【正文】 ,殘留物加甲醇溶解并定量。 湖北中醫(yī)學(xué)院 屆碩士畢業(yè)論丈 第頁絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 ..大孔吸附樹脂一比色法 樣品乙醚脫脂后 ,用甲醇回流提取 ,回收甲醇 ,殘?jiān)?%氫氧 化鈉溶液溶解 ,加入到已處理好的大孔吸附樹脂柱上 ,用 %氫氧化 鈉溶液和水液沖洗后再用 %乙醇洗脫 ,收集乙醇洗脫液 ,蒸干 ,殘 渣加甲醇稀釋至刻度 ,加入 %香草醛冰醋酸溶液和高氯酸 ,予℃ 測(cè)定吸收 水浴中加熱 分鐘后 ,冰水浴冷卻 ,加入冰醋酸于 度”“ . 樣品以甲醇回流提取 ,殘?jiān)铀芙夂笸ㄟ^預(yù)先處理好的大孔吸 附樹脂柱 ,以甲醇洗脫 ,洗脫液上氧化鋁柱 ,以 %甲 醇溶液洗脫 , 洗脫濃縮至干 ,殘留物加甲醇溶解并定量 ,加香草醛冰醋酸溶液和高 氯酸 ,置 ℃水浴中加熱 分鐘 ,冷后加冰醋酸 ,用分光光度法在波長處測(cè)定吸收度 ,并以人參皂甙。有人曾做 了實(shí)驗(yàn) ,結(jié)果在紋股藍(lán)皂苷元的薄層色譜中在與人參二醇、人參三醇 對(duì)照品相對(duì)應(yīng)的位置上無相同顏 色的斑點(diǎn) ,改換多種展開系統(tǒng)屢試結(jié) 果均如此。 在提取方面 ,曾采用甲醇回流提取法提取 ,在甲醇提取前先用乙 醚回流提取以除去葉綠素及部分親脂性成分 ,甲醇提取物再用活性炭 脫色一次 ,回收甲醇后用正丁醇提取 。對(duì)照品也無對(duì)應(yīng) :: :: 的斑點(diǎn)。吸取上述不同產(chǎn)地的供試品溶液及人參皂苷 ,、 .對(duì)照 品溶液 /各 ,分別點(diǎn)樣于同一含有羧甲基纖維素鈉為粘 :: : 合劑的硅膠薄層板上 ,以氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水 , ℃以下放置的下層為展開劑 ,展開 ,取出 ,晾干。 或以絞股藍(lán)皂苷作為對(duì)照品 ,展開劑多是常用的人參皂苷展開劑 ,一 般所得 ?個(gè)斑點(diǎn) ,與有些人參總皂苷樣品的色譜很相似 ,實(shí)際上反 映不出絞股藍(lán)的特點(diǎn)“”。對(duì)照品 ,加甲醇制成各含的 混合液 ,作為對(duì)照品溶液“”。 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第 頁絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 參考文獻(xiàn)的方法”“““川 ,結(jié)果色譜圖大都存在雜質(zhì)成分和葉綠 素干擾較大的缺點(diǎn)。噴以對(duì)羥基苯甲醛一硫酸溶液 ,于 ℃加熱分鐘 ,可以見到 與對(duì)照藥材、絞股藍(lán)總苷、人參二醇和人參皂苷。氯仿一乙酸乙酯一甲醇 :。血常規(guī)、腎功能、肝功能、心電圖及心 ,肝 ,腎、睪丸的病 理檢查均無異常改變”“。亦有報(bào)道 ,絞股藍(lán)總苷對(duì)小鼠腹腔注射 的 為 /,口服無毒性 。 ./“” ,水提浸膏給小鼠腹腔注射 為 ./ ”” 。 對(duì)消化系統(tǒng)的影響 .保肝作用 絞股藍(lán)對(duì)四氯化碳肝損傷大鼠 ,有抑制受損肝組織 的脂質(zhì)過氧化作用“”。川。 .對(duì)學(xué)習(xí)記憶有促進(jìn)作用””。絞股藍(lán)能防止正常細(xì)胞癌化 ,并促進(jìn)細(xì)胞發(fā)揮 自我治愈的能力 ,引導(dǎo)癌化細(xì)胞恢復(fù)正常”。 對(duì)免疫系統(tǒng)的影響 .對(duì)非特異性免疫的影響 紋股藍(lán)能增加正常小鼠脾臟和胸腺的 重量 ,對(duì)抗環(huán)磷酰胺所致小鼠脾臟 ,胸腺重量下降”’” . .對(duì)細(xì)胞免 疫功能的影響 絞股藍(lán)水提物喂養(yǎng) 天的大白鼠 ,其 淋巴細(xì)胞數(shù)增加顯著。絞股藍(lán)總皂苷給高脂小鼠、大鼠灌胃 ,連續(xù) 天 ,能顯著降低低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白含量。多搪水解產(chǎn)物中還含有鼠李糖 等”。苯丙氨酸 .組氨酸 ,賴氨酸。、 ,.、 :,?. 和也是絞股藍(lán)與人參的共有成分”。 第二節(jié) 化學(xué)成分研究概況 皂苷類 絞股藍(lán)全草主要化學(xué)成分為絞股藍(lán)皂苷 ,其基本化學(xué)結(jié)構(gòu)為四環(huán) 三萜的達(dá)瑪烷型。古籍本草記載及現(xiàn)代的《全國中草藥匯編》下冊(cè)、Ⅸ中藥大 辭典》等典籍上均以絞股藍(lán)為藥用正品。文獻(xiàn)報(bào)道貴州省絞股藍(lán)屬植物有種 ,即絞股藍(lán)丘 ? ‖、長梗紋股藍(lán)丘口 。