新型重組類人膠原蛋白及其應(yīng)用課件-全文預(yù)覽
【正文】 and human collagens in posterior silk glands: Production of cocoons that contained collagens with hydroxylated praline residues [ J ] . Journal of Biotechnology 2023, 126( 2) : 205~ 219 [11]駱艷娥 , 范代娣 , 花秀夫 , 張兮 . 重組大腸桿菌高密度發(fā)酵生產(chǎn)類人膠原蛋白的過程研究 . 西北大學(xué)學(xué)報 2023, 35( 2) : 180~183 [12]膠原蛋白與重組膠原蛋白的研究進展 陳光 徐珍珍 吳銘 明膠科學(xué)與技術(shù) 第31卷第 1期 2023 年 3 月 Vol. 31. No. 1Mar. 2023. 科技部對 類人膠原蛋白 的評價 類人膠原蛋白的來源和制備 類人膠原蛋白的創(chuàng)新性 類人膠原蛋白的實驗研究 質(zhì)粒載體 人膠原蛋白基因 構(gòu)建 原始菌 (不具膠原合成能力 ) 重組菌 (膠原蛋白生產(chǎn)菌 ) 基因工程菌的構(gòu)建 反饋 補料 壓力 脈沖 饑餓 脅迫 定向 調(diào)控 高密度發(fā)酵 離心除雜 除雜蛋白 除內(nèi)毒素 類人膠原蛋白 蛋白質(zhì)分離純化 的來源和制備類人膠原蛋白 的基本生物學(xué)功能 ? 通過基因重組和生物工程技術(shù)得到的，一種 水溶性 高分子生物膠原蛋白 ? 在結(jié)構(gòu)、特性方面與人類膠原蛋白極為相似，命名它為 類人膠原蛋白 ECM示意圖 類人膠原蛋白 的創(chuàng)新性 無細胞毒性 基因工程單細胞蛋白 從根本上杜絕隱患 保證醫(yī)學(xué)應(yīng)用安全 低排異反應(yīng) 無病毒隱患 來源于人類基因 結(jié)構(gòu)最大程度相似 修飾過程去除端肽 溶于水 沒有酸堿溶劑殘留 避免影響細胞代謝 類人膠原蛋白 的創(chuàng)新性 單螺旋線性結(jié)構(gòu) pH值 保持皮膚酸堿平衡 維持細胞粘附性 變性溫度高 酸堿度中性 變性溫度 72℃ 動物膠原 37℃ 40℃ 易于儲運保存使用 分子量 90kD 利于皮膚滲透利用 均質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性強 類人膠原蛋白 的安全性評價實驗 全身毒性 實驗 細胞毒性 實驗 皮膚刺激 實驗 眼部刺激 實驗 皮膚過敏 實驗 亞慢性毒性 實驗 遺傳毒性 實驗 皮下植入 實驗 由“中國食品藥品檢定研究院”完成的 生物學(xué)評價試驗 植入實驗評價 :小鼠、家兔皮下植入， 90天無不良反應(yīng) 類人膠原蛋白 透皮與吸收實驗 ?小白鼠背部去毛清潔后，涂抹熒光染料 (tritc)標(biāo)記過的明膠和 類人膠原蛋白 溶液； ?于 4h， 8h分別在涂抹試樣區(qū)域取 1cm 2cm大小的皮膚，進行冰凍切片，采用熒光顯微鏡觀察； ?結(jié)果表明：類人膠原蛋白具有較強的透皮吸收行為，而明膠的透皮吸收較差。, M., H228。l228。inen, ., Jarvinen, M. and Polarek, J., 2023, Rebinant collagen and gelatin for drug delivery. Adv Drug Deliv Rev, 55:15471567. 尋找一種安全、有效并具有良好生物功效的膠原蛋白類材料在組織工程、醫(yī)藥美容等領(lǐng)域受到越來越廣泛的關(guān)注 國外重組膠原蛋白 的研究現(xiàn)狀 ? 2023年 Myllyharju J等人使用甲基酵母表達生產(chǎn)準人纖維膠原蛋白 Ⅰ ， Ⅱ ， Ⅲ 型 [5] ? 1998年 Nokelainen M等用兩種桿狀病毒轉(zhuǎn)染昆蟲細胞生產(chǎn)類人特異性軟骨膠原 II型 [6] ? 2023年 Nokelainen M等使用四種人類基因報道了使用甲基酵母高水平表達 I型前膠原 [7] ? Uitto J等從人皮膚細胞體外培養(yǎng)中得到了 Ⅰ， Ⅲ 型前膠原 [8] ? Vaughn PR等在啤酒酵母中表達出了攜帶有羥基化片斷的類人 Ⅲ 型膠原蛋白 [9] 由于哺乳動物細胞和昆蟲細胞培養(yǎng)成本高 , 周期長 ,重組膠原蛋白表達量極低 (1%左右 )，培養(yǎng)只能限于實驗規(guī)模 , 不可能滿足產(chǎn)業(yè)化、大批量的需求 [5]Myllyharju J， Nokelainen M， Vuorela人 Kividkko KI． Expression of rebinant human type IIII collagens in the yeast pichia pastoris． Biochem Soc Trans． 2023． 28(4)， 353
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