腫瘤藥理實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)-預(yù)覽頁
【正文】 =1(1eD/Do)n， S為存活分?jǐn)?shù)， D 為劑量， Do為存活分?jǐn)?shù)每下降 1/ e 時(shí)所需的藥物劑量， n為外推值?？筛鶕?jù)下述公式計(jì)算 : T T0 生長率（ %） = 100% C T0 C、 T和 To分別為對(duì)照組細(xì)胞，為給藥組細(xì)胞，另外的對(duì)照平板加藥時(shí)的細(xì)胞的 OD值。 大鼠 Walker256瘤 本瘤細(xì)胞接種在皮下或肌肉成為實(shí)體瘤，接種于腹腔則成為腹水瘤。 Lewis 肺癌 是一個(gè)在 C57BL/6小鼠上發(fā)現(xiàn)的自發(fā)性肺內(nèi)未分化的上皮樣癌。 二、抗癌作用機(jī)制研究 （一）藥物作用周期特異性研究 進(jìn)行藥物作用細(xì)胞周期性實(shí)驗(yàn)必須首先制備同步化的細(xì)胞，常用的體外培養(yǎng)細(xì)胞同步化的方法有機(jī)械振蕩法、雙胸苷同步法、含羞草氨酸 俘獲法和離心洗脫法。 含羞草氨酸俘獲法 含羞草氨酸可將細(xì)胞集結(jié)于 G1/S 邊界，阻止細(xì)胞進(jìn)入 S期。 G2/M細(xì)胞體積最大離進(jìn)氣口最近而被后洗出。 實(shí)驗(yàn)組光密度值 抑制率（ %） =（ 1 ） 100% 對(duì)照組光密度值 （三）藥物與 DNA結(jié)合能力檢查 吸收光譜移動(dòng)法 原理是 DNA與藥物形成復(fù)合物后吸收光譜發(fā)生改變，吸收峰產(chǎn)生位移，位移波長隨 DNA/ 藥物復(fù)合物的量增加而增加。 （四）藥物造成的 DNA損傷 彗星（ Comet）微凝膠單細(xì)胞電泳法 正常的 DNA為負(fù)超螺旋結(jié)構(gòu)， 在 pH雙鏈形式存在 , 在 pH。實(shí)驗(yàn)的原理是用從腫瘤細(xì)胞核提取的拓?fù)洚悩?gòu)酶II處理 PBR322DNA，后者是一種質(zhì)粒 DNA，主要存在有超螺旋、缺口狀和線性 DNA三種形式，瓊脂糖電泳上顯示出三條帶，在拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用下超螺旋 DNA解旋、斷裂，電泳時(shí)超螺旋帶減弱或消失，相應(yīng)的缺口環(huán)狀或線性 DNA增加。 （六）藥物對(duì)細(xì)胞核酸代謝的影響 DNA和 RNA合成均需要特殊氨基酸，用同位素標(biāo)記前體物如 3HTdR， 3HUR可分別摻入到細(xì)胞 DNA 和 RNA中去， 用液閃法測(cè)定其同位素活性則可知細(xì)胞 DNA和 RNA 的合成情況。常用的方法是用 Hoechst33342和 PI聯(lián)合染色，然后在熒光顯微下用紫外光激發(fā)。
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