【正文】 酸酯鍵的酶，即后來(lái)研究的有機(jī)磷農(nóng)藥降解酶。一種有機(jī)磷農(nóng)藥可被多種微生物降解；同時(shí)，一種微生物也可對(duì)多種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行降解。這可能是因?yàn)楫?dāng)有機(jī)磷農(nóng)藥開(kāi)始加人土壤后，農(nóng)藥的濃度高對(duì)土壤中微生物生長(zhǎng)和活動(dòng)產(chǎn)生抑制作用，從而 對(duì)微生物體內(nèi)酶和土壤中的游離酶產(chǎn)生抑制作用，但有機(jī)磷農(nóng)藥能促進(jìn)土壤中一些微生物 (如細(xì)菌、真菌和放線菌等 )的生長(zhǎng)并抑制一些微生物 (如固氮菌 )的生長(zhǎng)，所以隨著細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量的增多以及農(nóng)藥濃度的減少，酶的活性也就提高了。Bello Ramirez A M(2020) [9]等也證實(shí)氯代過(guò)氧化物酶可以切斷有機(jī)磷農(nóng)藥中的PS 鍵。 YonezawwaY(1979)[8]等認(rèn)為當(dāng)微生物對(duì)有機(jī)化合物的降解作用是由其細(xì)胞內(nèi)的酶引起時(shí)，微生物降解的整個(gè)過(guò)程可以分為三個(gè)步驟 ： 首先是化合物在微生 7 物細(xì)胞膜表面的吸附，這是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡 ； 其次是吸附在細(xì)胞膜表面的化合物進(jìn)入細(xì)胞膜內(nèi)，在生物量一定時(shí)，化合物對(duì)細(xì)胞膜的穿透率決定了化合物穿透細(xì)胞膜的量 ； 最后是化合物進(jìn)入微生物細(xì)胞膜內(nèi)與降解酶結(jié)合發(fā)生酶促反應(yīng)，這是一個(gè)快速的過(guò)程。與其它的微生物相比，細(xì)菌具有適應(yīng)外界環(huán)境能力強(qiáng)和容易發(fā)生突變，因此，這些特點(diǎn)決定了細(xì)菌在降解農(nóng)藥方面占有不可替代的位置。 6 光學(xué)降解 農(nóng)藥經(jīng)過(guò)太陽(yáng)光或者紫外線的照射后，那些比較脆弱的化學(xué)鍵發(fā)生斷裂，因此，形成了特別活潑的中間產(chǎn)物 (自由基 )，隨后，自由基和溶劑或者其它物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，便得到了光解產(chǎn)物。OH 等 )來(lái)降解農(nóng)藥的。 過(guò)氧化氫法：以過(guò)氧化氫為氧化劑來(lái)降解農(nóng)藥，其降解產(chǎn)物和通過(guò)臭氧方法得到的反應(yīng)產(chǎn)物一樣。下面主要介紹前兩種方法。而在污染治理的實(shí)踐中，高效，無(wú)二次污染，以及低成本的生物降解越來(lái)越體現(xiàn)出了應(yīng)用的優(yōu)勢(shì)。 有機(jī)磷農(nóng)藥的這些特性無(wú)疑增加了人們的認(rèn)識(shí)，對(duì)某些高毒性農(nóng)藥使用的限制已經(jīng)日益法制化。有機(jī)磷農(nóng)藥的毒性除受農(nóng)藥自身性質(zhì)影響外，制劑中的某些毒性物質(zhì)，代謝過(guò)程中的中間體及降解產(chǎn)物也會(huì)使農(nóng)藥的毒 性大增。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)顯示，二十世紀(jì)八十年代以來(lái)，每年大約 3107公斤的有機(jī)磷農(nóng)藥被大量使用，導(dǎo)致每年有數(shù)千例農(nóng)藥中毒事件發(fā)生，直接死 亡數(shù)為 800 余人。土壤中的農(nóng)藥殘留導(dǎo)致土壤中的生物多樣性相對(duì)降低，多種種類(lèi)的生物減少，土質(zhì)降低，生產(chǎn)能力下降。研究表明有機(jī)磷農(nóng)藥在農(nóng)田施用時(shí)，只有 1%～ 2%的農(nóng)藥作用于害 蟲(chóng)或病菌，還有 10%～ 20%的農(nóng)藥附著在農(nóng)作物的表面，其余的農(nóng)藥會(huì)直接進(jìn)入環(huán)境，污染土壤、水和空氣，同時(shí)破壞了整個(gè)生態(tài)平衡 。 有機(jī)磷農(nóng)藥的危害 農(nóng)藥環(huán)境污染造成的損失是多方面的。有機(jī)磷農(nóng)藥結(jié)構(gòu)通式為 : 式中， R1 、 R2 在我國(guó)目前生產(chǎn)的品種中多為甲氧基 (CH3O)或乙氧基 (C2H5O)；X 為氧 (O)或硫 (S)原子 ； Z 為烷氧基、苯氧基或其他更為復(fù)雜的取代基團(tuán)。 有機(jī)磷農(nóng)藥的性質(zhì)及分類(lèi) 有機(jī)磷農(nóng)藥除少數(shù)品種為固體 (如樂(lè)果、敵百蟲(chóng) )外，多數(shù)為油狀液體，工業(yè)品呈淡黃色至棕色，具有大蒜樣特殊臭味。但從有機(jī)磷農(nóng)藥發(fā)展的整體趨勢(shì)而言，有機(jī)磷仍是當(dāng)今農(nóng)藥的主要類(lèi)別之一，它幾乎遍及農(nóng)藥的所有領(lǐng)域。 1930～ 1985 年有 147 個(gè)有機(jī)磷化合物被發(fā)現(xiàn)，并由 29 個(gè)公司開(kāi)發(fā)，其中 35%的化合物都由 Bayer 公司開(kāi)發(fā)，前 50個(gè)品種的開(kāi)發(fā)的時(shí)間，每個(gè)約需 2～ 3 年，成本也相當(dāng)便宜，后來(lái)的每個(gè)品種開(kāi)發(fā)的時(shí)間至少為 6 年，開(kāi)發(fā)費(fèi)不斷上漲。在有機(jī)磷農(nóng)藥的發(fā)展歷程中，不僅充分體現(xiàn)了它們具有經(jīng)濟(jì)和商業(yè)上的重要價(jià)值，而且為有機(jī)磷農(nóng)藥化學(xué)帶來(lái)了許多創(chuàng)新的機(jī)遇，同時(shí)隨著研究的深入，也引發(fā)了許多科學(xué)上的爭(zhēng)論。 Fungal growth will augment with the increase of carbon concentration. They can multiply more when the pH value is from 6 to 8. And they will reach their maximum value as the temperature is 30 ℃ . When the pesticide’s concentration is not so high, it has little effect to strain. In the degradation of strain, the extent of fungus’ growth conditions is wider than that of bacteria, and fungus’ application prospect is better. Keyword: Organophosphate 。葡萄糖促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng) ,農(nóng)藥濃度不高時(shí)對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)影響不大 ,細(xì)菌的最適 pH 為 ～ 8. 0 ，最適溫度為 37 ℃ ；真菌生長(zhǎng)量隨外加碳源濃度的增加而增加 ,在 pH ～ 8. 0時(shí)生長(zhǎng)量較大 ,溫度 30 ℃ 時(shí)其生長(zhǎng)量最大，農(nóng)藥濃度不大時(shí)對(duì)菌株影響不大。 論文作者簽名： 日 期： 年 月 日 目 錄 摘 要 ...........................................................................................................................I ABSTRACT .............................................................................................................. II 第一章 文獻(xiàn)綜述 ..................................................................................................... 