【正文】 為分子量 10000以下的多糖。 抗血栓形成作用 由于血栓形成于血管內(nèi)皮細(xì)胞（簡(jiǎn)稱 VEC）損傷密切相關(guān)，因此為了進(jìn)一步探討麥冬保護(hù) VEC的分子機(jī)制，做如下實(shí)驗(yàn)， 取人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUVEC) ,用內(nèi)毒素造成凋亡細(xì)胞模型 ,研究麥冬藥物血清抗其凋亡的保護(hù)作用 ,結(jié)果發(fā)現(xiàn)， 麥冬煎劑以人臨床用量 動(dòng)物等效劑量比值 血清稀釋度為參考濃度制備的含藥血清 可明顯保護(hù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 ( HUVEC)，減少內(nèi)毒素對(duì)其的損傷，而且以麥冬藥物作用血清后，HUVEC活細(xì)胞明顯增多，死亡細(xì)胞與凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯減少，并降低其 MDA水平并增加SOD含量。 免疫活性 多糖作為一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑 (BRMS),對(duì)免疫系統(tǒng)有重要的調(diào)節(jié)作用 ,主要表現(xiàn)為免疫增強(qiáng)和刺激作用。 此研究顯示山麥冬多糖作為一種低毒多效的免疫增強(qiáng)劑 ,在臨床上應(yīng)有一定的應(yīng)用價(jià)值。 綜上所述，麥冬中的多糖成分具有多種生物活性，具有很高的應(yīng)用價(jià)值。隨著對(duì)麥冬及其主要有效成分多糖的深入研究，麥冬不僅在中醫(yī)治療，而且在細(xì)胞分子水平中應(yīng)用前景更加光明。 主要儀器與試劑 ： 眼科剪、鑷子、低溫冰箱、 移液器及吸頭 、電子天平、手套、5ml 及 10ml 離心管、 1ml 注射器、灌胃針、標(biāo)記筆、 Tips 等。C 烘干至恒重。脫蛋白 利用三氯甲烷 和正丁醇 5:1混合液， 用量為濃縮液的 1/5 混合于 300ml 三角燒瓶中于雙層搖瓶機(jī)在 240r/min 的轉(zhuǎn)速下?lián)u轉(zhuǎn) 2030min,轉(zhuǎn)入 500ml 分液漏斗中靜置 2 小時(shí)，去掉下層沉淀和有機(jī)液，保留上層澄清液。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 7 糖尿病小鼠模型的建立 ： 取用小鼠 80 只 , 雌雄各 40 只，總共為 10 組，每組 8 只， 1～ 5 組為雄鼠， 6～10 組為雌鼠。 3 天后，將小白鼠禁食 12 小時(shí)后尾部尾端采血，使用血糖 試紙 及 測(cè)試儀測(cè)定小鼠血糖，并測(cè)定體重。試驗(yàn)期 14天，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組空腹 12 h, 然后小 鼠取血，使用血糖 試紙 及 測(cè)試儀測(cè)定小鼠血糖。 x ? s。 表 31四氧嘧啶制備小鼠糖尿病不同給藥方式比較 造模前 造模后（ 3天后） 注射次數(shù) 一次 二次 鼠數(shù) 40 40 平均血糖值 （ x ? s） ? ? 鼠數(shù) 26 37 平均血糖值 （ x ? s） ? ? 從表中可以分析出，一次注射與分二次劑量注射在小鼠 造模成功數(shù)量上比較 差異有顯著性，說明分二次劑量注射 四氧嘧啶比一次注射造模成功率更高，而 一次注射與分二次劑量注射在致小鼠死亡 數(shù)量上比較 差異不顯著，說明分二次劑量注射在在降低小鼠死亡率上僅有這個(gè)趨勢(shì)。 表 32四氧嘧啶對(duì)糖尿病小鼠性別的影響 造模前 造模后（ 3天后） 性別 雄鼠 雌鼠 鼠數(shù) 40 40 平均血糖值 （ x ? s） ? ? 鼠數(shù) 32 32 平均血糖值 （ x ? s） ? ? 