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[自然科學]干擾素的生產(chǎn)與行-預覽頁

2025-02-12 10:23 上一頁面

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【正文】 的流感病毒作用于小雞細胞,結果發(fā)現(xiàn)這些細胞產(chǎn)生了一種可溶性物質(zhì),這種物質(zhì)能抑制流感病毒,并且能干擾其它病毒的繁殖,因此,他們將這種物質(zhì)稱為 “ 干擾素 ” 。 ◆ II 型干擾素:干擾素 γ( IFN?) 來源:活化的 T細胞和 NK細胞產(chǎn)生 功能:免疫調(diào)節(jié) 提高單核巨噬細胞、樹突狀細胞的抗原提呈能力 增強 Tc細胞和 NK細胞的殺傷活性 抑制 TH2細胞形成,下調(diào)體液免疫應答 趨化作用 抗病毒和抗腫瘤作用(次要) 2. 根據(jù)動物來源確定分類 人干擾素( HuIFN),小鼠干擾素( MuIFN)。抗病毒蛋白主要包括 2′5′A合成酶和蛋白激酶等。對多數(shù)病毒均有一定抑制作用。 ? 不同來源的干擾素 重組干擾素的臨床應用 ? 廣譜抗病毒活性( rhuIFNα) 慢性乙型、丙型、丁型肝炎;皰疹、病毒性角膜炎。 ? 優(yōu)點:首次實現(xiàn)大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)。 ? 測序:編碼人 IFNα 2b基因序列 ,501bp, 165aa。 ? 培養(yǎng): 30℃ , 。 ? 控制:級聯(lián)調(diào)節(jié)通氣量和攪拌轉速。 , 5℃ 冷卻水快速降溫至 15℃ 以下。 干擾素的分離純化工藝過程 、干擾素分離工藝過程 、干擾素的純化工藝過程 干擾素 α2b分離工藝過程 ? 菌體裂解 ? 預處理 ? 初級分離 (1)菌體裂解 ? 裂解緩沖液:純化水配制, 2℃ ~ 10℃ ( ) ? 使用保護劑: EDTA, PMSF。 (3)離心 ? 連續(xù)流離心機: 2℃ ~ 10℃ , 16000 r/min ? 收集上清液:含有重組干擾素蛋白質(zhì) ? 雜質(zhì)沉淀: 121℃ 、 30min 蒸汽滅菌 ,焚燒處理。冷卻至 2℃ ~ 10℃ 。 ? 疏水層析:干擾素吸附在疏水層析柱中 除非疏水性蛋白 洗脫與收集: ( ) ? 等電點沉淀( 2):磷酸調(diào)節(jié) ,調(diào)節(jié)電導值 40 ms/cm, 2℃ ~ 10℃ ,靜置過夜 ? 超濾: 1000 ku超濾膜過濾,除去大蛋白。 ? 濃縮:調(diào)整溶液和電導, 10 ku超濾膜, 緩沖液( )中透析。 ? 濃縮: 10 ku超濾膜進行。 一種新藥從研發(fā)到投放市場,投入大約為 30億 ~60億美元。 ( 4)企業(yè)管理相對滯后,技術兼經(jīng)營型人才匱乏。 重組 α 干擾素%人自然干擾素%產(chǎn)量及其增長分析 2022年 2022年我國干擾素產(chǎn)量統(tǒng)計 單位:千克 近幾年我國干擾素市場一直處于供不應求的局面。
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