其中漿果類的絞 股藍(lán)亞屬有紋股藍(lán)口 .,光葉絞股藍(lán)護(hù) ..毛絞股藍(lán) 正、白脈絞股藍(lán)占 .,歙縣絞股藍(lán)丘 。其中絞股藍(lán)和長梗絞股藍(lán)分布最廣 ,約占總面積的 %和 %, 其 它種占 %。絞股藍(lán)味苦 ,微甘 ,性寒 ,歸心、肝 ,胃經(jīng) ,有止咳化痰 ,健脾理氣 。 本課題的主要研究成果 : .建立了絞股藍(lán) %總皂苷提取物提取、純化工藝。、采用多學(xué)科綜合研究 ,以提取物過程 的本質(zhì)變化為核心 ,制備提取物并建立符合規(guī)范化生產(chǎn)的、中國藥 典》能夠接受的提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) ,實(shí)現(xiàn)中藥提取物規(guī)范化是中藥現(xiàn)代 化最重要課題之一。 中藥指紋圖譜既能反映中藥提取物整體固有特征 ,又能 客觀評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量量化標(biāo)準(zhǔn) ,是中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中最重要 % 的課題之一。因此 ,實(shí)現(xiàn)中藥提取物規(guī)范化是中藥現(xiàn)代化最 重要課題之一 . 在湖北省神農(nóng)架林區(qū)將絞股藍(lán)作為湖北省地道藥材規(guī)范化種植 示范品種 ,已建立畝規(guī)范化種植基地。絞股藍(lán)中除了含有絞股藍(lán)皂 苷之 外 ,還含有多種黃酮類和氨基酸類成分等 ,目前人們關(guān)注的焦點(diǎn)是絞 股藍(lán)皂苷。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn) ,絞股 藍(lán)除具有以上傳統(tǒng)功效外 ,還有抗腫瘤、抗衰老、增強(qiáng)免疫、抗心肌 缺血缺氧、降血脂、降血糖、抗應(yīng)激和抗疲勞、護(hù)肝、抗突變等作用。對(duì)于保證絞股藍(lán)提取物產(chǎn)品的質(zhì)量 ,確保其安全、 有效、可控 ,促進(jìn)此品種的國際化發(fā)展具有十分重要的意義。采用薄層色譜法對(duì)絞股藍(lán) %總皂苷提取物 進(jìn)行了定性鑒別 ,重點(diǎn)解決了使用高效液相色譜法測(cè)定絞股藍(lán) %總 皂 苷提取物中人參皂苷。通過對(duì)不同產(chǎn)地 絞股藍(lán)提取物樣品的液相圖譜進(jìn)行比較 ,皂苷部分標(biāo)定了個(gè)共有 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第頁絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 峰 ,共有峰在內(nèi)完全分離 。本研究論文對(duì) 絞股藍(lán) %總皂苷的提取純化工藝、指 紋圖譜、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究?，F(xiàn)代臨床常用于慢性氣管炎、支氣管擴(kuò)張 ,結(jié)核性胸膜 炎、冠心病、心絞痛、心肌梗塞、缺血性中風(fēng)、腦出血后遺癥、心肌 炎、膽囊炎、膽石癥、慢性肝炎和血管性頭痛等病癥。在不以贏利為目的的前提下 ,學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的部分 或全部?jī)?nèi)容。對(duì)本文 的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體 ,均己在文中以明確方式標(biāo)明。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外 ,本論 文不含其他任何個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品或成果。學(xué)校有權(quán)保存學(xué)位論文的 印刷本 。我國民間 將其用 于強(qiáng)身益壽 ,早在明代救荒本草》、《農(nóng)政全書》、本草綱目》 中就有記載。在制成各種劑型的過程中最重要的環(huán)節(jié)是中藥提取 物 ,中藥標(biāo)準(zhǔn)提取物是國際天然藥物應(yīng)用的主要形式 ,也是中藥現(xiàn)代 化的關(guān)鍵技術(shù)。 本論文采用、反相高效液相色譜法對(duì)絞股藍(lán)提 取物的皂苷部分和黃酮部分進(jìn)行了指紋圖譜的研究。 本論文采用多指標(biāo)檢測(cè)手段制定絞股藍(lán) %總皂苷提取物的質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn) ,突出專屬性鑒別。