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 9 在造模成功數(shù)量上，雌雄鼠數(shù)目相等；從成功率上分析，雌鼠的成功率高于雄鼠；但在死亡率上雌鼠的死亡率高于雄鼠。 模型組 ～ 8 177。 177。 177。﹡﹡ 注：與模型組比較， * P ** P 從表 33 中可見：與模型組比較，用優(yōu)降糖處理糖尿病小鼠在試驗(yàn) 17d 能夠極顯著地降低小鼠的血糖濃度；從試驗(yàn) 17d 血糖值的測(cè)定，麥冬多糖 200mg/㎏ 對(duì)小鼠血糖濃度 也有顯著地降低；用麥冬多糖 400mg/kg 處理的糖尿病小鼠在試驗(yàn) 17d 也能夠極顯著地降低小鼠的血糖濃度； 綜上所述：麥冬多糖及優(yōu)降糖在試驗(yàn) 17d對(duì)糖尿病小鼠血糖濃度有顯著地降低作用。 綜合上述，在試驗(yàn) 3d～ 17d，麥冬多糖能夠明顯的減緩對(duì)小鼠體重的降低。其作用機(jī)制是 通過產(chǎn)生超氧自由基選擇性地破壞胰島 B 細(xì)胞 ,使細(xì)胞內(nèi) DNA 損傷 ,同時(shí)激活多聚 ADP 核糖體合成酶的活性 ,從而使輔酶 Ⅰ 含量下降 ,兩者共同作用 導(dǎo)致 mRNA 功能受損 ,引起細(xì)胞死亡，導(dǎo)致血中胰島素濃度下降及高血糖產(chǎn)生，形成胰島素依賴性糖尿病 [12]。本實(shí)驗(yàn)僅對(duì)不同注射方式和劑量四氧嘧啶對(duì)小鼠糖尿病制備的影響加以研究。 川麥冬多糖對(duì) 四氧嘧啶所致 小鼠糖尿病血糖的影響 麥冬多糖是麥冬塊莖的主要提取物 , 具有麥冬的藥性 ,有很高的醫(yī)用價(jià)值。但是筆者在做這實(shí)驗(yàn)時(shí)，方法有與他們又有很大差異，如在選材上，筆者所用的是川麥冬；在實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)上，筆者又選取的是不同劑量上麥冬多糖（ 200、 400 mg /kg )對(duì)糖尿病小鼠的影響，這些都為以后麥冬多糖的臨床試驗(yàn)提供參考價(jià)值。 本實(shí)驗(yàn)在作對(duì)比實(shí)驗(yàn)上選擇的陽性藥優(yōu)降糖 (格列本脲 )，為臨床上治療糖尿病的常用化學(xué)藥劑 ,該藥片的主要機(jī)理是 通過增加門靜脈胰島素水平或?qū)Ω闻K直接作用，抑制肝糖原分解和 糖原異生作用 ，肝生成和輸出 葡萄糖 減少 ，進(jìn)而達(dá)到治療效果。 本實(shí)驗(yàn)直接從川麥冬中提取出麥冬多糖，并未進(jìn)一步分離分析其化學(xué)成分 , 實(shí)驗(yàn)研究到底是多聚糖、 某一單糖或者單萜糖苷哪種多糖所起的藥理作用，其降血糖作用機(jī)制又如何等 ,也都并未進(jìn)一步去分析研究，也希望同行共同研究突破。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 13 糖尿病的根本是代謝異常 ,而代謝直接影響著身體的體重大小，因此 ,從某種程度上來說，糖尿病小鼠的體重變化可 以反映病情變化的好壞。同樣，病程時(shí) 間越長， 血糖 越高 。 在建立糖尿病小鼠模型 3d后，給予不同藥物灌喂小鼠，在造模 3d～ 試驗(yàn) 17d麥冬多糖能夠明顯地減緩小鼠體重的降低，優(yōu)降糖在小鼠體重降低上也有一定的減緩趨勢(shì)，而模型組明顯地反映出糖尿病消瘦的特點(diǎn)，從而得出結(jié)論，麥冬多糖在治 療糖尿病小鼠過程中，能夠有效的減緩小鼠體重的降低。抓小鼠的動(dòng)作很簡(jiǎn)單，左手的小指和無名指抓住小鼠的尾巴，另外三個(gè)手指抓住小鼠的頸部即可。 致謝 光陰似箭，歲月如梭 ， 來不及感嘆，大學(xué)生活已近尾聲，四年多的努力與付出，隨著本次論文的完成，將要?jiǎng)澫峦昝赖木涮?hào)。 他 的循循善誘的教導(dǎo)和不拘一格的思路給予我無盡的啟迪， 他 精益求精的 工作作風(fēng) ，嚴(yán)以律己、寬以待人的崇高風(fēng)范，將一直是我工作、學(xué)習(xí)中的榜樣。