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川麥42不同逆境生長情況研究開題報告-預覽頁

2025-06-29 08:43 上一頁面

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【正文】 系列的變化,以此來適應各種逆境生理生化 的變化可以反映其受環(huán)境脅迫的狀態(tài)和程度 [35]。因此 使用 單一 脅迫處理來評價小麥的抗逆性具有一定的局 限性,且各項指標存 在著一定的相關性,因此需要檢測小麥的抗逆性需要 評價其多個脅迫下 各項指標參數。小麥穎片上有芒刺,是區(qū)別小麥品種的特點之一。因此小麥又稱為穎花植物。植物在自然界受 到的脅迫并不只有一種, 不同脅迫導致 小麥生理生化指標 的變化也不相同。為了對川麥 42 的抗逆性做出鑒定,對小麥在不同的逆境(干旱、低溫、鹽漬)生理生化指標進行測定。 干旱作為一種自然災害嚴重影響著農業(yè)生產,對植物造成多種傷害,包括損傷膜系統(tǒng)及細胞器,破壞正常的物質代謝,改變酶活性,使呼吸作用增強,光合作用增強等 [6,7]。 ROS 的清除對于維持植物正常的功能具有重要意義。 氯化鈉脅迫下小麥減 產的主要原因是出苗難,植株生長變緩,最終影響產量 [9,10]。 小麥經過低溫脅迫后會發(fā)生一系列的變化,其中一些指標,如超氧化物歧化酶的活性及丙二醛的含量可以作為小麥抗凍性的生理生化指標 [14]。丙二醛( MDA) 是細胞膜脂過氧化作用 的產物之一,丙二醛的產生數量多少能代表細胞膜脂過氧化的程度,可以間接反映植物組織抗氧化能力的大小。 1 ℃ 、 12 h / 12h 光 /暗周期、中等光強(光流密度 100 μmol m2 s1) 的恒 溫室中 培養(yǎng), 待長直三葉期,選取長勢相似小麥幼苗進行不同的脅迫處理(鹽脅迫、干旱脅、低溫脅迫) 24 h 和 72 h,對脅迫前后小麥中 超氧化物歧化酶( SOD)、過氧化物酶體( POD)、過氧化氫酶( CAT) 、可溶性蛋白、脯氨酸、可溶性糖、丙二醛、葉綠素含量進行測定,通過對實驗數據的分析從而對小麥抗旱性、抗旱性及耐鹽性做出評價,并對小麥的抗逆性研究提供依據。取上述提取液 1 mL稀釋至 10 mL,搖勻。 酶活力測定 : 用 NBT光還原法 [15]。溫度高時,時間縮短;溫度低時,時間延長,然后立即遮光停止反應。 SOD總活性 [U/g]=SCKTEWVA )A( CK ? SOD比活性 [U/mg]=蛋白質含量 總活性SOD 過氧化物酶體( POD)的測定 酶液制備 稱取新鮮小麥葉片 g,剪碎,放入預冷的研缽中,加入適量預冷的磷酸緩沖液冰浴研磨成勻漿。 (如酶活性過高可稀釋之 )。 CAT 活性的測定 :采用紫外分光光度法 [15] 取 10 mL 具塞試管,加 2 mL 酶提取液于沸水浴中加熱煮致失活,冷卻備用 。 蛋白質含量的測定:采用考馬斯亮藍 G250 法測定 [16] 標準曲線的制作 取 6支試管,編號,按下表加入試劑。 樣品中蛋白質含量的測定 另取 2根試管,分別準確加入 mL樣品提取液, mL蒸餾水和 5 mL考馬斯亮藍 G250試劑 ,其余操作與 標準曲線繪制相同,測其吸光值。 脯氨酸標準曲線的制作及樣品的測定:采用茚三酮比色法 [15] 脯氨酸標準曲線的制作及樣品的測定 : 取 7個 25 mL容量瓶編號 1~ 7,分別加入 0 mL、 0. 5 mL、 mL、 mL、 mL、 mL和 mL脯氨酸標準溶液水定容到 25 mL。 標準曲線的制作 取 20 mL刻度試管 6支,從 05分別編號,按下表加入標葡萄糖溶液,然后按順序向試管內加人試劑,充分振蕩,立即將試管放人沸水浴中,逐管準確保溫 l min,取出后自然冷卻至室溫,以空白作對照,在 625 nm波長下測其光密度,以光密度為縱坐標,以糖含量為橫坐標,繪制標準曲線,并求出標準線性方程。 顯色及測定 :采用 TBA比色法 [17] 吸取 2 mL提取液,加入 2 % TBA液,混勻,在試管上加蓋塞,置于沸水浴中沸煮 1015 min(不得超過此時間)迅速冷卻,離心。 第三階段: 20xx年 5月,準備實驗材料,做預實驗,根據預實驗進一步修改實驗方案。 指導教師簽名: 年 月 日 開題小組意見 負責人及成員簽名: 答辯時間: 年 月 日 注: 1. 選題類型:基礎型、應用型、應用基礎型、調研型; 2. 課題來源:國家級項目、省部級項目、橫向合作項目、校級項目、自選項目;
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