分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)與產(chǎn)前診斷-全文預(yù)覽
【正文】 。 548: 97105 （三）目前常用的 未知 基因突變分析技術(shù) ? 異源雙鏈體形成分析 （ Heteroduplex analysis, HA） ? 單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析 （ Singlestrand conformation analysis, SSCP） ? 變 性 梯 度 凝 膠 電 泳 （ denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE） ? 變性高效液相色譜分析 （ Denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC ） 體外蛋白截短實(shí)驗(yàn) （ Protein truncation test, PTT） 定量多重 PCR技術(shù) （ Quantitative multiplex PCR, QMPCR） 多重探針連接依賴性擴(kuò)增技術(shù) （ Multiplex Ligationdependent Probe Amplifcation, MLPA) DNA序列分析 （ DNA sequencing) （ HA） ? 由突變型和野生型 DNA鏈形成的異源雙鏈 DNA在其錯(cuò)配處形成一個(gè)凸起 ， 電泳時(shí)會(huì)產(chǎn)生與相應(yīng)的同源雙鏈 DNA不同的遷移率 ， 從而使兩者得以分離 。 各種類型病理性突變的比例 1. 無(wú)義突變和移碼突變： 60％ 2. 稀有的錯(cuò)義突變： 20％ 3. DNA大片段缺失或重復(fù) : 20％ 另外：可能和疾病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估有關(guān)的大量的多態(tài)位點(diǎn) 微小突變 （二） 目前常用的對(duì) 已知 點(diǎn)突變的分析技術(shù) ? 限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（ RFLP） ? 等位基因特異性（ PCR）擴(kuò)增（ ASA） ? 等位基因特異性寡核苷酸雜交（ ASO） ? DNA芯片 （ RFLP）分析 ? 當(dāng)突變影響到某一限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)時(shí)，可通過酶切 PCR產(chǎn)物，電泳分析 :限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（ RFLP） （ PCR）擴(kuò)增（ ASA） ? 通過設(shè)計(jì)兩個(gè) 5’端引物，一個(gè)與正常 DNA互補(bǔ)，一個(gè)與突變 DNA互補(bǔ)。 （ 3） 無(wú)義突變 （ nonsense mutation）：堿基替換后，使編碼氨基酸的密碼子變成一個(gè)終止密碼子。 ? 穩(wěn)定突變 ：傳遞中不改變?cè)械耐蛔?。 ? 所需染色體 DNA可來(lái)自各種組織，如新鮮組織、福爾馬林固定的組織、石蠟包埋組織，可在很少量的基礎(chǔ)上檢測(cè)，利于做回顧性研究。 ? 這一技術(shù)已廣泛 應(yīng)用于腫瘤基因組不平衡的檢測(cè) 。 14) 染色體技術(shù)的 應(yīng)用－ 2 inv(9)(p12q13) 分子細(xì)胞遺傳學(xué)： DMD基因第 46號(hào)外顯子缺失 細(xì)胞遺傳學(xué)研究中染色體技術(shù)的應(yīng)用 9號(hào)染色體涂染探針雜交。 應(yīng)用 15號(hào)染色體一基因特異性探針（紅色）雜交確定其是否缺失；綠色探針鑒定 15號(hào)染色體著絲粒。 ? 全染色體涂染探針 ：通過對(duì)來(lái)自特異性染色體分檢庫(kù)或僅含一條人類染色體的雜種細(xì)胞 DNA擴(kuò)增制備。在基因制圖方面的努力，越來(lái)越多的這方面探針可以使用 ? 著絲粒重復(fù)序列探針 ：這些特異性的探針可在中
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