細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備工作-全文預(yù)覽
【正文】 種屬加入適量的不同血清，一般可加入牛血清，若小牛血清增殖效果差，應(yīng)加胎牛血清（FBS），通常濃度為10%～20%六：傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)3～5d，需換液一次，去除飄浮的組織塊和殘留的血細(xì)胞。1％臺盼藍(lán)），50ml培養(yǎng)瓶接種約8105活細(xì)胞。但用貼塊法易使平滑肌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)肌絲喪失，亞細(xì)胞器增加。若組織塊不易貼壁，可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清，胎汁。2． 消化分離法：※（1） 胰蛋白酶法：(25g )（2） 膠原酶法：五：原代培養(yǎng)方法：1． 貼塊法：在培養(yǎng)皿內(nèi)將組織塊剪成1mm3左右的小塊，剪時(shí)可滴加1～2培養(yǎng)液，以保持濕潤。試驗(yàn)準(zhǔn)備一：細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備:1. 儀器:(1) 倒置相差顯微鏡(2) CO2培養(yǎng)箱(3) 電熱干燥箱(4) 水純化裝置(5) 冰箱:普通冰箱(培養(yǎng)液,生理鹽水,Hank’s液,短期保存的組織標(biāo)本)和20℃冰箱(保持生物活性及較長時(shí)間存放的制劑如酶,血清等)(6) 液氮容器:儲存細(xì)胞(7) 離心機(jī)(4000rpm,1000rpm即可及天平(8) 高壓蒸氣消毒氣(9) 濾器:Zeiss濾器,玻璃濾器,微孔濾器等。1％新潔爾滅消毒皮膚，無水乙醇（用于酒精燈）6． 抗菌素：青霉素，鏈霉素三：培養(yǎng)用液：1． 平衡鹽溶液：DHANKS液(g/l )PH試紙Nacl , kcl , , KH2PO4 ,NaHCO3 ,
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