三種測(cè)序dna模板制備方法的比較-全文預(yù)覽
【正文】 用于基因組 DNA 的測(cè)序， 而 96 管集合板法更適用于甲基化 DNA 的測(cè)序。利益沖突：課題未涉及任何廠家及相關(guān)雇主或其他經(jīng)濟(jì) 組織直接或間接的經(jīng)濟(jì)或利益的贊助。9:387402.Xiao L, Zhang J, Sirois P, et al. A new strategy for next generation sequencing: merging the Sanger39。7:149158.Casci T. DNA sequencing: Exome sequencing technologiespared. Nat Rev Genet. 2011。12(5):607610.Whetten RW, Sof237。39(12):e81.Laura T, Michael W, and Linda J, et al. Differences in replication of a DNA template containing an ethyl phosphotriester by T4 DNA polymerase and Escherichia coli DNA polymerase I. Nucleic AcidsRes. 2003。[18][19]4參考文獻(xiàn)[20][1]Wang H, Wang XJ, Zhen YS, et al. Zhongguo FenziXinzangbingxue Zazhi. 2004。55(4):641658.Yu Y, Haroun RH, Jun H, et al. A Method for Preparing DNA Sequencing Templates Using a DNABinding Microplate. J BiomolTech. 2009。rzer I, Guelly C, Trajanoski S, et al. The impact ofPCRgenerated rebination on diversity estimation of mixedviral populations by deep sequencing. J Virol Methods. 2010。132:721723.Gao L, Lu H, Xu L, et al. An efficient strategy forsequencingbysynthesis. J Nanosci Nanotechnol. 2010。因?yàn)榕c傳統(tǒng)克 隆測(cè)序技術(shù)相比，利用PCR產(chǎn)物直接測(cè)序方法 顯然是簡單、快速的?？傮w 來講，基因組DNA測(cè)序效果優(yōu)于甲基化DNA測(cè) 序結(jié)果。而 測(cè)序DNA模板的濃度、純度及模板自身的序列 結(jié)構(gòu)都與測(cè)序結(jié)果有直接的關(guān)系[2224]。近 年來，隨著一些研究新技術(shù)的不斷發(fā)展，使得 DNA測(cè)序技術(shù)也有了較快的更新，操作程序更 加優(yōu)化，成本更低，速度更快。 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院，1 分子生物學(xué)研究室，2 生物化學(xué)與分子 生物學(xué)教研室，河南省新鄉(xiāng)市453003；3MedicineUniversity ofUtah USA，SaltLake City841013討論秦川★，男，1968 年生，河南省新鄉(xiāng) 市人，漢族，碩士 講師，主要從事病 原分子生物學(xué)方 面的研究。主要觀察指標(biāo)：3 種方法的測(cè)序成功率。用 Promega GoTaq 酶進(jìn)行擴(kuò)增，并行 1%的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行驗(yàn) 證。鋪入含氨芐青霉素的 LB 培養(yǎng)板，37 ℃過 夜生長，挑選藍(lán)色菌斑，用定位于目的片段外 圍不遠(yuǎn)處的質(zhì)粒序列的一對(duì)引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò) 增 ( 高保真擴(kuò)增 ) 。PCR 擴(kuò)增驗(yàn)證目的基因的存在。其中DNA模板的質(zhì)量起著至 關(guān)重要的作用[35]?；蚩寺『蚉CR技 術(shù)使從染色體中分離特定DNA片段的難題迎刃 而解，快速高效的測(cè)序技術(shù)誕生[12]。對(duì)于甲基化 DNA 測(cè)序效果，96 管集合板法優(yōu)于其他 2 種方法(P )。16(15): 28202822.[ ]摘要背景：DNA 模板質(zhì)量對(duì) DNA 序列測(cè)定起著至關(guān)重要的作用。3Medicine University of Utah, Salt Lake City 84101, USAQin C, Zhang JH, Mcknight RA, Liu SG. Comparison of three methods for preparing DNA sequencing templates. Zhongguo ZuzhiQin Chuan★, Master,Lecturer, Laboratory of Molecular B
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