常見(jiàn)緩沖溶液配制-全文預(yù)覽
【正文】 265315375435490550610670720 TE（用于懸浮和貯存DNA）成分及終濃度 配制100ml溶液各成分的用量 10mmol/L Tris－HCl1mmol/L EDTA水 1ml 1mol/L TrisHCl（，25℃） 200ul mol/L EDTA（pH ） Tris緩沖液（TrisHCl buffer） ，再根據(jù)所要求的pH（25℃下）加一定量的濃鹽酸（），用水調(diào)整終體積至1L。磷酸緩沖液（phosphate buffer） 按照下表所給定的體積，混合1 mol/L 的磷酸二氫鈉（單堿）和1mol/L 磷酸氫二鈉（雙堿）貯液，獲得所需pH的磷酸緩沖液。在37℃溫浴至少12h，然后在15 psi 條件下高壓滅菌20min，以使殘余的DEPC失活。100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions） 可以購(gòu)買到100mmol/L純dNTPs貯液，80℃可貯存至少6個(gè)月。100Denhardt試劑（Denhardt39。用水定容至1L。用1mol/L的Tris－，于20℃貯存。不要渦旋混合。6H2O于足量的水中，定容到100ml。1mol/L HEPES：，用NaOH調(diào)pH（），然后用水定容至100ml。3mol/L乙酸鈉（sodium acetate）：，再加水定容到100ml。1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：，分成小份貯存于20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：，加水定容至1L后。1mol/L亞精胺（Spermidine）: ，使終體積為10ml。17）10 mM ATP 組份濃度：10 mM ATP配制量：20 ml配制方法： 1. 稱取121 mg Na2ATP 6. 室溫保存。 3. （約20 g NaOH)。 4. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。KOAc12）Solution I(質(zhì)粒提取用)組份濃度：25 mM TrisHCl（), 10 mM EDTA, 50 mM Glucose配制量：1 L 配制方法： 1. 量取下列溶液，置于1 L燒杯中。 3. 高溫高壓滅菌后，4℃保存。10） N HCl組份濃度： N HCl配制量：100 ml配制方法： 1. ml的濃鹽酸（ N)，均勻混合。 9）2 N NaOH組份濃度：2 N NaOH配制量：100 ml配制方法： 1. 量取80 ml去離子水置于100～200 ml塑料燒杯中（NaOH溶解過(guò)程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂)。 7)苯酚/氯仿/異戊醇 (25 : 24 : 1)配制方法： 1. 說(shuō)明：從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇（25 : 24 : 1)。 2. 加去離子水將溶液定容至100 ml。 3. ，然后加入去離子水將溶液定容至1 L。4)3 M 醋酸鈉()組份濃度：3M 醋酸鈉 配制量：100ml配制方法： NaAc 3. 。 3. 將溶液定容至1 L后，高溫高壓滅菌。 5. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。實(shí)驗(yàn)室常用緩沖液配置方案1)1 M TrisHCl (, , )組份濃度：1 M TrisHCl配制量：1 L 配制方法： 1. g Tris置于1 L燒杯中。PH值 濃HCl 約70ml 約60ml 約42ml 4. 將溶液定容至1 L。1M Tris－HCl Buffer（，） 100ml 500mM EDTA() 20ml 2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水，均勻混合。 2. 加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門(mén)ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃。NaCl 8g KCl Na2HPO4 KH2PO4 2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?6)10 M 醋酸銨 組份濃度：
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