【正文】 （1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，經(jīng)過機(jī)械消化或胰酶消化，使其分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生存、生長(zhǎng)和繁殖。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：（1）培養(yǎng)條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常需加入血清(能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附)、血漿等天然成分。（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。C）、較高的相對(duì)濕度（95%）、穩(wěn)定的CO2水平（5%），來對(duì)細(xì)胞或組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。（4）離體動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)特性：① 細(xì)胞貼壁：懸浮液中分散的細(xì)胞緊貼培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壁才能生長(zhǎng)。細(xì)胞系、細(xì)胞株： 條件適合時(shí)，可以由傳代細(xì)胞建成細(xì)胞系或細(xì)胞株。（2）細(xì)胞株：通過一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系。（細(xì)胞克?。海?）概念： 把一個(gè)單細(xì)胞從群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體的技術(shù)，叫克隆培養(yǎng)法或細(xì)胞克隆。（2）誘導(dǎo)融合的方法：1）生物法：滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)融合，是動(dòng)物細(xì)胞融合所特有的 2）化學(xué)法：聚乙二醇誘導(dǎo)融合 3）物理法：電融合技術(shù)：效率很高（3）細(xì)胞雜交：基因型不同的細(xì)胞間的融合稱為細(xì)胞雜交。比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動(dòng)，聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外，再加滅活的病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備：（1）雜交瘤技術(shù)：將抗體生成細(xì)胞同瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交的技術(shù)。② 雜交瘤技術(shù)制備單抗體的基本方法：1） 用外界抗原刺激動(dòng)物（如小鼠），使其發(fā)生免疫反應(yīng)，使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體；2） 利用仙臺(tái)病毒或聚乙二醇等作介導(dǎo)，使經(jīng)免疫的動(dòng)物的脾細(xì)胞與可以無限傳代的骨髓瘤細(xì)胞融合；3） 經(jīng)過篩選、克隆培養(yǎng)，獲得來自單一細(xì)胞的既能產(chǎn)生特異抗體、又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞克隆。特異性強(qiáng)，靈敏度高。② 隨著胚胎發(fā)育的繼續(xù)，有的細(xì)胞只具有分化出各種組織細(xì)胞的潛能，這樣的細(xì)胞叫多能干細(xì)胞。無論分化還是癌變，變化的都是表現(xiàn)型，基因組成的完整性可以保留。（2）哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植（比較容易）和體細(xì)胞核移植（比較難）。（7）體細(xì)胞克隆羊成功的分子細(xì)胞生物學(xué)機(jī)理有哪些？ 答：1）重組卵細(xì)胞最初分裂時(shí)雖然復(fù)制了DNA，但轉(zhuǎn)錄并未開始2）重組卵細(xì)胞的供體核DNA丟失了來源于乳腺細(xì)胞的阻止核基因表達(dá)的調(diào)節(jié)蛋白。（9）體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：克隆動(dòng)物存在著健康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。 如：誘導(dǎo)重組細(xì)胞生長(zhǎng)、分化的實(shí)驗(yàn)條件和懷胎母體的子宮環(huán)境練習(xí)：（1）用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞 （ ） A、容易產(chǎn)生各種變異 B、具有更強(qiáng)的全能性C、取材十分方便 　　 D、分裂增殖的能力強(qiáng)（2）下列為有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，其中不正確的是（ ）A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織B．將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C．在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞全部衰老死亡 （3）用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是（ ）A．都需用CO2培養(yǎng)箱 B．都須用液體培養(yǎng)基 C．都要在無菌條件下進(jìn)行 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性（4）動(dòng)物細(xì)胞克隆是指（ ） A．一個(gè)單細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)新的細(xì)胞群的技術(shù) B．一個(gè)重組細(xì)胞經(jīng)分裂、分化發(fā)育成一個(gè)動(dòng)物個(gè)體的技術(shù) C．幾個(gè)同種動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)新的細(xì)胞群的技術(shù) D．一個(gè)卵裂球經(jīng)胚胎分割發(fā)育成四個(gè)細(xì)胞群的技術(shù)（5）某研究小組為測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。