【正文】 酸酯鍵的酶，即后來研究的有機(jī)磷農(nóng)藥降解酶。一種有機(jī)磷農(nóng)藥可被多種微生物降解；同時，一種微生物也可對多種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行降解。這可能是因為當(dāng)有機(jī)磷農(nóng)藥開始加人土壤后，農(nóng)藥的濃度高對土壤中微生物生長和活動產(chǎn)生抑制作用，從而 對微生物體內(nèi)酶和土壤中的游離酶產(chǎn)生抑制作用，但有機(jī)磷農(nóng)藥能促進(jìn)土壤中一些微生物 (如細(xì)菌、真菌和放線菌等 )的生長并抑制一些微生物 (如固氮菌 )的生長，所以隨著細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量的增多以及農(nóng)藥濃度的減少，酶的活性也就提高了。Bello Ramirez A M(2020) [9]等也證實氯代過氧化物酶可以切斷有機(jī)磷農(nóng)藥中的PS 鍵。 YonezawwaY(1979)[8]等認(rèn)為當(dāng)微生物對有機(jī)化合物的降解作用是由其細(xì)胞內(nèi)的酶引起時，微生物降解的整個過程可以分為三個步驟 ： 首先是化合物在微生 7 物細(xì)胞膜表面的吸附，這是一個動態(tài)平衡 ； 其次是吸附在細(xì)胞膜表面的化合物進(jìn)入細(xì)胞膜內(nèi)，在生物量一定時，化合物對細(xì)胞膜的穿透率決定了化合物穿透細(xì)胞膜的量 ； 最后是化合物進(jìn)入微生物細(xì)胞膜內(nèi)與降解酶結(jié)合發(fā)生酶促反應(yīng)，這是一個快速的過程。與其它的微生物相比，細(xì)菌具有適應(yīng)外界環(huán)境能力強(qiáng)和容易發(fā)生突變，因此，這些特點決定了細(xì)菌在降解農(nóng)藥方面占有不可替代的位置。 6 光學(xué)降解 農(nóng)藥經(jīng)過太陽光或者紫外線的照射后，那些比較脆弱的化學(xué)鍵發(fā)生斷裂，因此，形成了特別活潑的中間產(chǎn)物 (自由基 )，隨后，自由基和溶劑或者其它物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，便得到了光解產(chǎn)物。OH 等 )來降解農(nóng)藥的。 過氧化氫法：以過氧化氫為氧化劑來降解農(nóng)藥，其降解產(chǎn)物和通過臭氧方法得到的反應(yīng)產(chǎn)物一樣。下面主要介紹前兩種方法。而在污染治理的實踐中，高效，無二次污染，以及低成本的生物降解越來越體現(xiàn)出了應(yīng)用的優(yōu)勢。 有機(jī)磷農(nóng)藥的這些特性無疑增加了人們的認(rèn)識，對某些高毒性農(nóng)藥使用的限制已經(jīng)日益法制化。有機(jī)磷農(nóng)藥的毒性除受農(nóng)藥自身性質(zhì)影響外，制劑中的某些毒性物質(zhì)，代謝過程中的中間體及降解產(chǎn)物也會使農(nóng)藥的毒 性大增。國內(nèi)外文獻(xiàn)顯示，二十世紀(jì)八十年代以來，每年大約 3107公斤的有機(jī)磷農(nóng)藥被大量使用，導(dǎo)致每年有數(shù)千例農(nóng)藥中毒事件發(fā)生，直接死 亡數(shù)為 800 余人。土壤中的農(nóng)藥殘留導(dǎo)致土壤中的生物多樣性相對降低，多種種類的生物減少，土質(zhì)降低，生產(chǎn)能力下降。研究表明有機(jī)磷農(nóng)藥在農(nóng)田施用時，只有 1%～ 2%的農(nóng)藥作用于害 蟲或病菌，還有 10%～ 20%的農(nóng)藥附著在農(nóng)作物的表面，其余的農(nóng)藥會直接進(jìn)入環(huán)境，污染土壤、水和空氣，同時破壞了整個生態(tài)平衡 。 有機(jī)磷農(nóng)藥的危害 農(nóng)藥環(huán)境污染造成的損失是多方面的。有機(jī)磷農(nóng)藥結(jié)構(gòu)通式為 : 式中， R1 、 R2 在我國目前生產(chǎn)的品種中多為甲氧基 (CH3O)或乙氧基 (C2H5O)；X 為氧 (O)或硫 (S)原子 ； Z 為烷氧基、苯氧基或其他更為復(fù)雜的取代基團(tuán)。 有機(jī)磷農(nóng)藥的性質(zhì)及分類 有機(jī)磷農(nóng)藥除少數(shù)品種為固體 (如樂果、敵百蟲 )外，多數(shù)為油狀液體，工業(yè)品呈淡黃色至棕色，具有大蒜樣特殊臭味。但從有機(jī)磷農(nóng)藥發(fā)展的整體趨勢而言，有機(jī)磷仍是當(dāng)今農(nóng)藥的主要類別之一，它幾乎遍及農(nóng)藥的所有領(lǐng)域。 1930～ 1985 年有 147 個有機(jī)磷化合物被發(fā)現(xiàn)，并由 29 個公司開發(fā)，其中 35%的化合物都由 Bayer 公司開發(fā)，前 50個品種的開發(fā)的時間，每個約需 2～ 3 年，成本也相當(dāng)便宜，后來的每個品種開發(fā)的時間至少為 6 年，開發(fā)費不斷上漲。在有機(jī)磷農(nóng)藥的發(fā)展歷程中，不僅充分體現(xiàn)了它們具有經(jīng)濟(jì)和商業(yè)上的重要價值，而且為有機(jī)磷農(nóng)藥化學(xué)帶來了許多創(chuàng)新的機(jī)遇，同時隨著研究的深入，也引發(fā)了許多科學(xué)上的爭論。 Fungal growth will augment with the increase of carbon concentration. They can multiply more when the pH value is from 6 to 8. And they will reach their maximum value as the temperature is 30 ℃ . When the pesticide’s concentration is not so high, it has little effect to strain. In the degradation of strain, the extent of fungus’ growth conditions is wider than that of bacteria, and fungus’ application prospect is better. Keyword: Organophosphate 。葡萄糖促進(jìn)細(xì)菌的生長 ,農(nóng)藥濃度不高時對細(xì)菌生長影響不大 ,細(xì)菌的最適 pH 為 ～ 8. 0 ，最適溫度為 37 ℃ ；真菌生長量隨外加碳源濃度的增加而增加 ,在 pH ～ 8. 0時生長量較大 ,溫度 30 ℃ 時其生長量最大，農(nóng)藥濃度不大時對菌株影響不大。 論文作者簽名： 日 期： 年 月 日 目 錄 摘 要 ...........................................................................................................................I ABSTRACT .............................................................................................................. II 第一章 文獻(xiàn)綜述 ..................................................................................................... 