、蘆丁、槲皮素的含量指標(biāo) ,方法準(zhǔn)確、 可靠、重現(xiàn)性好。 ,. 第 頁 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝 ,指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 ,. , . ,%..,%.?, , %., ,. , , ,湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第頁絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 , , , , ? . : 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第頁絞股藍(lán) %.皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 前言 絞股藍(lán)是常用中藥 ,為葫蘆科植物絞股藍(lán)妙一 ,冊(cè) .夕 .的全草 ,性寒味苦 ,在臨床上常用于清熱解毒、 止咳祛痰 ,中醫(yī)常用于治療慢性氣管炎 。目前已是世界公認(rèn)的唯一能從人參屬以外提取出人參皂 苷的植物 ,且絞股藍(lán)所含皂苷總數(shù)是人參的倍以上 ,它不但具有人 參的作用 ,而且還有人參所沒有的功效一一清熱解毒 ,且無人參過量 服用會(huì)對(duì)身體造成損害的副作用。植物提取物是中藥走向國際市場(chǎng)的現(xiàn)實(shí)表達(dá)方式 ,代 表了植物療法的前景。通過研究 ,實(shí)現(xiàn)了絞股藍(lán)提取 ,加工工藝的標(biāo)準(zhǔn)化 , 實(shí)現(xiàn)絞股藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)提取物的質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化 ,以使我國豐富的絞股藍(lán)資 源得到科學(xué)、合理的 開發(fā)利用 ,為中藥的標(biāo)準(zhǔn)化、產(chǎn)業(yè)化發(fā)展做出應(yīng) 有的貢獻(xiàn)。 綜上所述 ,本課題的研究的必要性為 :、開展對(duì)絞股藍(lán)提取物 生產(chǎn)工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究 ,這對(duì)絞股藍(lán)及其制劑質(zhì)量控制和 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第頁絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝 ,指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 產(chǎn)業(yè)化都具有重要的價(jià)值。、本課題的研究可以有效地鑒別絞股藍(lán)及其提取物 ,完善 絞股藍(lán)及其提取物的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系 ,其方法在中藥的質(zhì)量控制和品質(zhì) 評(píng)價(jià)方面具有全面的推廣應(yīng)用價(jià)值。 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第頁絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 第一章 文獻(xiàn)綜述 絞股藍(lán)為葫蘆科植物絞股藍(lán) 腳鋤 .,.的 全草。《中藥大辭典》名七葉膽 ,別名小苦藥、 遍地生根 .五葉參等 .全世界 個(gè)種 ,我國種 ,分布于長江流域 以南及陜西 ,尤以秦嶺及長江以南地區(qū)居多 ,該地區(qū)集中了該屬植物 的 .%” .其中湖北省絞股藍(lán)資源主要分布于神農(nóng)架 .來風(fēng) ,宣恩、 成豐、建始 ,宜昌、房縣、五峰 ,長陽 ,十堰、丹江口、竹溪、鐘祥、 京山 ,通山 ,崇陽 、廣水、陽新 ,羅田、英山、大冶等地 .分布區(qū)的 絞股藍(lán)屬植物有絞股藍(lán)矗、毛絞股藍(lán)丘、 心籽絞股藍(lán)口 .,皿Ⅳ口 . ,.絞股藍(lán)在陜西省分布 在巴山 ,秦嶺兩林區(qū) ,分布較多的有略陽、漢中、洋縣 .留壩、佛坪、 柞水 ,鎮(zhèn)安、寧陜、安康 ,平烈、嵐皋等縣 ,調(diào)查發(fā)現(xiàn)有種變種 : 絞股藍(lán)丘刀、單葉絞股藍(lán)口 .占 ,、光 葉絞股藍(lán)口』川、長梗絞股藍(lán)口 . 只肋、毛 絞股藍(lán) .佑 .,口只肋、大果絞股藍(lán)口