醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)-全文預(yù)覽
【正文】 (polymerase chain reaction, PCR) ： 1985年， Mullis K首創(chuàng)。 Northern印跡雜交技術(shù)： 1977年 Alwine JC等發(fā)明。 一種從基因水平對(duì)疾病進(jìn)行診斷的新技術(shù) ── 基因診斷技術(shù)得以誕生和發(fā)展 。 3/5/2023 66 （二）分子生物學(xué)在病理學(xué)中的應(yīng)用 由于分子生物學(xué)向病理學(xué)的滲透 ,出現(xiàn)“ 分子病理學(xué) ” 這樣一個(gè)新學(xué)科 。 3/5/2023 62 , 已由整體水平 、 器官水平進(jìn)入到細(xì)胞和分子水平；對(duì)生命的了解 ， 由表面現(xiàn)象觀察進(jìn)入了本質(zhì)的探討 。 藥物的耐藥性與抗藥基因 。 由于生命本質(zhì)的高度一致性 ， 使得這些學(xué)科可以使用同一套理論 、 同一套技術(shù) ， 來(lái)解釋和研究不同的病理 、 生理現(xiàn)象 ， 甚至治療不同的疾病 。 使人類(lèi)積累了十分豐富的醫(yī)學(xué)資料 。 轉(zhuǎn)基因玉米 、 轉(zhuǎn)基因大豆相繼投入商品生產(chǎn) 。 運(yùn)用基因定向誘變技術(shù)和重組 DNA技術(shù)改造酶或蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) ， 使其具有更高的效能和更好的穩(wěn)定性 ， 以滿(mǎn)足人類(lèi)社會(huì)的需求 。 3/5/2023 53 1972年 ， SV40病毒 DNA片段轉(zhuǎn)化大腸桿菌 ， 使本來(lái)在真核細(xì)胞中合成的蛋白質(zhì)能在細(xì)菌中合成 ， 打破了種屬界限 ， 開(kāi)創(chuàng)了利用基因工程技術(shù)在原核細(xì)胞中表達(dá)真核基因產(chǎn)物的時(shí)代 。轉(zhuǎn)基因細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和基因剔除動(dòng)物的出現(xiàn)，是現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用與發(fā)展。 1957年 ， Sutherland發(fā)現(xiàn)了 cAMP。闡明這些變化的分子機(jī)制，明確每一條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及參與該途徑的所有分子間的相互作用和調(diào)節(jié)方式。 中國(guó)科學(xué)家在 1965年人工合成了牛胰島素； 1973年又用 X射線(xiàn)衍射分析法測(cè)定了牛胰島素的空間結(jié)構(gòu)。 蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)主要研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。 真核基因的 順式調(diào)控元件與反式作用因子 、核酸與蛋白質(zhì)間的分子識(shí)別與相互作用 。 通過(guò)研究還發(fā)現(xiàn)男女可能存在巨大遺傳差異 ， 男性染色體減數(shù)分裂的突變率是女性的兩倍 。 主要的目標(biāo)是繪制遺傳連鎖圖 、 物理圖 、 轉(zhuǎn)錄圖 ， 并完成人類(lèi)基因組全部核苷酸序列測(cè)定 。 3/5/2023 39 1977年 :Sanger測(cè)定了 ΦX 174 DNA全部 5375bp核苷酸序列； 1978年 :Fiers等測(cè)出環(huán)狀 SV40 DNA全部 5243bp核苷酸序列； 1980年代 :λ 噬菌體 DNA全部 48502堿基對(duì)的序列被測(cè)出；一些 小的病毒包括乙型肝炎病毒 、 艾滋病毒等基因組的全 序列也陸續(xù)被測(cè)定 。 DNA分子是多種多樣生命現(xiàn)象的物質(zhì)基礎(chǔ)。 化學(xué)裂解法 : 美國(guó) Maxam I和Gilbert W發(fā)明。 3/5/2023 29 3/5/2023 30 3/5/2023 31 4. 中心法則的建立 1958年 ， Crick提出了分子生物學(xué)的中心法則 （ central dogma） 。在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)增殖的噬菌體中都只含有 32P而不含 35S, 這表明噬菌體的增殖直接取決于 DNA而不是蛋白質(zhì)。由于這類(lèi)物質(zhì)都是從細(xì)胞核中提取出來(lái)的，而且又是酸性，故稱(chēng)其為核酸（ nucleic acid）。核酸的主要作用是攜帶和傳遞遺傳信息，因此形成了分子遺傳學(xué)。 DNA、 RNA 和蛋白質(zhì)成為人類(lèi)治病、防病的一類(lèi)新型的生物制品或藥物。 3/5/2023 15 ?遺傳性狀改變或治療疾病 可能從某一生物體的基因組中分離出某一特定功能基因，導(dǎo)入到另一種生物的基因組。 3/5/2023 12 分子生物學(xué)技術(shù)： 例如： DNA及 RNA的印跡轉(zhuǎn)移、核酸分子雜交、基因克隆、基因體外擴(kuò)增、 DNA 測(cè)序等，形成了獨(dú)特的重組 DNA技術(shù)及其相關(guān)技術(shù)。 3/5/2023 8 1950年， Astbury在一次講演中首先使用 “ 分子生物學(xué) ”這一術(shù)語(yǔ) , 用以說(shuō)明它是研究生物大分子的化學(xué)和物理學(xué)結(jié)構(gòu)。 生命科學(xué)是研究生命現(xiàn)象和生命活動(dòng)規(guī)律的一門(mén)綜合性學(xué)科。 生命科學(xué)的前沿領(lǐng)域： 分子生物學(xué) 、分子遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)，而分子生物學(xué)是生命科學(xué)的核心前沿。 3/5/2023 7 由于分子生物學(xué)以其嶄新的觀點(diǎn)和技術(shù)對(duì)其他學(xué)科的全面滲透，推動(dòng)了細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)向分子水平的方向發(fā)展，使這些學(xué)科已不再是原來(lái)的經(jīng)典學(xué)科，而成為生命科學(xué)的前沿。確立了核酸作為信息分子的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)；提出了堿基配對(duì)是核酸復(fù)制、遺傳信息傳遞的基本方式，最終確定了核酸是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)。 基因操作 (gene manipulation) 基因克隆 (gene cloning) 基因工程 (gene engineering) 3/5/2023 14
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