)物 ）、（ 控制阻遏物濃度 ）、（ 表面活性劑 ）、（ 添加產(chǎn)酶促進(jìn)劑 ）等措施實(shí)現(xiàn)。 （ 3）具有若干限制酶切單一識(shí)別位點(diǎn)。 轉(zhuǎn)基因食品的優(yōu)點(diǎn)： （ 1）可延長(zhǎng)蔬菜的貨架期及感官特性。 （ 5）增加農(nóng)作物抗逆能力，增加農(nóng)業(yè)產(chǎn)量。 目的基因克隆的基本方法有哪些？ （ 1）直接從染色體 DNA 中分離：僅適用于原核生物、葉綠體和線粒體基因的分離，較少采用。這一方法通?？傻玫娇杀磉_(dá)的完整基因。 （ 2）基因組文庫(kù)克隆的是全部遺傳信息，不受時(shí)空影響； cDNA 文庫(kù)克隆的是不完全的編碼 DNA 序列，因它受發(fā)育和調(diào)控因子的影響。 重組 DNA 導(dǎo)入受體細(xì)胞方法 （ 1）化合物誘導(dǎo)法 （ 2）電穿孔法 （ 3）農(nóng)桿菌介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)化法 （葉盤法） （ 4）微彈轟擊法 （ 5）超聲波處理法 （ 6）脂質(zhì)體介導(dǎo)法 （ 7）體內(nèi)注射轉(zhuǎn)化法 （ 8）精子介導(dǎo)法 1簡(jiǎn)述現(xiàn)代生物技術(shù)在人類生產(chǎn)生活中的作用 （ 1）改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、解決食品短缺 ①提高農(nóng)作物產(chǎn)量及其品質(zhì)（培育抗逆的作物優(yōu)良品系、植物種苗的工廠化生產(chǎn) 、提高糧食品質(zhì)、生物固氮 ，減少化肥使用量 、生物農(nóng)藥，生產(chǎn)綠色食品 ） ② 發(fā)展畜牧業(yè)生產(chǎn)（動(dòng)物的大量快速無(wú)性繁殖 、培育動(dòng)物的優(yōu)良品系 ） （ 2）食品生產(chǎn)、食品加工、食品檢測(cè) （ 3）提高生命質(zhì)量、延長(zhǎng)人類壽命（開發(fā)制造奇特而又貴重的新型藥品 、疾病的預(yù)防和診斷、基因治療 ） （ 4）解決能源危機(jī)、治理環(huán)境污染（解決能源危機(jī) 、環(huán)境保護(hù) ） （ 5）制造工業(yè)原料、生產(chǎn)貴重金屬 （制造工業(yè)原料 、生產(chǎn)貴重金屬 ） 1科學(xué)家將分離得到的成熟的胡蘿卜根的韌皮部細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育成了完整的新植株。 (2)發(fā)酵中產(chǎn)生的泡沫少，易于控制培養(yǎng)條件，酶活性高，發(fā)酵周期短。 1什么是產(chǎn)物促進(jìn)劑？產(chǎn)物促進(jìn)劑舉例？ 是指那些非細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑。 1為什么屬于滯后合成型的酶要在 細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間甚至進(jìn)入平衡期以后才開始合成？ 答：屬于滯后合成型的酶，之所以要在細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間甚至進(jìn)入平衡期后才開始合成，主要有兩個(gè)原因：一是由于酶的生物合成受到培養(yǎng)基中阻遏作用，只有隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)，阻遏物幾乎被細(xì)胞用完而解除阻遏以后，酶才開始大量合成；二是由于該類型酶對(duì)所對(duì)應(yīng)的 mRNA 穩(wěn)定性好，可以在細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后的相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)，繼續(xù)進(jìn)行酶的生物合成。對(duì)于蛋白類酶，首先根據(jù)欲獲得的酶蛋白的氨基酸排列次序，對(duì)照遺傳 密碼，確定其對(duì)應(yīng)的 mRAN 上的核苷酸序列，再依據(jù)堿基互補(bǔ)原則，確定突變基因上的堿基序列，并確定需要置換的堿基及其位置。 1 何謂固定化酶？固定化酶的特性與游離酶的比較有哪些改變？ 答：固定化酶是指固定在一定載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進(jìn)行催化反應(yīng)的酶。酶經(jīng)過固定化后，其作用的最適pH 往往會(huì)發(fā)生一些變化。 1 選擇酶反應(yīng)器的主要依據(jù)有哪些？ 答：酶反應(yīng)器的選擇是在了解酶反應(yīng)器的各種類型和特點(diǎn)的基礎(chǔ)上，主要依據(jù)酶的應(yīng)個(gè)形式、酶的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)性質(zhì)、底物和產(chǎn)物的理化性質(zhì)等幾個(gè)方面進(jìn)行。 （ 2）依據(jù)酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)性質(zhì)選擇反應(yīng)器：在考慮酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)性質(zhì)對(duì)反應(yīng)器選擇的影響方面，主要因素有酶與底物的混合程度、底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響、反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)酶的反饋抑制作用以及酶催化作用的溫度條件等。 （ 70℃ 75℃）：在 Taq DNA 聚合酶（在 72℃左右最佳的活性）的作用下，以 dNTP 為原料，從 引物的 5′端→ 3′端延伸，合成與模板互補(bǔ)的 DNA 鏈。 （ 2） pH 的改變往往引起某些酶的激活或抑制，使菌體代謝途徑發(fā)生改變，代謝產(chǎn)物發(fā)生變化。 24. 淋巴細(xì)胞雜交瘤產(chǎn)生單克隆抗體的原理及技術(shù)流程是什么？ 單克隆抗體技術(shù)的基本原理 要制備單克隆抗體需先獲得能合成專一性抗體的單克隆 B 淋巴細(xì)胞，但這種 B 淋巴細(xì)胞不能在體外生長(zhǎng)。 25. 以 pBR322 說明基因工程 中載體的基本要求及 pBR322 的優(yōu)缺點(diǎn)。 （ 4）分子量小，拷貝數(shù)多。（ 5 分） （ 1）誘導(dǎo)雄性不育系（轉(zhuǎn)基因及反義 RNA） ；（ 2）利用轉(zhuǎn)基因培育抗逆性作物品種；（ 3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗除草劑作物（ 4）培養(yǎng)抗病蟲作物；（ 5）培育抗重金屬作物（ 6）培育抗病毒作物（轉(zhuǎn)基因） 27. 目前人工種子的制備過程中的主要技術(shù)難題及相應(yīng)措施主要有哪些？（ 5 分） （ 1）胚狀體的同步生長(zhǎng)，應(yīng)對(duì)措施主要有：低溫法，抑制劑法，分離法，通氣法，滲透壓法；（ 2）人工胚乳的制備：目前主要的人工胚乳主要有 MS 培養(yǎng)基、 SH 培養(yǎng)基加激素等其它組分。 1 “多莉”羊克隆的技術(shù)流程及這一科學(xué)事件的意義是什么？ 1 微生物發(fā)酵產(chǎn)酶是目前酶生產(chǎn)的重要途徑，發(fā)酵產(chǎn)酶中下游加工的主要工藝流程以及注意事項(xiàng)是什么？ 1 液體深層發(fā)酵的主要操作方式及相關(guān)的優(yōu)缺點(diǎn)分別是什么？