南農傳染病實習報告-全文預覽
【正文】 具體步驟：在接菌之前，加入100μL輔酶A和100μL小牛血清，挑取疑似菌落（HPS為無色或淡灰色，半透明小菌落）接到TSB培養(yǎng)基中，放到搖床，37℃培養(yǎng)24h。臟器剖檢胸腔肺臟有淡紅色輕度肉質病變，但不腫脹，表面不光澤，不平整。c) 王老師幫助我們反復凍融三次。2．組織觸片和染色觀察：a) 觸片：取一小塊肺臟組織，在潔凈的載玻片上輕輕地作2～3 個壓跡，制成觸片；b) 干燥：將標本面向上，手持載玻片一端的兩側，小心地在酒精燈上高處微微加熱，使水分蒸發(fā)，但切勿緊靠火焰或加熱時間過長，以防標本烤枯而變形；c) 固定：在酒精燈處快速的來回通過23秒鐘，并不時以載玻片背面接觸皮膚，不覺過燙為宜（不超過60℃），放置待冷后，進行染色；d) 初染：在涂片薄膜上滴加草酸銨結晶紫12滴，使染色液覆蓋涂片，染色約1min；e) 水洗：用洗瓶中自來水沖洗，直至洗下的水呈無色為止；f) 媒染：用1001000μL移液槍吸取約300μL碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆蓋涂片，染色約1min；g) 水洗：用洗瓶中自來水沖洗，直至洗下的水呈無色為止； h) 脫色：斜置載玻片，滴加95%乙醇脫色，至流出的乙醇不現(xiàn)紫色為止，大約需時2030S，隨即水洗；i) 復染：滴加沙黃染液12滴，使染色液覆蓋觸片約1min；j) 水洗：斜置載玻片，在自來水龍頭下用小股水流沖洗，直至洗下的水呈無色為止；k) 干燥、觀察：用吸水紙吸掉水滴，待標本片干后置顯微鏡下，用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后滴一滴浸油在玻片上，用油鏡觀察細菌的形態(tài)及顏色，紫色的是革蘭氏陽性菌，紅色的是革蘭氏陰性菌?；蛘?，將平皿蓋放在試驗臺上，盡量直立平皿靠近酒精燈火焰；c) 右手接種環(huán)在瓊脂的一端涂布，劃線時，接種環(huán)與瓊脂表面是30176。b) 如病豬已經死亡，要及時進行尸體剖檢。將其向兩側分開，腹腔臟器即可全部露出。觸診：下頜淋巴結，腹股溝淋巴結，髂下淋巴結（二） 宰殺，固定和剖腹檢查1. 宰殺：勁動脈放血致死。然后將平板邊沿用酒精燈外焰燒一下后，將TSA倒入平板中，鋪滿。準備實驗器材，配制試劑觀察動物發(fā)病情況檢測病毒檢測細菌病料勻漿反復凍融平板劃線分離、肉湯接種細胞接種純培養(yǎng)藥敏實驗生化試驗病毒的初步鑒定細胞病變觀察實驗準備（一）滅菌消毒用品：手術刀片、手術刀柄、剪刀、大鑷子、小鑷子、剪刀、黃色槍頭一盒、用錫箔紙包好小濾器（一組3至5個）、玻璃勻漿器、PCR管。4. 掌握畜禽傳染病實驗室診斷方案的設計、診斷試劑的準備和檢測結果分析判定。3. 掌握畜禽傳染病的臨床診斷技術。二、 實習安排時間地點內容周一5月27日白天逸夫樓4017診斷試劑的配制；器皿的準備以及滅菌的處理周二5月28日白天逸夫樓4017病豬的臨床診斷；病料的采取與處理；細菌的涂片檢查與分離培養(yǎng)周三5月29日白天逸夫樓4017病毒的分離接種（病料過濾和接種細胞）；分離細菌鏡檢和增殖周四5月30日晚上逸夫樓4017細菌的生化試驗、藥敏試驗和細菌鑒定；觀察接種細胞周五5月31日江浦農場參觀學習周六6月1 日下午逸夫樓4017病毒細胞病變觀察、菌落鑒定三、 實習內容第一天：王先煒老師講解本周傳染病學實習的主要內容，傳染病臨床診斷的主要方法，實驗器材的準備，實習過程中的注意事項以及實習分組安排，將第一大組所有同學再分為三大組， 9小組。 每塊TSA平板的成分：TSA 2g去離子水 50mL121℃， 1520min， 冷卻至50℃左右， ，2. TSB液體培養(yǎng)基成分：全部小組依舊一起配制，高壓后然后分裝， 每管液體培養(yǎng)基的成分：蛋白胨 蛋白示 酵母提取物 TSB 去離子水 混勻后可分裝小試管內（每管3mL） 121℃，1520min用之前每只試管加1μL血清，1μLNAD血清：用前要滅能（56℃， 40min）3. 生理鹽水： NaCI 加入50mL去離子水，然后高壓滅菌4. 細胞維持液：在50ml的DMEM液中加入1ml的血清和1ml的雙抗（青、 鏈霉素）；（四） 倒TSA平板將TSA溶液高壓后冷卻至60℃左右。（一）外部檢查觀察被毛和營養(yǎng)狀況，檢查四肢、眼結膜的顏色、皮膚等有無異常，下頜淋巴結是否有腫脹現(xiàn)象，肛門附近有無糞便污染等。3. 腹腔剖開從劍狀軟骨后方沿腹壁正中線由前向后至恥骨聯(lián)合切開腹壁，再從劍狀軟骨沿左右兩側肋骨后緣切開至腰椎橫突。5. 注意事項：a) 剖檢過程中要注意個人防護，剖檢人員必須帶手套，防止手劃傷感染。具體操作如下：a) 右手執(zhí)筆式持接種環(huán)，在酒精燈火焰上灼燒接種環(huán)，
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