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畢業(yè)論文巴西橡膠樹乙烯途徑中抑制因子ein3的western印跡-全文預(yù)覽

2025-07-14 06:55 上一頁面

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【正文】 后者在堿性溶液中與BCA 結(jié)合生成紫紅色絡(luò)合物。其他幾個(gè)時(shí)間處理按此步驟提取蛋白并20度保存。后面分別隔1h、4h、6h、12h、24h從兩株橡膠樹上取葉片鋁箔包裹并標(biāo)記后保存于80度冰箱。l 10% SDS 25181。l 10% APS 70181。對(duì)巴西橡膠樹木質(zhì)器官進(jìn)行的錘擊實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,巴西橡膠樹木質(zhì)器官遭到機(jī)械創(chuàng)傷后與離體的組織器官一樣,會(huì)產(chǎn)生傷害乙烯。乙烯最重要的生物學(xué)反應(yīng)是黃化胚芽的三重反應(yīng):即莖桿的偏向水平生長、下胚軸膨脹變粗和頂端鉤狀芽彎曲的加劇。ACC被其氧化酶催化形成乙烯、HCN和二氧化碳。[3]我國橡膠產(chǎn)業(yè)發(fā)展的戰(zhàn)略定位是“鞏固”、“提升”、“穩(wěn)定”、“發(fā)展”。年降雨量1500一2500mm,但干濕季節(jié)明顯,11月至翌年4月為旱季,5月一10月為雨季, 降雨量占全年的60一90%,相對(duì)濕度在80%以上,由于中國植膠區(qū)位于赤道以北18一24度,大大超過了世界植膠的熱帶地區(qū)(赤道以南10 度至赤道以北15度)的界限,是公認(rèn)的不宜植膠地,主要問題是臺(tái)風(fēng)和低溫兩大自然災(zāi)害,對(duì)橡膠樹的影響帶來了一系列的問題。保障我國的天然橡膠資源的安全,事關(guān)中國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和穩(wěn)定,對(duì)世界天然橡膠的安全保障也具有非常重要的意義。關(guān)鍵詞:巴西橡膠、定蛋白、乙烯途徑、免疫印跡目錄摘要Abstract1前言2實(shí)驗(yàn)器材及試劑配方、試劑配方3方法步驟:(SDS)聚丙烯酰胺凝膠電泳4結(jié)果與分析1前言 天然橡膠是經(jīng)濟(jì)建設(shè)和國防建設(shè)不可缺少的稀缺資源和戰(zhàn)略物資,它與石油、鐵礦石、有色金屬并列為四種緊缺型工業(yè)原料,在生產(chǎn)地域和產(chǎn)品的性能上具有不可替代的作用。因此對(duì)巴西橡膠樹的研究有著極其重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和戰(zhàn)略作用。世界上超過90%的天然橡膠是來自巴西橡膠樹。在此過程中運(yùn)用三種不同的方法測(cè)定葉片蛋白的濃度,并對(duì)其準(zhǔn)確性進(jìn)行對(duì)比分析。目前我國天然橡膠資源供需缺口日趨擴(kuò)大、進(jìn)口依賴性日益增強(qiáng)、自給能力不斷下滑等問題的存在,這對(duì)于我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展和國防建設(shè)是極其危險(xiǎn)的。[1]中國植膠區(qū)地處熱帶和南亞熱帶地區(qū),水熱條件充沛,具有發(fā)展橡膠樹的一定條件,特別是海南、云南的西雙版納等地,常年基本無霜,年均日照時(shí)數(shù)達(dá)到17 00一2400hr ,℃,℃以上。另外,分子標(biāo)記技術(shù)在橡膠育種中的應(yīng)用的研究,橡膠樹的遺傳轉(zhuǎn)化體系完善的研究力度都有待進(jìn)一步的加大。[4]在所有的維管植物生命活動(dòng)中乙烯都是通過楊氏循環(huán)合成的,即S腺苷甲硫氨酸被ACC合成酶所催化形成乙烯前體1氨基環(huán)丙烷羧酸(ACC)。首先,在種子萌發(fā)期,乙烯可以促進(jìn)下胚軸膨脹變粗,使其容易破土而出;乙烯還對(duì)陸生植物莖的延伸有著抑制作用,可以使樹干變得更粗以抵抗大風(fēng)的侵襲,而對(duì)半水生植物莖的生長有很強(qiáng)的促進(jìn)作用;它還可以幫助水淹植物維持生命,還可以抵抗病菌對(duì)植物的侵襲;其次,在植物成熟期,乙烯可以影響植物的性別分化并促進(jìn)其果實(shí)成熟;乙烯在葉片和花的衰老中亦起到重要的作用。[7]除此之外,物理壓力、昆蟲或微生物的侵襲、化學(xué)處理、輻射、干旱和極端溫度等也能刺激植物組織產(chǎn)生乙烯。EIN3 編碼一個(gè)由628個(gè)氨基酸組成的轉(zhuǎn)錄因子. EIN3/EIL1可以劃分為3個(gè)基本的結(jié)構(gòu)域: DNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域(80359aa)、二聚體化結(jié)構(gòu)域(113257aa)和C 端.[10] 2實(shí)驗(yàn)器材及試劑配方 20度冰箱、80度冰箱、研缽、量筒、試劑瓶、烘箱、氣浴鍋、分析天平、各個(gè)量程的移液槍、通風(fēng)櫥、電泳儀、轉(zhuǎn)膜儀、滅菌鍋、制冰機(jī)、搖床、50ml離心管、微波爐、鑷子、剪刀、培養(yǎng)皿、各個(gè)規(guī)格的槍頭、離心機(jī)、分光光度計(jì)、真空干燥儀、試劑配方(1)Esen fixing buffer (蛋白固定液) 異丙醇 25% 乙酸 10% 去離子水 65%(2)Esen staining buffer(蛋白染色液) % coomassie brilliant blue G250 dissolved in Esen fixing buffer(3)Protein extraction buffer(蛋白提取液) Triscl Glycerin 20% SDS 2% Bromphend blue a little βmerkapto ethanol 1%(4)SDSPAGE 凝膠 10% 7ml 40%
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