1 有機(jī)磷農(nóng)藥概述 ............................................................................................... 1 發(fā)展簡史 ................................................................................................. 1 有機(jī)磷農(nóng)藥的性質(zhì)及分類 ..................................................................... 2 有機(jī)磷農(nóng)藥的危害 ................................................................................. 3 本文采用的有機(jī)磷農(nóng)藥 ——毒死蜱 ..................................................... 4 環(huán)境中有機(jī)磷農(nóng)藥的降解方法 ...................................................................... 5 化學(xué)降解 ................................................................................................. 5 超聲波誘導(dǎo)降解法 ................................................................................ 5 光學(xué)降解 ................................................................................................ 6 生物降解 ................................................................................................ 6 有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物降解 .............................................................................. 6 有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物降解 途徑 ............................................................. 6 有機(jī)磷農(nóng)藥微生物降解的研究進(jìn)展 .................................................... 8 降解有機(jī)磷農(nóng)藥的微生物種類 ............................................................. 9 第二章 有機(jī)磷農(nóng)藥降解菌的篩 選及生長條件的研究 ............................. 11 試驗材料 ......................................................................................................... 11 培養(yǎng)基 .................................................................................................. 11 樣品及試劑 ........................................................................................... 11 主要儀器及設(shè)備 ................................................................................... 11 試驗方法 ........................................................................................................ 11 菌種的分離及篩選 ............................................................................... 11 菌種的鑒定 ........................................................................................... 13 生長特性研究 ....................................................................................... 16 第三章 結(jié)果與分析 .............................................................................................. 18 ......................................................................................... 18 細(xì)菌分析結(jié)果 ....................................................................................... 18 真菌分析結(jié)果 ....................................................................................... 19 菌株生長特 性 ................................................................................................. 20 不同碳源對菌株生長的影響 ............................................................... 20 最適碳源的不同濃度對菌株生長的影響 ........................................... 21 不同 pH 值對菌 株生長的影響 ............................................................ 22 不同溫度對菌株生長的影響 ............................................................... 23 不同農(nóng)藥濃度對菌株生長的影響 ....................................................... 23 第四章 總結(jié)與展望 ...........................................................