《病毒的傳分析》ppt課件-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 溫度敏感 ” 突變 (temperature sensitive mutation) （ 2） “ 抑制因子敏感 ” 突變 (suppressorsensitive mutation, sus) （ 1） “ 溫度敏感 ” 突變 (temperature sensitive mutation)： 野生型噬茵體能在很大的溫度范圍內(nèi)感染宿主并進(jìn)行 繁殖。帶有 sus突變的噬菌體在感染一種帶有 抑制基因(suppressor, su＋ )(許可條件 )的宿主菌時(shí)能產(chǎn)生子代，但在感染另一種沒(méi)有抑制基因 (su－ )(限制條件 )的宿主菌時(shí)，不能產(chǎn)生子代?！?su3＋ ’菌株的 tRNATry含有反密碼子 CUA，它識(shí)讀琥珀型密碼子 UAG，并插入酪氨酸而防止終止。 Opaque lawn of bacteria Clear areas of plaque 2. 噬菌體濃度的測(cè)定方法 （ 1）逐步稀釋原溶菌液（ 10 10 10 107） （ 2）感染平板培養(yǎng)基上的細(xì)菌菌苔（ lawn） （ 3）計(jì)數(shù)形成的噬菌斑 （ 4）計(jì)算原溶菌液中的噬菌體數(shù)目。 （ 3） Hershey使用兩個(gè)表型特征 能在 B和 B/2混合菌苔上產(chǎn)生透明斑。 r+： 噬菌斑與基因型 B和 B/2混合菌苔 （ 4）、噬菌體雜交 ① . 親本噬菌體（ T2）基因型 hr+：透明，小斑，邊緣模糊 h+r：半透明，大斑，邊緣清楚， ② 雜交過(guò)程 —— 混合感染實(shí)驗(yàn) 兩個(gè)親本噬菌體 混合感染 B和 B/2，觀(guān)察菌苔上出現(xiàn)的噬菌斑特征。 （ h+r+ + hr） total plaques 100% Hershey和 Rotman1949年的 T2雜交結(jié)果 基因型 噬菌斑 百分率 hr+ 42 76% h+r 34 h+r+ 12 24% hr 12 r h 24 （ 8）、 T2噬菌體的遺傳圖 ① Hershey的迷惑 a. Hershey后來(lái)分離出多種突變的 T2 噬菌體： r r r13 用 hr的不同突變體雜交，計(jì)算 h與不同 r之間的重組值并繪制遺傳圖。 因此噬菌體雜交時(shí)，應(yīng)該注意： ①控制每種親代噬菌體基因型的投放量： ②控制允許發(fā)生復(fù)制和重組的時(shí)間。 2 互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)及結(jié)果 P124 表 54 ?X174突變的互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)結(jié)果 順?lè)醋? 突 變 型 A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28, B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8,och11, C och6 D am10,amH81, E am3,am6,am27, F am87,am88,am89, amH57,op6, op9,tsh6,ts41D G am9,am32,ts,ts79 H amN1,am23,am80,am90,ts4 二 T4突變型的互補(bǔ)試驗(yàn) 第四節(jié) ?噬菌體基因組與原噬菌體 一 ?噬菌體的基因組： 由 49000bp構(gòu)成 1 基因分類(lèi) 頭部基因： 7個(gè)（必需基因：相鄰） 尾部基因： 11個(gè)（必需基因：相鄰） 噬菌斑形成必需的基因 復(fù)制所需基因： O、 P 裂解、釋放所需基因： S、 R 基因 正調(diào)控基因： N、 Q 附著區(qū)： att； 專(zhuān)一性重組所必需： int、 xis 噬菌斑形成非必需的基因 溶源化所需： CI、 CII、 CIII 重組所必需： exo、 red P133 圖 56 ? Λ噬菌體的包裝過(guò)程 ? Λ噬菌體的基因組 2 ?噬菌體基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) : 二 ?原噬菌體與合子誘導(dǎo) 1 ?原噬菌體 ： 2 合子誘導(dǎo)： Hfr(λ )X F→ 受體菌裂解 (λ 進(jìn)入 F后 ) b+ 原點(diǎn) λ d+ c+ a+ 3 合子誘導(dǎo)與整合部位的確定 ? Jacob和 Wollman（ 1956年）發(fā)現(xiàn)了合子誘導(dǎo)（ zygotic induction）現(xiàn)象，并利用合子誘導(dǎo)確定了幾個(gè) 。 第四節(jié) ?噬菌體基因組與原噬菌體 λ噬菌體整個(gè)基因組如圖所示，可分為三個(gè)部分， ①左臂：從 A到 J長(zhǎng)約 20kb，其中的基因編碼構(gòu)成頭部、尾部、尾絲對(duì)組裝完整噬菌體所需要的蛋白質(zhì)。 三 原噬菌體的插入與切除 1 原噬菌體的插入與正常切除 P135 圖 57 2 原噬菌體的異常切除 P135 圖 58 （ 1） 轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體：指帶有細(xì)菌基因的噬菌體。 線(xiàn)狀 T4 DNA的環(huán)狀遺傳圖 通過(guò)核酸外切酶 III消化后發(fā)生的環(huán)化反應(yīng)來(lái)證明基因組中存在末端重復(fù)的示意圖 環(huán)狀排列 證明基因組群體中環(huán)狀排列順序的示意圖 T2 DNA 環(huán)狀排列和末端重復(fù)是如何形成的？ 復(fù)制 重組 串聯(lián)復(fù)制＋不定點(diǎn)、定長(zhǎng)切割 切割
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