3)b過程細(xì)胞分裂的方式是__________，此過程是否進(jìn)行細(xì)胞分化？__________（答“有”或“無”）4)圖中c所指過程為__________ ，圖中d指的是克隆綿羊“多莉”經(jīng)過在母體子宮內(nèi)__________后__________。個(gè)體通過無性繁殖可連續(xù)傳代并形成群體，這樣的群體稱無性繁殖系。從理論上講，細(xì)胞（主要是包含遺傳物質(zhì)的細(xì)胞核）具有的發(fā)育全能性是生物克隆的基本條件。原生質(zhì)體培養(yǎng)成功后，植物細(xì)胞工程技術(shù)得以發(fā)展，即在原生質(zhì)體培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，由原生質(zhì)體融合（體細(xì)胞雜交）和轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合的技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞工程的主要技術(shù)手段是細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合，通過其發(fā)展起來的單克隆抗體技術(shù)帶來了細(xì)胞免疫學(xué)中的一次革命。（2）場(chǎng)所：輸卵管（3）過程：（4）結(jié)果：形成受精卵（5）相關(guān)問題：① 為什么只有同種動(dòng)物精卵才能結(jié)合？答：同種動(dòng)物精子、卵細(xì)胞表面有特異性相互識(shí)別的蛋白，這是同種動(dòng)物精卵才能結(jié)合的原因之一。當(dāng)卵裂球含2—8個(gè)細(xì)胞時(shí)，每個(gè)細(xì)胞都具有全能性，均可以發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體。2）聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞：稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，即胚胎干細(xì)胞，是一種未分化的細(xì)胞，具有發(fā)育全能性，將來發(fā)育成胎兒的各種組織。 ⑤ 器官的形成：總結(jié)：1）受精卵是新生命的第一個(gè)細(xì)胞，全能性最高。 胚胎工程的研究對(duì)象主要限定于高等脊椎動(dòng)物，特別是哺乳動(dòng)物。② 精子的采集和獲能：在體外受精前，要將成熟的精子放入培養(yǎng)液中培養(yǎng)，對(duì)精子進(jìn)行獲能處理。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí)，可進(jìn)行植入或著床。良種雌性動(dòng)物受體：接受胚胎的個(gè)體。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查。動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。③ 供體和受體會(huì)不會(huì)發(fā)生排斥？同種動(dòng)物的受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。? ②進(jìn)行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同?？沙杀对黾优咛?shù)量，可以快速繁殖良種畜。為什么要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割?內(nèi)細(xì)胞團(tuán)一般到囊胚階段才出現(xiàn)，它是發(fā)育為胚胎本身的基礎(chǔ)細(xì)胞，其他細(xì)胞為滋養(yǎng)細(xì)胞，只為胚胎和胎兒發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)。對(duì)它可以進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行遺傳改造。（4）胚胎干細(xì)胞核移植： ① 概念：將胚胎干細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，經(jīng)過胚激活、胚胎培養(yǎng)、胚胎移植后直接由受體完成克隆動(dòng)物的技術(shù)。其研究對(duì)象主要限定于高等脊椎動(dòng)物，特別是哺乳動(dòng)物。受精后受精卵開始卵裂產(chǎn)生卵裂球，之后細(xì)胞繼續(xù)分裂成為中空的囊泡或胚泡，囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)不斷增值分化，逐漸分為三胚層：內(nèi)胚層、中胚層和外胚層。目前由于無法進(jìn)行全體外胚胎培養(yǎng)，胚胎移植稱為胚胎工程中獲得后代的唯一方法。胚胎干細(xì)胞是才早期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離出來的尚未分化的胚胎細(xì)胞，具有很強(qiáng)的分化能力。生態(tài)工程主要類型：（1）物質(zhì)循環(huán)利用的生態(tài)工程 城市：生活垃圾進(jìn)行減量化、無害化、資源化處理，將生活垃圾中有機(jī)部分、人畜的糞便等轉(zhuǎn)化為優(yōu)質(zhì)生態(tài)復(fù)合肥。農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的意義：有效地促進(jìn)了物質(zhì)循環(huán)、能量流動(dòng)、信息流動(dòng)的暢通，人與環(huán)境和諧相處，經(jīng)濟(jì)、生態(tài)環(huán)境和社會(huì)效益的同步發(fā)展，是實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化過程中保證農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的一種生產(chǎn)方式。我國(guó)農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的主要技術(shù)：（1）物質(zhì)的良性循環(huán)技術(shù)（2）潔凈可再生的新能源開發(fā)技術(shù)（3）種植業(yè)和畜牧業(yè)合理優(yōu)化技術(shù)（4）此外設(shè)計(jì)高效可行的間種、套種和輪種制度；設(shè)計(jì)多種立體養(yǎng)殖技術(shù)；發(fā)展生物防治技術(shù)等。用一些事情，總會(huì)看清一些人。4. 歲月是無情的，假如你丟給它的是一片空白，它還給你的也是一片空白。學(xué)習(xí)參考