在整個(gè)的論文寫作中，同學(xué)積極的幫助我查資料和 輔導(dǎo)員 提供有利于論文寫作的建議和意見，在他們的幫助下，論文得以不斷的完善，最終幫助我完整的寫完了整個(gè)論文。山麥冬多糖對(duì)免疫低下小鼠的保護(hù)作用 [J ].中國醫(yī)藥學(xué)報(bào) .20xx:19(6),347348 [7] 何陵湘 . 麥冬多糖降血糖作用的藥效學(xué)觀察 [ J ] . 中國實(shí)用醫(yī)藥 , 20xx, 2( 16) : 4850. [8]蔣鳳榮 ,張 旭 ,范 俊 . 麥冬藥理作用研究進(jìn)展 [ J ]. 中 醫(yī) 藥 學(xué) 刊 .20xx,24(2):236237 [9]范 俊 ,張 旭 . 麥冬多糖藥理研究進(jìn)展 [ J ]. 中 醫(yī) 藥 學(xué) 刊 .20xx,24(4):626627 [10]丁仰憲 . 單味麥冬全草治療糖尿病 [J].中草藥， 1994 ， 25 (9) :478. [11] Kako M. Studie on the extraction of butyl alcohol from ophiopogonis tuber on reducing blood glucose[J].Biol pharm Bull ， 1995 ， 18(5) :785. [12] 葉華虎 ,袁菊芳 ,李敏 ,等 .四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病模型效果的性別差異 [J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志 ,20xx,20(1):1922 [ 13] 王智杰，茍小林 .麥冬降血糖作用的藥效學(xué)研究 [ J ].中醫(yī)藥學(xué)刊， 20xx， 21（ 6） :898899. [14] 吳忠忱 . 中藥活性成分的降血糖作用及其治療 Ⅱ 型糖尿病研究進(jìn)展 [ J ]. 中國中藥雜志 , 1998 , 23( 2 ): 118120 . [15] 陳衛(wèi)輝 ,錢 華 ,王慧中 . 麥冬多糖對(duì)正常和實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠血糖的影響 ［ J］ .中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志 ,1998,15（ 4）： 21 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 18 褐藻多糖對(duì)糖尿病小鼠血糖影響的研究 前 言 隨著 生活水平的提高，糖尿病 (diabetes mellitus)的發(fā)病率持續(xù)上升，已成為繼心腦血管疾病、癌癥之后危害人類身體健康的第三大致殘和致死性疾病。Ⅰ型糖尿病患者體內(nèi)胰島β細(xì)胞破壞，導(dǎo)致胰島素分泌絕對(duì)不足，為兒童及青少年最常見的內(nèi)分泌疾病。研究表明，中藥在糖尿病及其并發(fā)癥的治療方面取得了較大進(jìn)展，因此，在中藥中尋找合適的降血糖藥物已經(jīng)成為降糖藥物研究的新的方向。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 19 材料與方法 一、動(dòng)物來源： 昆明種小鼠，雌雄各半， 18～ 22g，由北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證編號(hào)： 0029535 二、主要的試劑與儀器設(shè)備 ： 褐藻多糖 ： 由中國科學(xué)院金屬研究所提供； 鹽酸二甲雙胍 ： 天津太平洋制藥有限公司產(chǎn)品； 鏈脲佐菌素： 為 Sigma 公司產(chǎn)品； 葡萄糖、總膽固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)試劑盒 ： 均為長春匯力生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。 ③ 按 A液 、 B 液 的 比例擴(kuò)大倍數(shù)混合后，即可得到所需 、pH 的檸檬酸緩沖液液體總量，必要時(shí)高溫高壓消毒， 4℃ 冰箱保存?zhèn)溆谩?1 周 后，眼眶后靜脈叢取血，分離血清，測(cè)小鼠空腹血糖 。連續(xù)灌胃治療 32天，于第 2 32 天小鼠禁食不禁水 12h，眼眶取血，分離血清檢測(cè)小鼠空腹血糖、血清 TG、 TC 值。 提示褐藻多糖對(duì)正常小鼠血糖無顯著影響。 177。0. 54* 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 21 *與 對(duì)照組比較 ,P STZ 致實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠的影響 ： ⑴ 褐藻多糖對(duì)糖尿病小鼠血糖的影響 ： 與模型組比較，褐藻多糖灌胃給藥治療 32 天后，褐藻多糖組 （ 在成模鼠飼養(yǎng)過程中 有兩只小鼠死亡） 及二甲雙胍組血糖 顯著降低 (P﹤ ,P﹤ )。 177。 177。 * 177。 ** 177。s) 組別 劑量 (mg/kg) n（數(shù)量） TC（ mmol/L） TG（ mmol/L） 對(duì)照組 10 177。0. 48* *與對(duì)照組比較， P 討論 目前糖尿病的病因和發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足而導(dǎo)致的機(jī)體代謝紊亂被作為其重要的發(fā)病機(jī)制。致糖尿病的化學(xué)物質(zhì)很多，目前較為常用的是酰脲酸衍生物四氧嘧啶和鏈脲佐菌素。 多糖 (polysaccharides, PS)是一類具有廣泛生物活性的生物大分子物質(zhì)，又稱多聚糖，是由單糖之間脫水形成糖苷鍵，并以糖苷鍵線性或分支連接而成的鏈狀聚合物。由于多糖在自然界分布廣泛，資源豐富，具有多種生物活性，毒副作用小，己成為天然藥物開發(fā)的熱點(diǎn)之一。人參多糖可引起血糖肝糖元降低，腎上腺的切除對(duì)其無影響，西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 23 對(duì)胰島素釋放有促進(jìn)作用 [9,10]。張汝學(xué)等報(bào)道，地黃低聚糖對(duì)正常大鼠血糖均明顯影響，對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠可明顯降低血糖值，增加肝糖元含量，降低肝葡萄糖 6磷酸酶活性 [15,16]。 褐藻是一種較高級(jí)的藻類，褐藻多糖來自于海帶巨藻、泡葉藻、墨角藻等，主要包括褐藻膠、褐藻糖膠和褐藻淀粉。 ： 是包括傳統(tǒng)的抗生素在內(nèi)的 ,所有具有某種藥理活性的微 生物次級(jí)代謝產(chǎn)物 自由基清除劑和自由基是相互拮抗，自由基是機(jī)體內(nèi)有機(jī)物分子的共價(jià)鍵通過均裂方式產(chǎn)生的 ,是具有不配對(duì)電子的原子團(tuán)、分子或離子。褐藻多糖給藥治療后，本實(shí)驗(yàn)觀察到，褐藻多糖能夠明顯降低 STZ 所致糖尿病小鼠的血糖值，改善糖尿病小鼠多飲、多尿、多食癥狀。結(jié)合本研究結(jié)果說明 ,褐藻多糖能夠顯著降低 STZ 誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的高血糖。胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足，是糖尿病發(fā)病的重要病理基礎(chǔ)，前人對(duì)多糖的研究表明，多種植物多糖降低血糖的機(jī)理都與其能夠促進(jìn)胰島素的分泌有關(guān) [24]。在正常情況下，機(jī)體內(nèi)的自 由基生成系統(tǒng)和消除系統(tǒng)，相互協(xié)調(diào)，維持著自由基的產(chǎn)生和消除的動(dòng)態(tài)平衡。 結(jié)論 褐藻多糖能有效的調(diào)節(jié)血糖代謝，是一個(gè)非常有前景的多糖類降糖