1 有機(jī)磷農(nóng)藥概述 ............................................................................................... 1 發(fā)展簡(jiǎn)史 ................................................................................................. 1 有機(jī)磷農(nóng)藥的性質(zhì)及分類(lèi) ..................................................................... 2 有機(jī)磷農(nóng)藥的危害 ................................................................................. 3 本文采用的有機(jī)磷農(nóng)藥 ——毒死蜱 ..................................................... 4 環(huán)境中有機(jī)磷農(nóng)藥的降解方法 ...................................................................... 5 化學(xué)降解 ................................................................................................. 5 超聲波誘導(dǎo)降解法 ................................................................................ 5 光學(xué)降解 ................................................................................................ 6 生物降解 ................................................................................................ 6 有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物降解 .............................................................................. 6 有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物降解 途徑 ............................................................. 6 有機(jī)磷農(nóng)藥微生物降解的研究進(jìn)展 .................................................... 8 降解有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物種類(lèi) ............................................................. 9 第二章 有機(jī)磷農(nóng)藥降解菌的篩 選及生長(zhǎng)條件的研究 ............................. 11 試驗(yàn)材料 ......................................................................................................... 11 培養(yǎng)基 .................................................................................................. 11 樣品及試劑 ........................................................................................... 11 主要儀器及設(shè)備 ................................................................................... 11 試驗(yàn)方法 ........................................................................................................ 11 菌種的分離及篩選 ............................................................................... 11 菌種的鑒定 ........................................................................................... 13 生長(zhǎng)特性研究 ....................................................................................... 16 第三章 結(jié)果與分析 .............................................................................................. 18 ......................................................................................... 18 細(xì)菌分析結(jié)果 ....................................................................................... 18 真菌分析結(jié)果 ....................................................................................... 19 菌株生長(zhǎng)特 性 ................................................................................................. 20 不同碳源對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響 ............................................................... 20 最適碳源的不同濃度對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響 ........................................... 21 不同 pH 值對(duì)菌 株生長(zhǎng)的影響 ............................................................ 22 不同溫度對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響 ............................................................... 23 不同農(nóng)藥濃度對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響 ....................................................... 23 第四章 總結(jié)與展望 ...........................................................