華中科技大學(xué)發(fā)酵工程 第二章 工業(yè)用微生物菌種-全文預(yù)覽
【正文】 在麥芽汁固體培養(yǎng)基上 ， 25℃ 培養(yǎng) 4872h 形態(tài)篩選 根據(jù)正常株特點進行挑選 ， 接種斜面?zhèn)溆? 純化 ， 采用平板分離法進一步純化 ， 至少反復(fù)三次 ① 生成子囊孢子速度測定 ② 發(fā)酵力測定 性能測定 ③ 熱死溫度測定 ④ 凝集力測定 ⑤ 雙乙酰含量測定 菌種選育改良的具體目標 ? 提高目標產(chǎn)物的產(chǎn)量 ? 提高目標產(chǎn)物的純度，減少副產(chǎn)物 ? 改良菌種性狀，改善發(fā)酵過程 ? 改變生物合成途徑，以獲得高產(chǎn)的新產(chǎn)品 發(fā)酵工業(yè)菌種改良方法 ? 常規(guī)育種 (誘變育種 ) ? 細胞工程育種 ? 基于代謝調(diào)節(jié)的育種技術(shù) ? 基因工程育種 ? 蛋白質(zhì)工程育種 ? 代謝工程育種 賴氨酸生產(chǎn)菌種的選育改良思路 ? 出發(fā)菌株 ：黃色短桿菌、谷氨酸棒桿菌、乳糖發(fā)酵短桿菌 ? 育種思路 —— 滲漏缺陷型的選育 —— 營養(yǎng)缺陷型的選育：高絲氨酸缺陷型 ： AEC ： Leu 、 抗 Leu結(jié)構(gòu)類似物、 喹啉 s 、 苯醌 s ： Ala、抗 Asp結(jié)構(gòu)類似物 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 7. 選育溫度敏感突變株 8. 應(yīng)用細胞工程和基因工程育種 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 賴氨酸合成中間代謝有以下兩條途徑： ① 通過 TCA循環(huán) 葡萄糖 丙酮酸 草酰乙酸 天冬氨酸 賴氨酸 ② 通過磷酸烯醇丙酮酸羧化反應(yīng) 葡萄糖 磷酸烯醇 草酰乙酸 天冬氨酸 式丙酮酸 丙酮酸 賴氨酸 代謝工程的定義 ? 利用多基因重組技術(shù)有目的地對細胞代謝途徑進行修飾、改造，改變細胞特性，并與細胞基因調(diào)控、代謝調(diào)控及生化工程相結(jié)合，為實現(xiàn)構(gòu)建新的代謝途徑，生產(chǎn)特定目的產(chǎn)物而發(fā)展起來的一個新的學(xué)科領(lǐng)域。 ? 技術(shù) 關(guān)鍵：產(chǎn)物合成條件的選擇與控制及相應(yīng)篩選方法的確定。 ? 分離純化同時富于篩選條件，一步得出所需菌株。 本章內(nèi)容 一、 常用的工業(yè)微生物 二、 發(fā)酵工業(yè)菌種篩選的原則與基本技術(shù) 三、 發(fā)酵工業(yè)菌種改良 對產(chǎn)物進行菌種篩選時，有兩條經(jīng)驗 ： ? 進化上向上兼容； ? 次生代謝在進化上后移，芽孢菌以上才有篩選意義。 （二）分離篩選原理與技術(shù) 1. 篩選的指導(dǎo)思想 2. 分離篩選工作在實際中應(yīng)用的幾個方面 3. 新種分離篩選原理與技術(shù) 1. 篩選的兩種指導(dǎo)思想 ? 先分離純化，再結(jié)合工藝要求進行篩選。 選擇性分離 選擇性分離原理和技術(shù) ? 生長條件的選擇與控制原理
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